1、SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准s N/T 1 0 5 0-2 0 0 2进出口油脂中抗氧化剂的测定 液相色谱法M e t ho d f o r t h e d e t e r mi na t i o n o f a nt i o x i da nt si n o i l s a n d f a t s f o r i mp o r t a n d e x p o r t -L i q u i d c h r o ma t o g r a p h y2 0 0 2 一 0 1 门 6发布2 0 0 2 一 0 6 一 0 1实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总
2、局发 布s N/T 1 0 5 0-2 0 0 2前言 本标准是按照G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元:标准的起草与表述 规则 第I 部分:标准编写的基 本规定 的要求编写的。本标准测定方法的 制定参考了国内 外有 关的文 献，并经研究、改进和验证。本标准的附录 A为提示的附录。本标 准由 国家认证认可监督管理委员会提出 并归口。本标准负责起草单位:中华人民共和国湖北出人境检验检疫局。本标准主要起草人:胡小钟、余建新、林雁飞、吴涛、严志刚。本标准首次发布。中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口油脂 中抗氧化剂的测定 液相色谱法Me t h o d f o r t
3、 h e d e t e r mi n a t i o n o f a n t i o x i d a n t s i n o i l s a n d f a t s f o r i mp o r t a n d e x p o r t -L i q u i d c h r o ma t o g r a p h yS N/T 1 0 5 0-2 0 0 2范围 本标准规定了进出口油脂中9 种抗氧化剂的高效液相色谱测定方法。本标准适用于色拉油和人造黄油等油脂中 没食子酸 丙醋(P G),2,4,5 一 三经 基苯丁酮(T H B P)、叔丁基对苯二酚(T B H Q)、去甲二氢愈创木酸(ND G
4、 A)、叔丁基对经基茵香醚(B H A),2,6 一 二叔丁基一 4-经甲基苯酚G o n o x-1 0 0)、没食子酸辛酷(0 G),2,6 一 二叔丁基对甲基苯酚(B H T)、没食子酸十二醋(D G)等 9种抗氧化剂的检测。2引用标 准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。S N/T 0 8 0 0.1-1 9 9 9 拼出 口粮油、饲料粉验楠样和制样卞洛抽样和制样方法采用 S N/T 0 8 0 0.1中规定的方法。测定方法4.1 方法提要 油脂样品用正己
5、烷溶解，用乙睛提取其中的抗氧化剂。提取液经浓缩后，用异丙醇定容，用带紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。4.2 试剂和材料4.2.1 正己烷:分析纯，重蒸。4.2-2 乙睛:色谱纯。4.2.3 异丙醇:分析纯，重蒸。4.2.4 甲醇:色谱纯。4.2.5 乙酸:分析纯。4.2.6 蒸馏水:经二次蒸馏。4.2.7 乙睛饱和的正己烷:正己烷中加人乙睛饱和。4.2.8 正己 烷饱和的乙睛:乙 睛中 加人正己 烷饱和。4.2.9 抗氧化剂标准贮备液(1 m g/m L):分别称取 9 种抗氧化剂各 5 0.0 m g，用异丙醇 一 甲醇中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2 0 0 2-0 1
6、 一 1 6 批准2 0 0 2 一 0 6 一 0 1 实施 1s N/T 1 0 5 0-2 0 0 2(1+1,v/v)溶解定容至5 0 mL，摇匀，0 C-4 C避光保存。4.2.1 0 抗氧化剂标准工作 液:临用前用异丙醇一 甲 醇(1+1,v/v)稀释至适当 浓度。4-3 仪器和设备4.3.1 液相色谱仪:配有紫外检测器。4.3.2 微量进样器:2 5 p L,4.3.3 液体混匀器。4.3.4 旋转真空蒸发器。4.3.5 具塞玻璃离心管:2 5 m L,4.3.6 胶头吸管。4.3.7 浓缩瓶:5 0 m L,4-3.8 滤膜:0.4 5 K m,44 测定步骤4.4.1 试样预
7、处理 称取油脂1 g(精确至。.0 1 g)于 离心管中，加人5 m L 乙睛饱和的正己 烷(4.2.7)，在液体混匀器上快速混匀以充分溶解油样，加人1 0 m L 正己 烷饱和的乙睛(4.2.8)，于液体混匀器上快速混匀1 m i n,静置分层，用胶头吸管将乙睛层转人浓缩瓶内。如上操作再用乙睛(4.2.8)提取两次，合并乙睛于浓缩瓶 内。乙腊提取液在 4 0 下，用旋转真空蒸发器浓缩至约 1 m L，将浓缩液转至5 m L刻度管中，用异丙醇定容至 2 mL，经。.4 5 y m滤膜过滤，供分析。4.4.2 测定4.4.2.1 色谱条件 a)色谱柱:C 1 8 柱 2 5 0 mm X 4.6
8、 m m(i.d.),1 0 K m或相当者;b)柱温:4 0 0C;c)流动相:1.5%(体积分数)乙酸一 甲醇溶液(A),1.5%(体积分数)乙酸一 水溶液(B);d)洗脱梯度:0 mi n-5 mi n，流动相 A为 3 0%,5 m i n-2 0 m i n，流动相 A从 3 0%线性增至 8 0 0 0,2 0 m i n-3 0 mi n，流动相 A为 8 0%;e)流速:1 m L/mi n;f)检测波长:2 8 0 n m4.4-2.2 工作曲线绘制 配制9种抗氧化剂的标准系列溶液 1,1 0,2 0,5 0,1 0 0,2 0 0 m g/1 _，分别取 2 0阿 进行液相
9、色谱测定，根据保留时间以 各色 谱峰的峰面积或峰高与其对应的抗氧化剂浓度作图，绘制标准工作曲 线。4.4-2.3 试样测定 用微量进 样器取2 0 I L样液进行液相色谱测定，记录各色谱峰的保留 时间、峰 面积或峰高。4.4.3 结果计算和表述 c，x v X;=几 匕 二 二-三 (1)式中:X;被 测抗氧化剂含量,m g/k g;c;从工作曲线上查出的抗氧化剂的质量浓度，mg/L;v一一被测试样定容体积，m l;7 n;称样量，9。测定低限和 回收率5.1 测定低限 2S N/T 4 0 5 0-2 0 0 2本方法各种抗氧化剂的 测定低限为2 m g/k g,回收率添加2 m g/k g
10、-2 0 0 m g/k g 抗氧化剂时，回收 率的 实验室 数据为8 2.5 0 o-9 8.7%0S N/T 1 0 5 0-2 0 0 2 附录A (提示的附录)标准品液相色谱图t.1 m in1 一没食子酸丙酷(P G)(5.1 3 9 mi n);2-2,4,5 一 三轻基苯丁酮(TH B P)(6.8 9 7 mi n);3 一叔丁基对苯二酚(TB HQ)(7.5 5 5 min);4 一去甲二氢愈创木酸(N DG A(1 1.7 7 6 mi n);5-叔丁基对经基菌香醚(B HA)03.0 7 6 min);6-2,6 一 二叔丁基一 4-经甲基苯酚(lo n o x-1 0 0)(1 4.5 9 1 min);7-投食子酸辛醋(0G)(1 6.2 0 4 m i n);8-2,6二叔丁基对甲基苯酚(B H A)(1 8.8 5 9 mi n);9-没食子酸十二酷(DG)(2 2.5 0 7 min)图 A l 9 种抗氧化剂标准品液相色谱图
