1、2022 年天津市 1 例非产毒白喉棒状杆菌携带者流行病学调查郭玉婷1，张颖1，李闻1，丁亚兴1，于爽2，刘莹1，张维1，曲江文1(1天津市疾病预防控制中心，天津 300011;2天津市和平区疾病预防控制中心，天津 300070)DOI:10.19914/j.CJVI.2023006通信作者:丁亚兴，Email:louisdyx 163com第一作者 Email:guoyuting_mcdull 163com摘要:目的 对天津市 2022 年 1 例报告疑似白喉病例进行鉴定。方法 采集该病例咽拭子、全血和肺泡灌洗液标本，进行白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae，
2、Cd)核酸检测、细菌分离培养、生化鉴定和毒力基因检测。结果 该病例为女性，29 岁，无国外旅居史;2022 年7 月 25 日出现咳嗽等症状并住院治疗，无白喉样症状，咽拭子和肺泡灌洗液标本 Cd 核酸均阳性，分离培养和生化鉴定检出 Cd，Cd 毒力基因检测阴性，2022 年 8 月 8 日治愈出院。结论 该病例为非产毒 Cd 携带者，排除白喉诊断;需加强疑似白喉的及时发现、报告和规范处置。关键词:白喉;白喉棒状杆菌;毒力基因;带菌者中图分类号:183.3;184.6文献标识码:A文章编号:1006916X(2023)01003104Epidemiological investigation o
3、f a non-toxic corynebacterium diphtheriae carrier in Tianjin in 2022Guo Yuting1，Zhang Ying1，Li Wen1，Ding Yaxing1，Yu Shuang2，Liu Ying1，Zhang Wei1，QuJiangwen1(1Tianjin Center for Disease Control and Prevention，Tianjin 300011，China;2Heping DistrictCenter for Disease Control and Prevention，Tianjin 30007
4、0，China)Abstract:Objective To make a definitive diagnosis in a suspected diphtheria patient reported in Tianjinin 2022Methods We collected pharyngeal swabs，whole blood samples，and bronchoalveolar lavage fluidsamples from the patient and tested for Corynebacterium diphtheriae(Cd)nucleic acid，attempte
5、dbacterial isolation and culture，conducted biochemical tests，and tested for presence of a virulence-associated geneesults The patient was a 29year-old female with no history of traveling abroad whodeveloped a cough on July 25，2022 and was hospitalized for evaluation and treatment She had no signsor
6、symptoms of diphtheria Pharyngeal swab and bronchoalveolar lavage fluid samples were positive for Cdnucleic acid Cd was detected by bacterial culture and biochemical tests，but samples were negative forCd virulence gene The patient recovered and was discharged from the hospital on August 8，2022Conclu
7、sions The patient was a carrier of non-toxic Cd and was not diagnosed with diphtheria We need tostrengthen timely detection，reporting，and standardized response to suspected diphtheria casesKey words:Diphtheria;Corynebacterium diphtheriae;Virulence gene;Carrier白 喉 是 由 白 喉 棒 状 杆 菌(Corynebacteriumdipht
8、heriae，Cd)引起的急性呼吸道传染病。Cd 存在于患者或带菌者的鼻咽腔内，经飞沫或污染物品传播，主要侵犯咽部，形成灰白色假膜，能产生强烈的外毒素，可通过血液循环将毒素扩散，引起多种器官病变。自 1974 年全球实施扩大免疫规划以来，含白喉成分疫苗预防接种使全球白喉发病率急剧下降，19802000 年报告白喉病例减少了 90%以上1。20072019 年中国无白喉病例报告，2020 年福建省厦门市报告 1 例输入皮肤白喉病例2。天津市19982021 年已连续 24 年未报告本地白喉病例。2022 年 8 月 3 日，天津医科大学总医院报告了 1 例疑似白喉住院病例，其肺泡灌洗液标本的病原
9、体靶向高通量测序(Targeted next generation sequencing，tNGS)初步鉴定为 Cd 阳性。天津市和平区疾病预防 控 制 中 心(Centerfordiseasecontroland13中国疫苗和免疫 2023 年 2 月第 29 卷第 1 期prevention，CDC)接到报告后立即上报天津市 CDC，对该疑似白喉病例及其密切接触者开展流行病学调查和标本采集，送至天津市 CDC 进行实验室检测和复核，同时指导医院开展处置工作。材料与方法1流行病学调查疑似白喉病例为天津医科大学总医院呼吸内科住院患者。采用现场流行病学调查方法，查阅病例病历，询问医生、病例及其家
10、属，按照 天津市白喉监测方案 中“白喉疑似病例流行病学个案调查表”进行个案调查，同时对其密切接触者进行调查。2标本采集天津市和平区 CDC 于 2022 年 8 月 3 日采集病例咽拭子 2 份和全血标本 1 份，8 月 4 日采集病例肺泡灌洗液血平板涂抹标本 1 份，8 月 5 日采集病例母亲咽拭子标本 2 份;东丽区 CDC 于 8 月 5 日采集病例姐姐咽拭子 2 份和全血标本 1 份，8 月 11 日再次采集病例咽拭子标本 2 份。标本采集后立即常温运送到天津市 CDC 进行实验室检测和复核。3实验室病原学检测根据白喉诊断标准(WS 2752007)3 附录 B 中 Cd 分离培养方法
11、/生化鉴定仪器操作规程、试剂盒说明书，对病例及其密切接触者的标本进行 Cd 细菌分离培养/生化鉴定、聚合酶链反应(Polymerase chainreaction，PC)核酸检测和毒力基因检测。采用亚碲酸钾血平板和梅里埃生化鉴定仪进行细菌分离培养和生化鉴定，检测试剂盒均为江苏硕世生物科技股份有限公司生产，按照说明书在有效期内操作。4病例诊断标准疑似病例:具有咽白喉、喉白喉、鼻白喉和其他部位白喉的临床表现。临床诊断病例:疑似病例咽拭子直接涂片镜检可见革兰氏阳性棒状杆菌，并有异染颗粒，参考多在秋冬季节发病和 1 周内与白喉病人有直接或间接接触史。确诊病例:疑似病例同时符合 Cd 分离培养阳性并证明
12、能产生外毒素，或病人急性期和恢复期血清特异性抗体呈4 倍增长。结果1病例发病和诊疗经过患者，女，1993 年 3 月出生(29 岁)，现居住于天津市，与其双胞胎姐姐同住，从事家具设计，自述接种过含白喉成分疫苗，但无接种记录。2022 年7 月25 日因无诱因咳嗽、咳黄色粘痰，伴有胸闷、咽痛、鼻塞、声音嘶哑，就诊于天津医科大学总医院呼吸内科门诊，胸部电子计算机断层扫描显示，两肺支气管炎、细支气管炎，部分支气管扩张，继发感染;右肺上叶和两肺下叶多发支气管粘液栓;右肺中叶不张。最终诊断为支气管扩张伴感染;肺部阴影。病例无发热、无犬吠样咳嗽，咽、喉、鼻和其他组织未见灰白色假膜特征，无皮肤损害，新型冠状
13、病毒核酸检测阴性。于 7 月 27 日收治入院，7 月 28 日血常规检测未见异常，无白细胞增高(7.21109/L)，粪便检测未见虫卵。7 月 29 日对病例行支气管镜治疗，同时采集其肺泡灌洗液标本进行细菌分离培养，结果显示棒状杆菌等可疑菌落。8 月 3 日对培养的细菌菌落完成 tNGS 检测，初步鉴定为 Cd 阳性，病例当天开始使用青霉素治疗。8 月 4 日将肺泡灌洗液标本进行 PD-seq 病原宏基因组 DNA 检测，结果仍为 Cd 阳性，Cd 基因组覆盖度为 38.648%，未检出真菌、病毒、寄生虫、结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌、支原体、衣原体、立克次体、耐药基因等，立即对病例实
14、施单间隔离住院治疗。8 月 5 日进一步采集病例深部痰液标本进行 tNGS 检测，结果仍为 Cd阳性(表 1)。病例于 8 月 8 日治愈出院。表 12022 年天津市 1 例疑似白喉病例临床采集标本病原学检测标本类型份数采样日期检测结果肺泡灌洗液12022 年7 月29 日 细菌分离培养:棒状杆菌等可疑菌落血平板12022 年 8 月 3 日tNGS:Cd 阳性肺泡灌洗液12022 年 8 月 4 日PD-seq 病原宏基因组 DNA检测:Cd 阳性深部痰液12022 年 8 月 5 日tNGS:Cd 阳性2既往病史、旅居史、接触史和密切接触者病例与其姐姐自小经常咳嗽，但无咽部红、痒、化脓、
15、白膜、中毒等症状;2022 年 7 月 310 日一同到浙江省舟山市、慈溪市和宁波市旅游，旅行中未接触过白喉病例和有相同咳嗽症状者，7 月 10 日返回天津，无国外旅居史;病例未接触过白喉病例，除其姐姐外未接触过有相同咳嗽症状者;7 月 14 日其姐姐因咳嗽加重，在天津医科大学总医院就诊，诊断为支气管扩张，遂入院行支气管镜治疗，致病菌相关检查均未检出 Cd。自 7 月 14 日起，病例母亲从吉林省来天津在医院陪护病例姐姐和病例本人，未出现白喉相关症状。3病原学检测病例咽拭子标本 Cd PC 核酸阳性，细菌分离培养和生化鉴定检出 Cd，全血标本 PC 核酸和细菌分离培养均阴性，肺泡灌洗液血平板涂
16、抹标本 Cd PC核酸阳性，分离培养和生化鉴定检出 Cd;Cd 毒力基因 PC 检测阴性;病例姐姐和母亲咽拭子和全血标本 Cd PC 核酸和分离培养均阴性;病例治愈出院后咽拭子标本 Cd PC 核酸和分离培养均阴性(表 2)。23CHINESE JOUNAL OF VACCINES AND IMMUNIZATION Vol29No12023表 22022 年天津市 1 例疑似白喉病例及其密切接触者流行病学调查采集标本病原学检测检测对象标本类型份数采样日期Cd PC 核酸检测Cd 分离鉴定Cd 毒力基因 PC 检测病例咽拭子(干)12022 年 8 月 3 日阳性阳性阴性咽拭子(甘油)12022 年 8 月 3 日阳性阳性阴性全血12022 年 8 月 3 日阴性阴性病例血平板12022 年 8 月 4 日阳性阳性阴性病例姐姐咽拭子(干)12022 年 8 月 5 日阴性阴性咽拭子(甘油)12022 年 8 月 5 日阴性阴性全血12022 年 8 月 5 日阴性阴性病例母亲咽拭子(干)12022 年 8 月 5 日阴性阴性咽拭子(甘油)12022 年 8 月 5 日阴性阴性病例咽拭子(
