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牛海绵状脑病诊断技术 NYT 558-2002.pdf

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资源描述

1、NY/T558-2002f)100%酒精I中2h.3.3.1.5放人下列香柏油和二甲苯中透明:a)香柏油中12h:b)二甲苯I中1h:c)二甲苯1中1h。3.3.1.6按下述方法浸蜡:a)软蜡中40min;b)硬蜡中2h。3.3.1.7将浸好蜡的组织块放人包埋框中用硬蜡包埋,冷却过夜。3.3.1.8将石蜡块切成5m厚的切片,用干净的载玻片贴片。3.3.2苏木素伊红H-E染色3.3.2.1试剂配制:见附录B。3.3.2.2操作步骤如下:a)二甲苯1中10min:b)二甲苯I中10min;c)100%酒精I中2min:d)100%酒精1中2min:e)95%酒精I中2min:f)95%酒精I中2m

2、in;g)85%酒精中2min:h)75%酒精中2min;i)自来水洗2min:j)哈里斯酸性苏木精12min:k)自来水漂洗2min;1)酸性酒精10min;m)自来水漂洗5min:n)饱和碳酸锂蓝染30min;o)自来水漂洗10min,p)75%酒精中2min:q)85%酒精中2min;r)95%酒精伊红液中复染1min;s)95%酒精中2min;t)100%酒精中2min;u)100%酒精中2min:v)二甲苯I中2min;w)二甲苯I中2min。3.3.3封片用中性树胶封片。3.3.4结果观寨在光学显微镜下(1010,1040)观察切片,若被检样品脑干灰质区特别是脑闩部位的孤束核、迷走神经背核、三叉神经脊束核等处的神经元核周质或神经纤维网胞浆中出现双侧对称性海绵状空泡病变,且空泡呈规则的圆形或椭圆形,周边整齐,则可判定为BSE感染。在正常情况下,动眼神经核和红核处的核周质也可能有少量空泡出现,但不呈双侧对称,应注意区别。

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