1、 血液常用检查(二)血液常用检查(二)主要内容主要内容 白细胞计数白细胞计数 白细胞分类计数白细胞分类计数 白细胞形态学检查白细胞形态学检查 血小板计数血小板计数 血小板形态检查血小板形态检查 白细胞计数白细胞计数(white blood cell count,WBC):指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。检测原理检测原理(显微镜计数法)(显微镜计数法)用白细胞计数稀释液用白细胞计数稀释液(稀乙酸稀乙酸),将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞和固定白细胞将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞和固定白细胞 充入改良牛鲍充入改良牛鲍(Neubauer)计数板,
2、计数板,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数在显微镜下计数一定范围内的白细胞数 经换算求得每升血液中各种白细胞的总数。经换算求得每升血液中各种白细胞的总数。一、白细胞计数一、白细胞计数【质量保证质量保证】1计数误差计数误差 (1)技术误差:规范、熟练的操作,仪器的校正、技术误差:规范、熟练的操作,仪器的校正、试剂的标准化和操作人责任心。试剂的标准化和操作人责任心。1)器材:清洁、干燥,校准,合格试剂。器材:清洁、干燥,校准,合格试剂。2)标本要求:血液分析仪检测的标本要求及质量保标本要求:血液分析仪检测的标本要求及质量保证见表证见表225。3)加盖玻片影响:加盖玻片影响:WHO推荐采用“推式”法
3、,此法推荐采用“推式”法,此法较“盖式”法更能保证充液体积的高度为较“盖式”法更能保证充液体积的高度为0.10mm。4)充池影响:充池影响:充池前充分混匀白细胞悬液,避免气泡。充池前充分混匀白细胞悬液,避免气泡。充池应避免充液过多、过少、断续,避免气泡及充池应避免充液过多、过少、断续,避免气泡及充液后移动盖玻片。充液后移动盖玻片。技术误差技术误差 5)计数原则:计数压线细胞时,计数原则:计数压线细胞时,数上不数下数上不数下,数左不数右。数左不数右。6)计数室内细胞分布要均匀:白细胞总数在正常范围计数室内细胞分布要均匀:白细胞总数在正常范围内时,内时,各大方格间的细胞数不得相差各大方格间的细胞数
4、不得相差8个以上。个以上。2次重次重复计数误差不超过复计数误差不超过l0。7)有核红细胞影响:外周血出现有核红细胞,可使白有核红细胞影响:外周血出现有核红细胞,可使白细胞计数结果偏高,须校正。细胞计数结果偏高,须校正。技术误技术误差差(2)固有误差:主要是指计数域误差固有误差:主要是指计数域误差(field error)。是由于每次充池后血细胞在计数室内分布不同是由于每次充池后血细胞在计数室内分布不同 计数域误差变异系数计数域误差变异系数(CV)可可随计数的细胞数量增多而随计数的细胞数量增多而减小。减小。白细胞数量太少时白细胞数量太少时(15X109L)稀释稀释 固有误差还应包括计数室和吸管的
5、使用次数,即计固有误差还应包括计数室和吸管的使用次数,即计数池误差数池误差(chambererror)和吸管误差和吸管误差 计数误计数误差差 3)生理状态影响:生理状态影响:运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒等常出现一运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒等常出现一过性白细胞增高;一日之内白细胞数最高值与最低值过性白细胞增高;一日之内白细胞数最高值与最低值可相差可相差1倍。另外,吸烟者白细胞总数平均较非吸烟者倍。另外,吸烟者白细胞总数平均较非吸烟者高高30。最好在固定检查时间最好在固定检查时间。计数误计数误差差 2质量考核与评价质量考核与评价 (1 1)经验控制经验控制 (1 1)与红细胞数相对比较:
6、正常范围下与红细胞数相对比较:正常范围下,红细胞数红细胞数白细胞数约为白细胞数约为500500:1 1。(2 2)判断白细胞计数与显微镜白细胞分布密度一致判断白细胞计数与显微镜白细胞分布密度一致性性(表表2 24 4):由于手工制备血涂片难以标准化:由于手工制备血涂片难以标准化,因此因此也只能粗略估计也只能粗略估计,有矛盾者再复查有矛盾者再复查。表表24 血涂片上血涂片上WBC密度与密度与WBC数量关系数量关系 血涂片上血涂片上WBC数:数:HP WBC(109L)24 4 7 4 6 79 6 10 10 12 10 12 13 18(2).两差比值评价法两差比值评价法(3).双份计数标准差
7、评价法双份计数标准差评价法 2质量考核与评价质量考核与评价 成人:成人:(410)109L 新生儿:新生儿:(15 20)109L 6月月2岁:岁:(11 12)109L 参考值参考值 10109L称白细胞增多称白细胞增多(1eukocytosis),4109L称白细胞减低称白细胞减低(1eukopenia)。白细胞数在生理或病理情况下均可有变异白细胞数在生理或病理情况下均可有变异。由于中性粒细胞占白细胞总数的由于中性粒细胞占白细胞总数的5070,其增其增高和减低直接影响白细胞总数的变化高和减低直接影响白细胞总数的变化,中性粒细胞增中性粒细胞增减的意义与白细胞总数的增减的意义基本上是一致的减的
8、意义与白细胞总数的增减的意义基本上是一致的。有时两者的数量关系也有不一致的情况有时两者的数量关系也有不一致的情况,要具体情要具体情况具体分析况具体分析。临床意义 白细胞分类计数白细胞分类计数(differential count,DC)是将血液制是将血液制成涂片成涂片,经染色后在油镜下观察白细胞的形态并进经染色后在油镜下观察白细胞的形态并进行分类行分类,求得各种类型白细胞的比值求得各种类型白细胞的比值(百分率百分率)。分析白细胞分类变化意义时分析白细胞分类变化意义时,必须计算各类型白细必须计算各类型白细胞的绝对值胞的绝对值(各类型白细胞绝对值白细胞计数值各类型白细胞绝对值白细胞计数值白细胞分类
9、计数百分率白细胞分类计数百分率),才有诊断参考价值才有诊断参考价值。白细胞分类计数的方法有两种:白细胞分类计数的方法有两种:一种是传统显微镜分类法一种是传统显微镜分类法,一种是血液分析仪分类计数法一种是血液分析仪分类计数法。二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数 检测原理检测原理(显微镜分类法显微镜分类法)将血液涂成薄膜将血液涂成薄膜,经经Wright染色后染色后,于显微镜下于显微镜下,按白细胞形态学特征逐个分按白细胞形态学特征逐个分别计数别计数,得出各种白细胞百分率得出各种白细胞百分率。结合白细胞计数结果结合白细胞计数结果,可间接求出每升血可间接求出每升血液中各种白细胞的绝对值液中各种白细胞的
10、绝对值。质量控制质量控制 分析前质量控制分析前质量控制 分析中质量控制分析中质量控制 血涂片制备血涂片制备 染色染色 镜检部位镜检部位 镜检白细胞数量镜检白细胞数量 分析后质量控制分析后质量控制 成人白细胞分类参考值成人白细胞分类参考值 百分率百分率()绝对值绝对值(109L)中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞 1 5 0.04 0.5 中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞 50 70 2 7 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 0.5 5 0.05 0.5 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞 0 1 0 1 淋巴细胞淋巴细胞 20 40 0.8 4 单核细胞单核细胞 3 8 0.12 0.8 参考值参考值 正常情况下
11、正常情况下,中性杆状核粒细胞占中性杆状核粒细胞占1一一5,中性分叶核粒细胞占中性分叶核粒细胞占50一一70,2叶核细胞为叶核细胞为1030,3叶核为叶核为4050,4叶核为叶核为10一一20,5叶核小于叶核小于3 3。正常时正常时,外周血中性粒细胞核以外周血中性粒细胞核以3叶的居多叶的居多,杆杆状核与分叶核之间的正常比值为状核与分叶核之间的正常比值为 l :13。参考值参考值 1 1.中性粒细胞增多中性粒细胞增多 白细胞总数与中性粒细胞白细胞总数与中性粒细胞(neutrophil(neutrophil,N)N)白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的定义见表白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的
12、定义见表.在外周血中,由于中性粒细胞占白细胞总数在外周血中,由于中性粒细胞占白细胞总数的的5050一一7070,临床意义基本一致。,临床意义基本一致。淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。因此,还应具体分析。会引起白细胞总数的变化。因此,还应具体分析。临床意义 1)中性粒细胞中性粒细胞生理性增多:生理性增多:常不伴有白细胞质量的改常不伴有白细胞质量的改变变。年龄:年龄:临床意义临床意义 1)生理性增多:生理性增多:日间变化:一日之间最高值与最低值之间可相差日间变化:一日之间最高值与最低值之间可相差1倍倍。运动运动、疼痛和情绪的影响:
13、如剧烈运动可使短时间疼痛和情绪的影响:如剧烈运动可使短时间内白细胞高达内白细胞高达35X109L,以中性粒细胞为主以中性粒细胞为主。当当运动运动结束后迅即恢复原有水平结束后迅即恢复原有水平。妊娠与分娩:分娩后妊娠与分娩:分娩后2 5d内恢复正常内恢复正常。其他:吸烟者其他:吸烟者 白细胞的生理波动很大白细胞的生理波动很大,30%以内波动多无意义以内波动多无意义,只只有通过定时和反复观察才有意义有通过定时和反复观察才有意义。2)病理性增多:病理性增多:外周血白细胞外周血白细胞 1 10X109L 反应性增多反应性增多,可见于:可见于:A A、急性感染或炎症急性感染或炎症:为引起白细胞总数和中:为
14、引起白细胞总数和中性粒细胞增多最常见的原因性粒细胞增多最常见的原因。球菌球菌、杆菌杆菌、真菌真菌、放线菌放线菌、病毒病毒、立克次体立克次体、螺旋体螺旋体、寄生虫等寄生虫等。增高程度与病原体种类增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及感染部位和程度以及机体机体的反应性等有关的反应性等有关 B B、类白血病反应类白血病反应:指机体在有明确病因的刺激下:指机体在有明确病因的刺激下,出出现白细胞数中度增高现白细胞数中度增高(50Xl09L),多以成熟中性粒细胞多以成熟中性粒细胞增多为主增多为主,原始原始、早幼粒细胞增多少见早幼粒细胞增多少见(10),常伴较明常伴较明显的中性粒细胞中毒性改变显的中性粒细
15、胞中毒性改变,其他细胞均无明显变化其他细胞均无明显变化。C C.广泛组织损伤或坏死广泛组织损伤或坏死:严重外伤严重外伤、手术创伤手术创伤、大面积烧伤大面积烧伤、冻伤以及冻伤以及血管栓塞血管栓塞(如心肌梗死如心肌梗死、肺梗死肺梗死)所致局部缺血性坏死所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者等使组织严重损伤者,在在1236h内常见白细胞增高内常见白细胞增高,以中性分叶核粒细胞增多为主以中性分叶核粒细胞增多为主。有无术后感染有无术后感染,与心绞痛鉴别与心绞痛鉴别。D、急性溶血急性溶血:缺氧及分解产物刺激:缺氧及分解产物刺激 E、急性失血急性失血:消化道大量出血消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管内脏
16、破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等妊娠破裂等,白细胞总数常在白细胞总数常在12h内迅速增高内迅速增高,可达可达(10 20)X109L,但此时的红细胞数和血红蛋白量仍可暂时保持正常但此时的红细胞数和血红蛋白量仍可暂时保持正常范围范围,待组织间液吸收回血液或补充循环血容量后待组织间液吸收回血液或补充循环血容量后,才出现红细胞和血红蛋白减低才出现红细胞和血红蛋白减低。早期诊断内出血的参考指标早期诊断内出血的参考指标。F F、急性中毒:急性中毒:a、外源性中毒外源性中毒:化学物质或药物如汞:化学物质或药物如汞、铅铅、安眠药急性中毒安眠药急性中毒,生物毒素如昆虫毒生物毒素如昆虫毒、蛇毒以蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒及植物毒素如毒蕈中毒。b、内源性中毒内源性中毒:如尿毒症:如尿毒症、糖尿病酮症酸糖尿病酮症酸中毒中毒、子痫子痫、内分泌疾病危象等内分泌疾病危象等。G、恶性肿瘤:恶性肿瘤:非造血系统恶性肿瘤可出现持续性白细胞增高非造血系统恶性肿瘤可出现持续性白细胞增高,以中性分叶核粒细胞增多为主以中性分叶核粒细胞增多为主。其机制可能为:其机制可能为:肿瘤坏死分解产物刺激肿瘤坏死分解产物刺激 肿瘤细胞肿瘤细胞