1、LY/T1926-20204.3主要仪器和设备4.3.1恒温培养箱:温度能保持在37士2。4.3.2冷藏箱:温度能保持在05。4.3.3超净工作台:洁净等级不低于100级。4.3.4生物光学显微镜:200400。4.3.5压力蒸汽灭菌器:能保持121的温度和103kPa的压力。4.3.6电热干燥箱:温度能保持在160180。4.3.7接种环:直径不大于4mm。4.4覆盖膜聚乙烯薄膜,尺寸为40mm40mm0.05mm,用75%乙醇溶液浸泡1min,再用无菌水或洗脱液冲洗,自然干燥后备用,4.5培养基4.5.1液体LB培养基酵母提取物5.0g胰蛋白胨10.0g:氯化钠5.0g。制法:取上述成分一
2、次加入1000mL蒸馏水中,加热溶解后,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中121灭菌30min,4.5.2固体LB培养基1000mL液体LB培养基中加入15g琼脂,加热熔化,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中121灭菌30min,4.6试剂4.6.1消毒液75%乙醇消毒液。4.6.2洗脱液含0.85%氯化钠的生理盐水,用0.1mol/L氢氧化钠溶液或0.1mo/L的盐酸溶液调节pH至7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中121灭菌30min,4.6.3培养液液体LB培养基/生理盐水溶液,用于大肠杆菌接种液的浓度为1/500(体积比),金黄色葡萄球菌接种液的浓度为1/100(体积比)。为便于细菌分散可加人0.2%的无菌表面活性剂(如吐温80)。用0.1mol/1氢氧化钠溶液或0.1mol/L的盐酸溶液调节pH,使其在(25士1)时为7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中121灭菌30min。4.7检测菌种检测菌种应符合表1的规定,