1、GB中华人民共和国国家标准GB28316-2012食品安全国家标准食品添加剂番茄红2012-04-25发布2012-06-25实施中华人民共和国卫生邵发布GB28316-2012A.3.3.2柱温：25。A.3.3.3检测器：紫外/可见光检测器或二极管阵列检测器。A.3.3.4检测波长：472nm。A.3.3.5流动相：流动相A为乙腈溶液(9+1)，流动相B为乙酸乙酯。洗脱条件为二元线型梯度：流动相B在20min内由0%上升到100%，20min后流动相B保持100%运行5min。A.3.3.6:1.0 mL/min。A.3.3.7进样：10L。A.3.4分析步骤A.3.4.1BHT溶液的配准
2、确称量2.5gBHT置于500mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，浓度为5000mg/L,密闭避光放置，可稳定储存3个月。A.3.4.2番茄红素对照品溶液的配制分别称取10mg番茄红素对照品和20mgBHT,精确至0.0001g,取少量二氯甲烷溶解后，转移至100mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，混合均匀。由于番茄红素不稳定，番茄红素对照品溶液使用前应采用A.3.4.3方法标定其纯度。番茄红素对照品溶液应在-20条件下储存，24h内可使用。A.3.4.3番茄红素对照品溶液的标定量取1 mL(V)番茄红素对照品溶液，置于50 mL(Vg)棕色容量瓶中，加入5mL乙醇和5mLBHT溶液，用石油醚定容
3、，混匀。将此溶液置于1cm比色皿中，以石油醚作空白对照，用紫外-可见光分光光度计在472nm附近的最大吸收波长处测定吸光度。吸光度应控制在0.30.7之间，否则应调整溶液浓度，再重新测定吸光度。番茄红素对照品溶液中番茄红素浓度以c计，单位为毫克每升(mg/L),按公式(A.1)计算：ATmA X D10 000CST.(A.1)3450式中：A番茄红素对照品溶液在472nm附近的最大吸收波长处测得的吸光度值；D稀释因子(VB/VA)10000浓度换算因子；3450番茄红素的吸光系数。A.3.4.4标准曲线的制备分别吸取适量番茄红素对照品溶液，用二氯甲烷稀释，并用棕色容量瓶定容，配制成浓度分别为1.0g/mL、5.0g/mL、10.0g/mL、20.0g/mL、30.0g/mL、40.0g/mL、50.0 g/mL系列的番茄红素标准溶液。在A.3.3参考色谱条件下，对系列的番茄红素标准溶液进行色谱分析，得到峰面积值-番茄红素浓度的标准曲线图。A.3.4.5试样液的配制取适量试样置于玻璃容器中，于60水浴中30min融化。称取融化后的试样1.0g1.2g,精确至0.0001g,用少量二氯甲烷溶解后转移至100mL棕色容量瓶中，加入10mLBHT溶液，超声混匀，冷却至室温，用二氯甲烷定容。再取1mL置于50mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，混匀后用于高效液相色谱分析。
