1、GB/T36836-2018斑翅康瘿蚊检疫鉴定方法1范围本标准规定了斑翅康瘿蚊的检疫鉴定方法。本标准适用于斑翅康瘿蚊的检疫鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1鞭小节flagellomere由基部膨大的结部(node)和端部细长的颈部(neck)组成的结构。注:雄虫结部的中部会有各种程度狭缩,形成单结状(uninodal)或二结状(binodes),其二结状分别称为基结(basalnode)和端结(distal node),两结间分化出结间颈(internode)。雕虫结部通常为圆筒形,有些种类亦有缢缩,但不形成结间颈。2.2环丝circumfila成虫触角鞭小节结部上横向环绕并
2、有纵向相连的带状或环状结构,其两端均着生于结部,无游离端。注:环丝为瘿蚊科特有结构。雄虫通常比雌虫环丝发达。2.3尾须cerci位于瘿蚊成虫生殖节的背面,实为第10腹节的背板。注:尾须通常宽短,端缘常具刚毛和感觉毛。其端半部融合或分瓣,若融合则常有特化;若分瓣则常呈圆形、三角形或近矩形等形状。2.4肛下板hypoproct位于尾须之下,为第10腹节的腹板。注:肛下板通常较尾须窄,长于或短于尾须,端半部简单、分2瓣或具其他饰变,有些种类其基部两侧具一对基,腹面端外缘常具刚毛。2.5生殖突基节gonocoxite瘿蚊雄虫生殖节的主体部分,具长刚毛和短毛。2.6生殖刺突gonostylus位于生殖突
3、基节的端部,通常细长、弯曲,短于或长于生殖突基节,端部具骨化齿或骨化圆突。3斑翅康瘿蚊基本信息中文名:斑翅康瘿蚊GB/T36836-2018学名:Contarinia maculipennis Felt,1933中文别名:翅康瘿蚊、石斛瘿蚋(台湾)英文名:Orchid blossom midge,.Blossom midge,Hibiscus bud midge分类地位:双翅目Diptera,瘿蚊科Cecidomyiidae,瘿蚊亚科Cecidomyiinae,瘿蚊族Cecidomyiini,康瘿蚊属Contarinia Rondani。.传播途径:该虫飞行能力不强,存活时间较短,主要以幼虫和
4、卵藏匿于花蕾随寄主切花或盆花及包装物以及蛹随寄主所带土壤或栽培介质进行远距离传播。斑翅康瘿蚊其他信息参见附录A。4方法原理根据斑翅康瘿蚊为害状,在检疫现场肉眼观察寄主植物,取得幼虫和蛹需饲养至成虫,解剖雌雄成虫并制成玻片标本,在显微镜下观察,根据形态特征对种类进行判定。或将虫体通过DNA条形码检测,根据COI基因的序列特征对斑翅康瘿蚊进行种类的辅助判定。5器材和试剂5.1器材显微镜、体视解剖镜、干燥箱、冰箱、解剖针、眼科镊、0号毛笔、解剖穴盘、表面皿、烧杯、载玻片、盖玻片、吸管、医用纱布、橡皮筋、养虫瓶(500mL锥形瓶,瓶口直径4cm)、生物培养箱、细沙、标签、封口袋、100目纱网、剪刀。5
5、.2试剂75%乙醇溶液、95%乙醇溶液、无水乙醇、10%氢氧化钠溶液、二甲苯、苯酚、冰乙酸、香柏油、中性树胶。6现场检疫与饲养6.1现场检疫在检疫现场观察寄主植物花蕾和花有无畸形、变色或水渍状受害处(参见附录B),如有则剖开花蕾仔细检查其中是否有蛆状幼虫;检查花蕾外部、包装物内有无黄色、善弹跳的幼虫;如发现幼虫,连同寄主植物受害花蕾一起装入密封袋;零散的幼虫可以用0号毛笔蘸取装人袋中。塑料袋加标签和编号,记录时间、地点、寄主、采集人等,带回实验室。6.2饲养现场检查发现的幼虫需要进一步饲养至成虫再进行鉴定。在养虫瓶中盛入一层5mm厚的湿润细沙,沙子湿度以手捏成团不散、不流水为宜。将带有幼虫的寄
6、主花蕾及零散幼虫移入养虫瓶中。用纱网(100目)套住瓶口,橡皮筋扎紧密封。将养虫瓶置于温度25、相对湿度70%的生物培养箱内饲养。成虫约从第14天开始出现,羽化期持续一周。2GB/T36836-20187标本的准备及制作7.1标本准备饲养的瘿蚊进入羽化期后,应在每天次日的清晨及时收集成虫标本。用自制纱网兜(100目)套住养虫瓶口,从手指轻弹瓶壁,驱赶瘿蚊飞入纱网兜内,扎口后放入一20冰箱冻死后,用蘸取75%乙醇溶液的0号毛笔将成虫移入75%乙醇溶液保存以备制片。7,2成虫玻片标本制作斑翅康瘿蚊雌雄成虫玻片标本制作方法参见附录C。8实验室鉴定8.1形态鉴定8.1.1瘿蚊科鉴定特征成虫体小至中型,
7、细弱。触角长,念珠状,10节一36节,雄虫触角节上具环状毛:复眼发达或小,常左右愈合成1个,无单眼:喙短或长于胸部,下颚须1节一4节。翅宽,被微刺毛,透明或具点纹,翅脉仅3支5支,Rs脉不分支,横脉不明显,只有1个基室;足基节短,胫节无距,前跗节具中垫和爪垫。腹部8节,假产卵管收缩或外露。幼虫纺锤形或后端较钝,共13节,全头型或头部完全退化,白、黄、橙或红色。头稍骨化;触角2或3节;单眼和口器退化,上颚针状。老熟幼虫中胸腹板上常有角质的Y形剑骨片,具齿或呈2叶状,是弹跳的器官,一些种无剑骨片。气门小,9对或10对,位于前胸、腹部1节8节或臀节上。8.1.2康瘿蚊属鉴定特征体黄色或浅白色。无单眼
8、。复眼顶部连续。下颚须3节4节。雌雄触角分别具12个单结状、二结状的鞭小节;鞭小节均具2轮长刚毛,颈部明显。雄虫鞭小节基结与端结形状大小近乎相同,且均为卵圆状,各具1圈发达的大环状环丝;雌虫鞭小节结部具2圈欠发达的带状环丝,其间有相对的两条纵向环丝相连。具翅;R脉后1/3略向下弯曲,在翅端稍靠后处与C脉汇合;Cu脉分支。各足跗节爪不具齿。雄虫尾须分2瓣,分瓣间宽阔凹陷;肛下板分2瓣,瓣间宽阔深凹;生殖突基节相对生殖刺突较为粗壮,生殖刺突形状和向内弯曲程度在种间差异明显,具端齿;阳茎细长锥状,约与肛下板等长。雌虫产卵器可伸缩至极长,通常长于腹部其余部分的长度;尾须1节,分为2个相互靠近的细长锥状的瓣,其上具稀疏的长刚毛。8.1.3斑翅康瘿蚊鉴定特征8.1.3.1成虫8.1.3.1.1整体雌虫长约1.5mm2.1mm,雄虫比雌虫稍小。8.1.3.1.2头部复眼在头顶约有10个小眼面长,小眼面六边形,紧密排列。后头顶具短背突,长宽相等。唇瓣三角形,顶端尖,每片上有8根10根刚毛。下颚须4节。触角具12个鞭小节,末节具细长的顶突。雄