1、GB1903.28-2018附录A硒代蛋氨酸检验方法A.1安全提示本检验方法中使用的部分试剂具有毒性和腐蚀性，操作时须小心谨慎。如溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。使用易燃品时，严禁使用明火加热。A.2一般规定本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水。试验中所用标准溶液、杂质标准溶液、制剂和制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.3原理样品经酶解处理后，导入高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪(HPLC-ICP/MS)中，利用离子
2、交换-高效液相色谱分离，电感耦合等离子体质谱检测，保留时间定性，外标法定量。A.4鉴别试验在硒代蛋氨酸(SeMet)含量试验的色谱操作条件下，试样溶液与硒代蛋氨酸(SeMet)标准溶液的色谱峰的保留时间相对差值不超过10%。硒代蛋氨酸(SeMet)标准溶液HPLC-ICP/MS参考色谱图见附录B。A.5硒代蛋氨酸含量的测定A.5.1试剂和材料A.5.1.1硒代氨酸(SeMet)标准。A.5.1.2蛋(Trypsin)。A.5.1.3 K(Proteinase K)。A.5.1.4蛋(Pronase)。A.5.1.5柠檬酸铵。A.5.1.6甲醇：色谱纯。A.5.1.7柠檬酸。A.5.1.8氨水。A.5.1.9硝酸。A.5.1.10三（羟甲基）氨基甲烷。A.5.1.11盐酸。A.5.1.12超滤离心管（截留分子量为3000u)。3
