1、SN中 华人民共和国进出口商品检验行业标准s N 0 7 0 0 一 1 9 9 7出口乳及乳制品中氢化可的松残留量检验方法Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f h y d r o c o r t i s o n er e s i d u e s i n m i l k a n d m i l k p r o d u c t s f o r e x p o r t1 9 9 7-1 2 一 0 1 发布1 9 9 8 一 0 4 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布S N 0 7 0 0 一 1 9 9 7前
2、言 本标准 是根据G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元:标准的 起草与表述规则 第1 部分:标准编写的 基本规定 及S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 出口 商品中 农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规 定 的要求进行编写的。其中测定方法是参考国内 外有关文献，经研究、改进和验证后而制定。本标准同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际 上对牛乳中氢化可的松残留 量的最高限量 和测定方法的 灵敏度而制定的。本标准的附录A为 提示的附录。本标准由中华人民共和国国家 进出口 商品检验局提出并归口。本标准由中华人民 共和国浙 江进出口 商品检验局负责
3、起草。本标准主 要起草人:商学彬、张军、沈力生。本标准系首次发布的行业标准。中 华人民共和国进出口商品检验行业标准出口乳及乳制品中氢化可的松残留量检验方法s x 0 7 0 0 一 1 9 9 7Me t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f h y d r o c o r t i s o n er e s i d u e s i n mi l k a n d mi l k p r o d u c t s f o r e x p o r t1 范围 本标准规定了出口 乳 及乳制品中氢化可的松残留 量检验的 抽样、制样和液相色谱测定方法。
4、本标准适用于出口 鲜牛乳中氢化可的松残留 量的检验。2 抽样和制样2.1 检验批 以不超过5 0 0 0 0 瓶为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2 抽样数量 批量，瓶最低抽样数，瓶 1 0 0 0 0以下2 1 0 0 0 0 -2 0 0 0 0 3 2 0 0 0 1 -3 0 0 0 0 4 3 0 0 0 1 -4 0 0 0 0 5 4 0 0 0 1 -5 0 0 0 0 62.3 抽样方法 按2.2 规定的 抽样瓶数随 机抽取原始样品，标明 标记，及时送交实验室。2.4 试样制备 将所取 原始样品充 分混匀，分出约2 5 0 m
5、 L，再均分成两份作为试样。分别装入洁净的容器内，密封，标明标记。2.5 试样保存 将试样于一5 以下避光保存。注:在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生氢化可的松含量的变化。3 测定方法3.1 方法提要 用二氯甲 烷提取试样中残留的氢化可的松，有机相经氢 氧化钠溶液洗涤净化，浓缩至 干，残渣溶于流动 相，所得溶 液用 正己 烷除脂肪 后，用配有紫外检测 器的液 相色谱仪测定，外标法定量。3.2 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为 分析纯，水为蒸 馏水。中 华人民共和国国家进出口 商品检验局1 9 9 7-1 2-0 1 批准1 9 9 8-0 4-0 1 实 施 1S x
6、0 7 0 0 一 1 9 9 73.2.1 甲醇:液相色谱级。3.2.2 二抓甲 烷:重燕馏，收集3 9-4 1 C 馏分。3.2.3 正己烷:重蒸馏。3.2.4 氢氧 化钠溶液:。.1 m o l/L水溶液。3.2.5 硅藻土 5 4 5,3.2.6 氢 化可的 松标准品:纯度9 9.。%。3.2.7 氢 化可的 松标准溶液:准确称取适量的氢化可的 松标准品，用流动相配成浓度为1 0 0 K g/m L的标准 贮备液，再根据需要用流动相稀 释成适当浓度的标准工作溶液。3.3 仪器和设备3.3.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。3.3.2 旋转蒸发器。3.3.3 离心机.3.3.4 旋涡混
7、匀器。3.3.5 空 气流浓缩装置。13.6 硅藻土柱:2 5 0 m m X 2 5 m m(内径)，具活塞玻璃柱。柱底部填少量脱脂棉，上装 5 g 硅藻土(3.2.5),3.3.7 分液漏斗:2 5 0 m L,3.3.8 离心管:具塞，5 m L,3.3.9 微量注射器:2 5 u L,3.4 测定步骤3.4.1 提取和净化 称取 试样 约1 0 g(精 确 至。1 g)于 烧 杯中，加 入 约l o g 硅 藻 土，搅 拌 均匀，放 置1 0 m in,将 混 匀 物 装入硅藻土柱中(3.3.6)，加入4 0 m l,二氯甲 烷，静置1 5 m i n 后，用分液漏斗滴8 0 m L
8、二氛甲烷于柱中，控 制滴入和流出 速度为2 -4 m L/m i n。收集全部流出 液于另一分液漏斗中，依次用3 0 m l,氢氧化钠溶液、3 0 m L水洗涤，分出有 机相。将有机相于3 5 水浴中 用旋转蒸发器浓缩至约2-3 m L。将浓缩液转入5 m l,具塞离心 管内，用2 X 1 m l,二氯甲 烷淋洗瓶壁，洗液 并入离心管内。以空气流浓 缩至干。准确加 人1 m L流动相(精确至0.0 2 m L)，在旋涡混匀器上混匀2 m i n。用3 X1 m L 正己 烷抽提三次，每次混匀1 m i n，以3 0 0 0 r/m i n 离心3 m i n，并用 尖嘴吸 管弃去正己 烷。余液
9、供液相色谱测定。3.4.2 测定3.4.2.1 液相色谱条件 a)色谱柱:O D S-C,，柱，1 2 5 mmX4.0 mm(内径)，粒径 5 k m;b)流动相:甲 醇一 水(4 5+5 5);c)流 速:1.0 m L/m i n;d)测定波长:2 4 5 n m;e)柱温:室温;f)进样量;2 0 K I。3.4.2.2 液相色谱测定 根据样液中 氢化可的松含量 情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氢化可的 松响应值均应在仪器检测线 性范围内。对标准工作溶液和 样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件 下，氢化可的 松的 保留时间约为7.6 m i n,氢化可的松标准
10、品色谱图见附录A中图A 1,3.4.3 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。35 结果的计算和表述s N 0 7 0 0 一1 9 9 7用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中氢化可的松残留含量:A GA,m，”“.“二。(1)式中:X 试样中氢化可的松的残留含量，m g/k g;A 样液中氢化可的松的色谱峰面积，m m ;A.-标准工作液中氢化可的松的色谱峰面积，m m ;标准工作溶液中氢化可的松的浓度tt g/m L;V 样液最终定容体积,mL;、最终样液所代表的 试样量,g.注:计算结果播扣除空白值.4 测定低限、回收率4.1 测定低限 本 方 法的 测 定 低 限 为。O l
11、 m g/k g.4.2 回收率 鲜牛乳中氢化可的松添加浓度及其回收率的实验数据:在0.0 1 m g/k g 时，回收 率为8 8.0%;在0.0 5 m g/k g 时，回收 率为8 3.8 0 o;在 0.1 0 m g/k g时，回收率为8 7.0%.S N 0 7 0 0 一1 9 9 7 附 录 A(提示的附录)标准品色谱图卑密甘牟城，.的-一 一-了-于 一 一-，一一 一一-一一-一-.一 丫 一 一4图A l 氢化可的松标准品 的液相色谱图S N 07 00 一 19 97Fo r e wo r d T h i s s t a n d a r d w a s d r a f
12、t e d i n a c c o r d a n c e w i t h t h e r e q u i r e m e n t s o f G B/T 1.1-1 9 9 3 D ir e c t i v e s f o rt h e w o r k o f s t a n d a r d i z a t i o n 一 U n i t 1:D r a f t i n g a n d p r e s e n t a t i o n o f s t a n d a r d s 一P a r t 1:G e n e r a l r u l e sf o r d r a f t i n g s
13、t a n d a r d s a n d S N/T 0 0 0 1 一1 9 9 5 G e n e r a l r u l e s f o r d r a f t i n g t h e s t a n d a r d m e t h o d s f o r t h ed e t e r min a t io n o f p e s t i c id e,v e t e r i n a r y d r u g r e s i d u e s a n d b i o t o x i n s i n c o mm o d i t i e s f o r e x p o r t .T h em
14、 e t h o d o f d e t e r m i n a t i o n o f t h is s t a n d a r d w a s d r a f t e d b y r e f e r r in g t o r e l e v a n t d o m e s t i c a n d f o r e ig n l i t-e r a t u r e s t h r o u g h r e s e a r c h,m o d if i c a t i o n a n d v e r i f ic a t i o n.I n a d d i t i o n,m e t h o d
15、s o f s a m p l i n g a n d s a m p l ep r e p a r a t i o n a r e a l s o s p e c i f i e d i n t h i s s t a n d a r d Th e l i mi t o f d e t e r mi n a t i o n i n t h i s s t a n d a r d i s d e f i n e d o n t h e b a s i s o f t h e c u r r e n t i n t e r n a t i o n a lma x imu m l i mi t f
16、 o r h y d r o c o r t i s o n e r e s i d u e s i n m i l k a n d t h e s e n s i t i v i t y o f t h e me t h o d.An n e x A o f t h i s s t a n d a r d i s a n in f o r ma t i v e a n n e x T h is s t a n d a r d w a s p r o p o s e d b y a n d is u n d e r t h e c h a r g e o f t h e S t a t e Ad mi n i s t r a t i o n o f I mp o r t a n dE x p o r t C o m mo d i t y I n s p e c t io n o f t h e P e o p l e s R e p u b l i c o f C h i n a T h i s s t a n d a r d w a s d r a f t e d b y Z h e
