1、禽流感猪瘟等疫病(ybng)免疫失败原因分析,江苏省淮安市动物疫病预防控制中心 副主任江苏联合(linh)职业技术学院淮安生物工程分院教授,蒋法成,研究员,第一页，共四十四页。,免疫是指机体(jt)的一种生理性保护功能。它包括机体(jt)对异物(病原生物性或非病原生物性的)的识别、排除或消灭等一系列过程。免疫分类：非特异性免疫是生物在种系发展过程中不断与病原微生物斗争中形成的，并可遗传给后代的一种免疫功能，它是与机体的组织结构和生理机能密切相关的。特异性免疫是机体在后天受内外环境因素的刺激而获得的免疫功能，它能识别再次接触的相同抗原，并作出相应的反应,第二页，共四十四页。,免疫应答的基本(jb
2、n)过程,1.抗原识别阶段：是抗原通过某一途径进入机体，并被免疫细胞识别、递呈和诱导细胞活化的开始时期，又称感应阶段。2.淋巴细胞活化阶段：是接受抗原刺激的淋巴细胞活化和增殖的时期，也称为致敏状态。3.抗原清除阶段：是免疫效应细胞和抗体发挥作用将抗原灭活并从体内(t ni)清除的时期，也称效应阶段。这时如果诱导免疫应答的抗原还没有消失，或者再次进入致敏的机体，效应细胞和抗体就会与抗原发生一系列反应。,第三页，共四十四页。,抗体的形成(xngchng)过程,4,第四页，共四十四页。,抗体(kngt)产生的规律,初次反应：当抗原第一次进入机体时，需经一定的潜伏期（1-2周）才能产生抗体，且抗体产生
3、的量也不多，在体内维持的时间也较短。再次反应：当相同抗原第二次进入机体后，开始时，原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，发生中和反应，可使体内部分抗体抵消。但是，在抗原的持续刺激下，抗体含量会迅速大量增加，最后可比初次反应产生多几倍到十几倍，并且(bngqi)在体内留存的时间亦较长。回忆反应：由抗原刺激机体产生的抗体，经过一定时间后会逐渐消失。此时若再次接触抗原，记忆B淋巴细胞可以快速激活产生抗体。,5,第五页，共四十四页。,获得(hud)免疫力的途径,主动免疫感染（比如返饲）接种疫苗被动免疫(bi dn min y)母源抗体直接接种抗体（免疫球蛋白，如血清制品、卵黄抗体、破伤风抗毒素）,6
4、,第六页，共四十四页。,疫苗方面的问题：疫苗本身质量差（抗原含量低）疫苗灭活不够，毒力仍然很强稀释液或佐剂使用不当不当的混合免疫疫苗储存温度(wnd)/方法不当，导致疫苗失效疫苗菌毒株选择不当，血清型不符运输保存不当疫苗过期失效等,为何会出现(chxin)免疫失敗?,第七页，共四十四页。,动物方面的问题：动物接种前已处在疾病感染潜伏期动物对疫苗产生无效抗体（血清型不符）动物存在免疫抑制的干扰母源抗体的干扰动物处于强应急状态(zhungti)下动物在产生抗体前已受强毒攻击,为何会出现免疫(miny)失败?,第八页，共四十四页。,操作方面(fngmin)的问题：接种剂量不当接种方式不当使用方法不当
5、(活苗)打飞针消毒不彻底选用针头不当不合理的免疫程序,为何会出现(chxin)免疫失敗?,第九页，共四十四页。,疫苗保存不当：造成疫苗效价下降，免疫原性变差 疫苗正确保存温度：灭活油苗：2-8，国产弱毒冻干苗-15 以下，保存期可达1-2年。如弱毒冻干苗长时间在室温下放置，特别是在炎热夏季(xij)，很快会失效。实践证明，猪瘟兔化弱毒冻干苗，在0-8只能保存3个月，若放在25环境，至多1周即失去效力。同时灭活油苗反复冻融其免疫力大为降低。,免疫(miny)失败原因,第十页，共四十四页。,运输不当：运输时未进行充分冷藏，特别是在高温天气，往往使疫苗很快失效。疫苗稀释液选择不当：多数疫苗稀释时可用
6、生理盐水或蒸馏水，个别疫苗需用专用稀释液。若需用专用稀释液的疫苗用生理盐水或蒸馏水稀释，则疫苗的效价就会降低(jingd)，甚至完全失效。,第十一页，共四十四页。,使用分层的油剂疫苗或者未充分摇匀稀释后的活疫苗在使用时未进行冷藏和在规定时间内用完：常温下疫苗稀释后最好在90分钟内用完。根据试验，疫苗稀释后使用的时间与免疫力产生的保护率存在负相关性，已知多数活疫苗稀释的时间超过3小时(xiosh)再接种，对机体的保护率几乎为零。,第十二页，共四十四页。,疫苗灭活不够：有的疫苗毒株人工(rngng)减毒不够，若免疫时疫苗毒力太强，不但起不到免疫保护作用，而且接种后还会引起发病，导致免疫失败。,第十
7、三页，共四十四页。,选用(xunyng)针头不当：如注射小猪群使用孔径大的针头，药液溢出；注射大、中猪群使用的针头过短，低于脂肪厚度，疫苗不能直接进入肌肉层，停留在皮下脂肪内，不能发挥抗原的效力。,第十四页，共四十四页。,注射消毒不当(b dn)：如注射部位涂擦酒精、碘酊过多，或使用5%以上的碘酊消毒皮肤，这对活疫苗有破坏作用；包裹注射针头外的酒精棉花湿度过大，酒精渗进针孔破坏活疫苗活力。使用其它化学消毒剂处理过的注射器或针头如果有残留的消毒剂也会使弱毒苗灭活。,第十五页，共四十四页。,血清型不符：有些病原含有多个(du)血清型，如禽流感、猪大肠杆菌病、链球菌等，其病原的血清型多，给防疫造成一
8、定的困难，因此，选择相应的疫苗毒株是取得理想免疫效果的关键。在血清型多又不了解为何种血清型的情况下，应选用多价苗。,第十六页，共四十四页。,母源抗体(kngt)的影响：由于各种疫苗在种畜禽中的广泛使用，可能使种畜禽的母源抗体水平提高，若接种过早，当疫苗病毒注入幼畜体内时，会被母源抗体中和，从而影响疫苗免疫力的产生。,第十七页，共四十四页。,免疫剂量不准：免疫剂量原则上必须按照说明书剂量为准，量不足不能激发肌体的免疫反应，量太多会产生免疫麻痹(mb)而使免疫力受到抑制。疫苗稀释方法不当：从零下十几度的冰箱中取出的冻干苗应与稀释液一同在冰袋上放置一段时间，尽可能缩小与稀释液的温差，以免由于温度骤升
9、使疫苗中致弱的微生物死亡，从而降低免疫效力。,第十八页，共四十四页。,疫苗使用方法不当：灭活疫苗内可能含有能灭活其它弱毒苗的防腐剂，因此在同时混合使用灭活和弱毒疫苗，有可能导致弱毒苗失效。用活菌疫苗免疫的同时使用抗生素类药物会影响免疫力的产生：表现为用疫苗的同时对饮水消毒；饲料中添加抗生素类药物；紧急免疫的同时用抗生素药物进行防治。盲目同时注射多种疫苗：主要表现为两种疫苗混合注射或经不同途径(tjng)同时接种几种不同的疫苗或间隔时间太短。,第十九页，共四十四页。,早期感染：接种时畜群体内已潜伏强毒病原微生物感染，或由于接种人员及接种用具消毒不严带入强毒病原微生物。应激因素的影响(yngxin
10、g)：如饥饿、寒冷、过热、拥挤、捕捉、混群、断奶、运输、噪音、保定、通风不良等强应激因素的刺激，会导致畜禽血浆皮质醇浓度显著升高，抑制机体的体液免疫和细胞免疫，从而抑制猪群的免疫功能。,第二十页，共四十四页。,动物免疫抑制性原因：病原性免疫抑制：禽流感，马立克，法氏囊炎，鸡传染性贫血，呼肠孤病毒，禽白血病等；猪肺炎霉形体，伪狂犬病病毒，猪瘟病毒，猪流行性感冒，蓝耳病毒，圆环病毒等；营养性因素(yn s)：维生素E及硒不足或维生素A缺乏会导致淋巴器官的萎缩。有毒物质：如黄曲霉毒素、赭（zh）曲霉毒素、重金属等。药物使用：如地米、利巴韦林等,第二十一页，共四十四页。,赭曲霉毒素是由多种生长在粮食（
11、小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生(hu shn)、蔬菜（豆类）等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。还在动物试验中观察到它的致畸作用,第二十二页，共四十四页。,肾上腺皮质激素类药物：常用的有地塞米松等。它们对免疫反应(fnyng)的许多环节均有影响。主要是抑制巨噬细胞对抗原的吞噬和处理；也阻碍淋巴细胞DNA合成和有丝分裂，破坏淋巴细胞，使外周淋巴细胞数明显减少，并损伤浆细胞，从而抑制细胞免疫反应和体液免疫反应。利巴韦林
12、：反复使用会影响禽流感、新城疫抗体的产生,第二十三页，共四十四页。,病毒苗对的活菌苗影响：将病毒苗与活菌苗混合使用时，由于病毒苗中加有抗生素可杀死活菌苗，从而导致活菌苗免疫(miny)失败。,第二十四页，共四十四页。,病原微生物之间的干扰作用：同时免疫两种或多种疫苗往往会产生干扰现象，干扰的原因可能有两个(lin)方面，一是两种病毒感染的受体相似或相同，会产生竞争性抑制作用。二是一种病毒感染后产生干扰素，会影响另一种病毒的复制。,第二十五页，共四十四页。,禽呼肠孤病毒感染是鸡的一种传染性疾病，可引起鸡多种疾病，包括病毒性关节炎、矮小(ixio)综合征、呼吸道疾病、肠道疾病和所谓吸收不良综合征。
13、,第二十六页，共四十四页。,品种(pnzhng)差异：从进化上看，水禽免疫系统的进化水平较高。调查资料表明，注射相同疫苗后，鹅、鸭免疫效果较鸡群好；不同鸡群品种也有差异，蛋鸡免疫效果最好、地方肉鸡次之、白羽肉鸡最差,第二十七页，共四十四页。,不合理的免疫程序，必然发生免疫失败：如给怀孕母猪接种弱毒疫苗，部分疫苗有可能造成胎盘感染（弱毒苗有可能进入猪胎儿体内，胎儿的免疫系统未成熟，导致(dozh)胎儿免疫耐受或带毒感染），哺乳仔猪过早的注射疫苗也会由于母源抗体的干扰而减低效果。,第二十八页，共四十四页。,有些蛋鸡场、种鸡场制定的免疫程序，在蛋鸡开产后就不进行任何免疫接种了，这是非常危险的。大多数
14、疫苗厂生产的禽流感疫苗，免疫保护期都在35个月以内。据报道，目前许多蛋鸡群在300400日龄发生以肿头和产蛋下降、下软皮蛋为主要特征的疾病，主要是由于抗体下降到保护水平以下造成的低致病性禽流感(H9)所致的，与新城疫病毒混合(hnh)感染时造成的损失更大。,第二十九页，共四十四页。,疫苗质量不高或接种剂量不够 疫苗质量问题 由于H5抗原生产时受到病毒本身的性质限制，抗原含量通常不高，因此接种高致病性禽流感疫苗后，抗体水平往往达不到保护水平或保护期太短（山东省农业科学院家禽研究所SPF鸡研究中心,金维江，王建清，张世栋，等.商品肉鸡抗体消长规律及免疫程序的探讨J.山东农业科学，2004，6:51
15、-52；新疆畜牧厅兽医局，新疆兽医研究所，刘英豪，陆桂丽，沙依兰古丽，等.商品代从肉鸡接种禽流感疫苗的免疫效力观察J.中国(zhn u)兽药杂志，2008，42(6):8-11）,第三十页，共四十四页。,注射剂量不够 研究(ynji)表明，皮下注射0.3-0.4ml/只没有注射0.5 ml/只效果好；注射部位 背部皮下注射不如颈部皮下注射效果好,第三十一页，共四十四页。,免疫空白期与抗体水平不均一 目前常用的免疫程序，在雏鸡母源抗体下降到保护水平以下和疫苗(ymio)诱导的抗体达到保护水平之间，有1-2周的免疫空白期，此期间如果环境中有流感病毒，则会感染。目前肉仔鸡常见的20日龄左右出现的支气
16、管栓塞即属于此类感染。疫苗免疫注射如果不仔细，鸡群中可能出现漏免的鸡只，或者注射的疫苗剂量不足，也可能导致少数鸡只免疫失败,第三十二页，共四十四页。,母源抗体干扰 禽流感疫苗与抗体结合，加速吞噬消化过程，缩短免疫期，延缓免疫产生，一般建议母源抗体下降到5个滴度(Hl5log2)左右实施(shsh)免疫效果好。,第三十三页，共四十四页。,针对禽流感免疫失败有人建议采取以下措施：1有专家建议开发H9禽流感活疫苗和自家疫苗 从政府层面上，应该进行H9禽流感弱毒疫苗的开发。免疫弱毒疫苗进行基础免疫和黏膜免疫，是目前禽流感疫苗免疫效果不佳的最主要原因。鉴于目前H9禽流感已在全国大面积流行，不应该再顾忌流感疫苗基因扩散的问题(wnt)了，应及早研制安全有效的温和型禽流感弱毒疫苗。,第三十四页，共四十四页。,各生物制品研究(ynji)、生产厂家也应该更多的开展H9禽流感地方株灭活苗的开发，用于局部地区的鸡群免疫,第三十五页，共四十四页。,2增加禽流感灭活疫苗的接种量与接种次数 在一定范围(fnwi)内，疫苗接种效果与接种剂量成正比。实践证明，接种0.5ml/只比接种0.3-0.4ml/只效果好；接种
