1、书 书 书犐 犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 出口动物源食品中卡麦角林残留量的测定液相色谱质谱质谱法犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犮 犪 犫 犲 狉 犵 狅 犾 犻 狀 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿犪 犾狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前言本标准依据 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并
2、归口。本标准起草单位：中华人民共和国石家庄海关。本标准主要起草人：马育松、李玮、刘蓓蕾、王敬、陈瑞春、郭春海、艾连峰、张海超。犛犖犜 出口动物源食品中卡麦角林残留量的测定液相色谱质谱质谱法范围本标准规定了出口动物源食品中卡麦角林液相色谱质谱质谱检测方法。本标准适用于鸡肉、猪肉、牛肉、牛脂肪、牛肝及牛奶等动物源食品中卡麦角林残留量的检测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法原理采用乙腈提取样品中的卡麦角林，用乙腈饱和的正己烷脱脂，中性
3、氧化铝柱净化，液相色谱质谱质谱仪测定，内标法定量。试剂和材料除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。乙腈：高效液相色谱级。正己烷：高效液相色谱级。甲醇：高效液相色谱级。甲酸：高效液相色谱级。无水硫酸钠。甲酸：准确量取 甲酸（）溶于水中。甲酸水乙腈溶液（，）：量取 甲酸水溶液（）和 乙腈，混匀。乙腈饱和的正己烷溶液：乙腈中加入 正己烷，充分振荡后，静置分层，取上层正己烷层备用。卡麦角林（，：，分子式：）：纯度大于 。卡麦角林：纯度大于 。标准储备溶液（）：精确称取卡麦角林标准品（精确至），用甲醇溶解并定容至 ，配制成 的标准储备液。此溶液在 避光保存，有效期个月。标准中间溶液（）
4、：准确移取标准储备液（）至 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制浓度为，以下避光保存，有效期为个月。标准工作液：根据需要用定容液将标准中间液逐级稀释成所需的标准工作溶液，标准工作溶液需现用现配。标准内标储备溶液（）：精确称取卡麦角林 标准品（精确至），用甲醇溶犛犖犜 解并定容至 ，配制成 的标准内标储备液。此溶液在 避光保存，有效期个月。标准内标工作液（）：准确移取标准内标中间溶液（）至 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制浓度为 ，避光保存，此溶液有效期一周。固相萃取柱：中性氧化铝柱（），。微孔滤膜：，有机相针式过滤器。仪器和设备 液相色谱质谱质谱仪：配电喷雾离子源（）。分析天平：感量分别为 和。均
5、质器，转速不小于 。离心机，转速不小于 。涡旋混合器。组织捣碎机。固相萃取装置。氮吹仪。样品制备与保存 鸡肉、猪肉、牛肉、牛脂肪、牛肝等动物组织取代表性样品约 ，用粉碎机捣碎并混合混匀，装入洁净的容器中，密封并标识，将试样置于 下保存。牛奶取代表性样品约 ，装入洁净的容器中，密封并标识，将试样置于 下保存。注：在取样、制样过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的变化。分析步骤 提取准确称取（精确至 ）试样于 离心管中，准确加入 内标工作液（），然后加入无水硫酸钠和 乙腈（），均质，离心 ，取上清液加入 乙腈饱和的正己烷（），涡旋振荡、离心，弃去上层溶液，下层溶液待净化。净化用乙腈（）活化中
6、性氧化铝柱（），当溶剂液面到达柱吸附表面时，立即移取提取液（）通过固相萃取柱，乙腈洗涤中性氧化铝柱，收集全部流出液，于 下用氮气吹干。用 甲酸水乙腈溶液（）溶解残渣，涡旋，过 有机相微孔滤膜后，供液相色谱质谱质谱测定。测定 液相色谱条件液相色谱条件如下：犛犖犜 ）色谱柱：，（），；或相当者；）柱温：；）进样量：；）流速：；）流动相：梯度洗脱程序见表。表流动相梯度洗脱程序时间 甲酸乙腈 质谱条件质谱条件如下：）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子扫描；）检测方式：多反应监测（）；）使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件参见附录。定量测定在仪器最佳工作条件下，对标准工作溶液和样液
7、进样。内标法定量，标准工作溶液和样液中分析物的响应值均应在仪器的检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积进样测定。在上述色谱条件下，卡麦角林标准溶液的多反应监测色谱图见附录。定性测定在相同的试验条件下，样品与标准工作液中待测物质的质量色谱峰相对保留时间在 以内，并且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子对均出现，同时与标准品的相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白实验除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。结果计算和表述用数据处理软件中的内标法，按照式（）计算样品中卡麦角林残留量：犛犖犜 犡
8、犚犮犞犚犿（）式中：犡 试样中卡麦角林的含量，单位为微克每千克（）；犚 样液中的分析物与内标物峰面积比值；犮 标准溶液中分析物的浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 试样溶液最终定容体积，单位为毫升（）；犚 标准溶液中的分析物与内标物峰面积比值；犿 试样的质量，单位为克（）；注：计算结果应扣除空白值。定量限、回收率 定量限：本方法对卡麦角林的定量限为 。回收率范围：部分回收率实验数据见表。表卡麦角林添加回收率（狀）食品名称添加浓度（）平均值（）回收率（）牛肉 猪肉 鸡肉 牛脂肪 牛肝脏 牛奶 犛犖犜 附录犃（资料性附录）质谱参考条件）电喷雾电压（）：；）锥孔电压（）：；）去溶剂气温度（）：；）去溶剂
9、气流速（）：；）锥孔反吹气流速（）：）雾化器压力（）：；）碰撞气：高纯氩气；）碰撞气流速（）：；）其他质谱参数见表。表犃 多反应监测条件分析物保留时间（）离子对（）碰撞能量（）卡麦角林 卡麦角林 定量离子（）。非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛犖犜 附录犅（资料性附录）标准品的色谱图卡麦角林卡麦角林图犅 卡麦角林标准品的液相色谱质谱质谱色谱图犛犖犜 犉狅 狉 犲狑狅 狉 犱犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲 犱犪 犮 犮 狅 狉 犱
10、 犻 狀 犵狋 狅犌犅犜 犘 犾 犲 犪 狊 犲狆 犪 狔犪 狋 狋 犲 狀 狋 犻 狅 狀狋 犺 犪 狋狊 狅犿犲犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 狊犻 狀狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿犪 狔狉 犲 犳 犲 狉狋 狅狆 犪 狋 犲 狀 狋 狊 犜犺 犲犻 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犻 狅 狀犱 狅 犲 狊 狀狋狋 犪 犽 犲狅 狀狋 犺 犲狉 犲 狊 狆 狅 狀 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狋 狅犻 狀 犱 犲 狀 狋 犻 犳 狔狋 犺 犲 狊 犲狆 犪 狋 犲 狀 狋 狊犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊狆 狉 狅狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀
11、犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳犌犲 狀 犲 狉 犪 犾犃犱犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犆狌 狊 狋 狅犿狊狅 犳狋 犺 犲犘犚 犆犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犛犺 犻 犼 犻 犪 狕 犺 狌 犪 狀 犵犆狌 狊 狋 狅犿狊狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆犺 犻 狀 犪犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊犿犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犕犪犢狌 狊 狅 狀 犵、犔 犻犠犲 犻、犔 犻 狌犅犲 犻 犾 犲 犻、犠犪 狀 犵犑 犻
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14、 犪犿狆 犾 犲 狊犖狅 狉犿犪 狋 犻 狏犲狉 犲 犳 犲 狉 犲狀犮 犲 狊犜犺 犲犳 狅 犾 犾 狅狑 犻 狀 犵犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋犻 狊狀 犲 犮 犲 狊 狊 犪 狉 狔犳 狅 狉狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉狅 狉犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狅 狀 犾 狔犱 犪 狋 犲 犱犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狊 犺 犪 犾 犾犪 狆 狆 犾 狔狋 狅狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉狅 狉狌 狀 犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狋 犺 犲犾 犪 狋 犲 狊 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀狅 犳狀
15、狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋（犻 狀 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵狊 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪犿犲 狀 犱犿犲 狀 狋 狊）狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱狋 狅犪 狆 狆 犾 犻 犲 狊犌犅犜 犠犪 狋 犲 狉犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔狌 狊 犲犛狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿犲 狋 犺 狅 犱 狊犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犜犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲狑犪 狊犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犲 犱狑 犻 狋 犺犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾
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