1、SN/T1974-20075.9对甲苯磺酸溶液(1.0mol/L):称取17.2g一水对甲苯磺酸，并用水稀释至100mL。5.1030%甲醇溶液：量取30mL甲醇加人70mL水中混匀。5.11阳离子交换萃取小柱：WCX,60mg/3mL或相当者。5.12中性氧化铝萃取小柱：LC-alumina-N,500mg/3mL或相当者。5.13滤膜：0.45um,有机相.5.14亚甲基蓝(CAS号：7220-79-3，分子式：C16H1 CIN.S)标准品，纯度大于等于96%。5.15标准贮备液：准确称取适量的亚甲基蓝，用30%甲醇溶液(5.10)分别配制成1004g/mL的标准贮备液，再用该甲醇溶液(
2、5.10)稀释配制1.0g/mL的标准溶液，28避光保存。5.16标准工作溶液：用14g/mL的标准溶液，用30%甲醇溶液(5.10)分别稀释成200.0ng/mL,100.0ng/mL,50.0ng/mL,20.0ng/mL,10.0ng/mL五个浓度，现用现配.6仪器和设备6.1液相色谱-质谱/质谱联用仪，配有电喷雾(ESI)源。6.2离心机：4000r/min。6.3涡旋混合器。6.4无油真空泵。6.5旋转蒸发仪。6.6固相萃取装置。6.7高速均质器。6.8氮气吹干仪。7测定步骤7.1提取称取5g均匀样品（精确到0.1g)厅100L离心管中，加入5g中性氧化铝，再依次加入1.0mL对甲苯
3、磺酸(5.9)溶液、4.0mL无酸钠缓冲溶疫(5.8)，涡旋30s。加人8mL乙腈，10000r/min均质2min,离心5min(2000r/mirp,将上清液转移到50m离心管中，拥4.0mL乙腈重复提取残渣一次，合并上清液。于离心管中加人8m二甘醇溶液(5.7)，1专mL土氯甲烷，涡旋1min,离心5min(2000r/min),收集下层有机层于浓缩瓶中在40减压旋转蒸发至千。7.2净化将中性氧化铝柱串接在CX柱上方，用3m乙晴活化中性氧化铝小柱和WCX萃取小柱。用6mL乙腈分三次（每次2mL)涡旋振荡溶解上步提取液我留物，并依次过柱，控制WCX柱上样流速约为1.0mL/min,再用2mL乙腈淋选中性氧化铝柱后，弃去中性氧化铝柱。依次用3mL水、3mL乙腈淋洗WCX柱，弃去上述滤液。用4m甲酸甲醇溶液(：6)洗脱，洗脱流速约为1mL/min,收集洗脱液，在40氨气吹干，用1.0mL甲醇溶液(5.10)定容，充分振荡溶解残渣，用0.454m滤膜过滤，待测。7.3测定7.3.1色谱条件a)色谱柱：C1s柱1002.1mm(内径)，5m;b)柱温：25；c)进样量：25uL；d)梯度洗脱，洗脱程序参见附录A表A.1。7.3.2质谱条件a)离子源：电喷雾源(ESI),正离子；b)扫描方式：选择反应监测(SRM);
