1、西藏医药年第卷第期（总期）？基础医学胰高糖素样肽受激动剂对尿病大鼠认知功能的影响泽丁卓玛杨丽辉王紫薇张俊清刘林西藏自治区人民医院内分泌科西藏拉萨 北京大学第一医院内分秘科北京 摘要的胰高糖素样肽受体激动剂对糖展病大鼠认知功能的影响。方法选取周龄大鼠只，腹腔注射链脲左菌素（，）及高脂饮食喂养，构建糖尿病模型。随机分为组（对照组）只、组（腹腔注射及高脂饮食构建的糖屎病组）只、组（腹腔注射及高脂饮食构建的糖尿病皮下注射利拉鲁肽）只。采用水迷宫试验评价认知功能。采用检测大脑皮质组织中过氧化物酶体增殖物激活受体飞共激活因子（，）的表达。结杲水迷宫试验中糖尿病组首次穿越时间明显延长，穿越次数明显减少，组较
2、对照组首次穿越时间明显延长，穿越次数减少，干预组较糖尿病组穿越次数增多。糖尿病大鼠大脑皮质表达较对照减低，可以提高大脑皮质的表达。结洽及高脂（富含棉榈酸）饮食可成功造糖尿病模型。糖展病大鼠的认知功能较对照组减低，而可以改善糖尿病 导致的认知功能障碍。关键词胰高糖素样肽受体激动剂糖尿病认知功能障碍截止年，我国 已成为世界上排行第一的糖尿病大国，成年人患病人数约达亿，而未确诊病例所占比例约为。糖尿病能引起严重的并发症，糖尿病脑病在临床表现为严重的认知功能障碍、痴呆、精神性疾患，发病隐匿不易察觉、造成了较重的经济负、影响生活质量。因此，有必要深人研究其病理生理改变及发病机制 防治糖尿病脑病。既往研究
3、，传统的降糖药物二甲双胍、噻唑烷酮类等已经证实可以改善糖尿病患者的认知功能障碍而胰高血糖素样肽，作为葡萄糖依赖的降糖药物有明确神经保护作用，可能成为 防治的一种新策略。因此，本课题研究利拉鲁肽对于糖尿病大鼠认知功能的影响。材料和方法试验动物周龄雄性大鼠只购于北京维通利华实验动物技术有限公司。周适应性喂养后，随机分为正常对？尿病杂志，（）：血管超声检査指南中华超声影像学杂志，（）：汪会琴，胡 如英，武海滨，俞敏型糖尿病报告发病率研究进展浙江预防 医学，（）：，（）段志轲型糖尿病及其微血管并发症患者血清血管生成素样蛋白水平及影响因素分析福建医科大学，戴婧，郭立新国际糖尿病联盟老年型糖尿病管理指南解
4、读丨几中国医学前沿杂志（电子版），（）：通讯作者：刘林基金资助：西藏自治区自然科学基金组团式医学援藏项目计划，照组（）、糖尿病模型组（）、糖尿病治疗组（）方法试验试剂链脲霉素（）购自（美国）公司。利拉鲁肽购自丹麦诺和诺德有限公司。二步法试剂盒购自康为世纪公司购自公司。构建糖尿病模型及干预糖尿病模型组予以高糖高脂饲料（碳水化合物热量比，脂肪热量比）喂养周后，禁食小时，腹腔注射（溶于柠檬酸缓冲液中，），注射后改为普通饲料；正常对照组予普通大鼠词料喂养周后，禁食小时，腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。糖尿病模型建立成功指标为：注射后，禁食小时条件下，于个不同时间点检测大鼠？马骏，齐华林，许晨，丰伟，胡 小涛
5、，李素维持性血液透析患者炎症与颈动脉粥样硬化的关系？中 国动脉硬化杂志，（）：牛东升？男性与女性睹尿病患者动脉粥样硬化的危险因素分析系统医学）（）：）：张雅静，肖建中，孔祥双，李冬军，贺继全，李玉凤社区型糖尿病患者 颈动脉内 中膜增厚的相关因素分析中 国医刊，（）：刘海，董雯丽，徐永权，张艳琴型糖尿病患者颈动脉内中膜增厚的危险因素分析兰州大学学报（医学版本文责任编辑邓 长安编号？（）图试验过程中大鼠血糖。注：￥组组图试验过程中大 鼠体重。注：士组组组图周 大鼠血浆胰岛素水平。注：水迷宫试验结果定位航行试验期与对照组比较，组逃避潜伏期时间 明显延长。空间探索期与对照组相比组逃避潜伏期明显延长，穿
6、越平台次数明显减少，与组相比组穿越平台次数明显增多。聃组组图水迷官定位 航行第至 第天逃避 潜伏期折线图。注：图三组 大鼠在空间探索实验中代 表性的原始 游泳轨迹图，大圆形表示水迷宫，小圆形 表示逃生平台，小圆点代表游 泳起始位置；图为对照组大鼠水迷宫路线图；图为糖 尿病大鼠水迷西藏医药年第卷第期（总期）血糖、体重、胰岛素水平造模成功后，与组比较组、组血糖明显升高，干预周时组较糖尿病组明显减低，后期血糖差异逐渐缩小无明显差异。体重上与组比较，糖尿病组及干预组体重明显减低，从周开始组与组相比，体重明显减低。周杀检前测定空腹胰岛素水平与组相比糖组胰岛素水平明显减低。尾静脉血糖。模型建立成功后，糖尿
7、病模型组随机分为糖尿病组（，）、组（腹腔注射及高脂饮食构建的糖尿病皮下注射利拉鲁肽）只）共计治疗周。血糖、胰岛素检测采用放射免疫法检测胰岛素含量。相对定量法检测表达：大鼠大脑皮 质组织研磨后，采用试剂提取总，取总，逆转录合成。设计并合成引物，（。取逆转录产 物，上、下游引物各（，总反应体系如进行。反应条件为丈预变性，丈变性处，丈退火，延伸，反应个循环，最后￥延伸。采用相对趕法滞截。水迷宫 实验水迷宫实验由定位航行实验和空间搜索实验两部分组成。水迷宫 为直径的水池，深度，整个水迷宫装置被分为东南（）、西南（）、西北（）和东北（）四个象限，在一象限中央设置一平台，直径为，用于监测大鼠航行轨迹的视频
8、采集系统位于水池上方。整个试验过程中水温保持在，水箱周围的物体和观察员 的位置将作为参考，所有以上物体和观察员位置不能被移动。实验开始前一天，不放置平台，让大鼠进行适应性训练。适应训练结束后，开始持续天的定位航行实验，在象限设置一个平台，平台位于水面下约为。于每天固定时间将各组大鼠从目标象限的对侧象限（即象限）面朝池壁放下水。测试时间为，若大鼠能够登上平台并在平台上停留以上视为登岛成功，记录大鼠从人水到成功登岛所用的时间，此时长即逃避潜伏期（）；若大鼠在内仍未找到平台，则将大鼠置于平台上站立秒，逃避潜伏期记作，然后终止实验，每只大鼠每天测试次，并记录逃避潜伏期，每次实验后，用干燥毛巾把大瞧干，
9、防止低引碰激。连续天的定位航行实验结束后，第天开始进行空间搜索实验。水迷宫装置中的水下平台被拆除，大鼠同样在象限面朝壁被放下水，观察并记录大鼠在内在平台象限的轨迹及停留的时间，评估大鼠的空间丨己忆能力。统计学处理应用统计软件分析数据，正态分布计量资料以均数标准误（士）表本，非正态分布则以 中位数及四分位数间距表示。如数据服从正态分布且方差无显著性差异，则两组间 比较采用，多组 之间 比较 采用 单因素方差分析（）与多项比较检验；如方差存在显著差异，则使用 检验。即被认为有统计学差异。结果组组组二西藏医药年第卷第期（总期）组组口组图各组 大鼠在 可 视平台 中逃 避潜伏期的柱状图。注：￥组组组组
10、组图各组大鼠大脑皮 质表达量。注：￥讨论近年来较多研究显示糖尿病患者发生痴呆的风险较无糖尿病者增加约，而发生阿尔茨海默症的风险增加约；糖尿病中的神经细胞能量代谢障碍是诱发阿尔兹海默病的重要因素，同时胰岛素抵抗、慢性炎症反应、氧化应激升高等因素均会对中枢神经系统带来损伤，造成神经细胞的葡萄糖摄取、代谢及能量生成障碍。随着糖尿病病程的延长，糖尿病神经系统并发症检出率达以上，糖尿病脑病是最严重的并发症。早在年，就提出了糖尿病脑病的概念，糖尿病脑病病理上主要表现为大脑灰白质和海马体的萎缩、突触可塑性的受损、神经胶质细胞的功能障碍、脑血管结构和功能的改变；临床上表现为学习能力、记忆力、感知能力、判断力、
11、情绪控制能力的减退，并出现不同程度的行为异常。我们的研究采用及高脂饮食构建糖尿病大鼠模型，研究提示长期暴露在高糖环境中会引起脑部氧化应激的产生，造成脑部神经细胞的死亡，从而对患者的认知功能造成影响在该模型中我们观察到糖尿病图各组 大鼠在空间探索期 穿越平台位置次数，注：官路线图；图为干预组水迷宫路线图。组大鼠认知功能受损，糖尿病组大鼠呈现高血糖、低胰岛素水平的表现，提示高血糖和胰岛素的缺乏是造成糖尿病脑病的重要因素。而予干预后尽管血糖、胰岛素相较糖尿病组无明显改善，但认知功能改善。是一种内源性的肽类激素，利拉鲁肽实在内源性的基础上合成的受体激动 剂，同样具有促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗、抑制
12、食欲以及降低血糖的作用。受体在大脑皮层和海马区域均有表达，提示调节中枢神经系统中的重要作用。是核激素受体过氧化物酶体增殖物激活受体的转录共激活因子，在线粒体生物合成、神经元功能和能量平衡中发挥重要作用。我们的研究观察到相比对照组糖尿病组大脑皮质细胞表达明显减低，而干预后上调了的表达，先有研究提示激活，可增强线粒体生物发生和维持能量稳态，抑制淀粉样蛋白沉积，调节突触可塑性，进而改善阿尔茨海默病患者学习记忆的能力。因此，我们的研究提示受体激动剂可以通过直接影响脑内能量代谢而改善糖尿病大鼠认知功能障碍。但本研究未能深人探讨具体机制，尚需后续研究进步明确。【参考文献】，：，：；：，（）：，；，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（），：，：，（）：，：，；：本文责任编辑王聚乐圓讓组
