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全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法 羟胺三氯化铁法 WST 66-1996.pdf

上传人:sc****y 文档编号:2545454 上传时间:2023-07-11 格式:PDF 页数:5 大小:817.33KB
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资源描述

1、ws/T66-1996释10倍,此溶液1mL相当于7mol乙酰胆碱,为应用液。5采样、运输和保存5.1用血色素吸管,取耳垂血20L,注入比色管中(事先加入0.98mL隙酸盐缓冲液),立即进行测定。5.2如不能立即测定,可静脉取血0.5mL,注入玻璃管中(含肝素或草酸钾抗凝剂),混匀,于保温瓶中加冰运送,置于4冰箱中可保存一周。6分析步骤样品测定按下表进行。全血胆碱酯酶测定操作步骤样品管对照管标准管空白管磷酸盐缓冲液,mL0.980.981.01.0混匀全血(草酸钾抗凝),mL0.020.02置37C水浴中预热5min乙酰胆碱应用液(4.7),mL1.01.0一水,mL1,01.0置37水溶中反

2、应30min,准时取出,各管加入4.0mL碱性羟胺溶液(4.4),充分振摇2min,继续加入2.0mL盐酸溶液(4,3),充分振摇2mi,再如入2.0mL三氯化铁溶液(4.4),充分振摇,用滤纸过滤后,以试剂空白为参比在波长520m处测吸光度。然后按7,1计算胆或酯醇活性。如同时分析大批样品,可采用标准曲线法按7.2求出胆碱酯酶活性绝对值。7计算7.1公式计算法7.1.1按式(1)计算酶活性的绝对值。x,=C+B-474444444(1)式中:X,一水解乙酰胆碱的浓度,mol(0.02mL3730min):A一以试剂空白为参比的在波长520nm处样品管的吸光度值;B一以试剂空白为参比的在波长520m处对照管的吸光度值:C一以试剂空白为参比的在波长520nm处标准管的吸光度值。7.1.2按式(2)计算酶活性的相对值。y=1004*t4444(2)式中:Y一酶活性的相对值,%:X.被测血样中酶活性的绝对值,mol(0.02mL3730min):X。一正常人血中酶活性绝对值,4mol(0.02mL3730min),7.2标准曲线法7.2.1被水解乙酰胆碱的吸光度=C一(A一B)。2

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