1、外周血 Bax、Caspase3 蛋白表达水平与急性有机磷农药中毒患者肝损伤的相关性分析沈玉兰，黄昌保，薛祥(皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)急诊内科，安徽芜湖241000)摘要:目的分析外周血 Bax、Caspase3 蛋白表达水平与急性有机磷农药中毒(Acute organophosphorus pesticide poison-ing，AOPP)患者肝损伤的相关性。方法取 2018 年 9 月至 2020 年 7 月期间于皖南医学院弋矶山医院急诊科收治的 AOPP 患者 145 例作为研究对象，并根据 职业性急性有机磷农药中毒诊断标准及处理原则 中制定的病情分级标准，将研究对象分为重
2、度组(n=56 例)、中度组(n=50 例)以及轻度组(n=39 例)。比较各组对象在入院时、入院第 1 天、3 天及 7 天时外周血Bax、Caspase3 蛋白表达及肝功能指标清蛋白(ALB)、总胆红素(TBL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)，采用 Pearson 分析外周血 Bax、Caspase3 蛋白表达水平与肝损伤的相关性。结果AOPP 患者外周血 Bax、Caspase3表达均为重度组中度组轻度组，于不同时间点数值比较差异均有统计学意义(P005)，且整体趋势均为先升高后下降。结论AOPP 患者外周血 Bax、Caspase3 表达与其中毒程度、中毒
3、时间和早期肝损伤密切相关，动态观察外周血 Bax、Caspase3表达水平有利于及时发现患者早期肝功能变化。关键词:急性有机磷农药中毒;Bax;Caspase3;细胞凋亡因子;肝损伤中图分类号:743文献标识码:A文章编号:10017550(2023)01005905基金项目:弋矶山医院引进人才专项科研基金(Y201906)作者简介:沈玉兰(1970)，女，学士，副主任护师，研究方向:急诊危重症治疗。通讯作者:薛祥，医师，研究方向:急危重症的治疗。Correlation analysis between the expression levels of Bax and Caspase3 in
4、peripheral blood and liver inju-ry in patients with acute organophosphorus pesticide poisoningSHEN Yulan et al(Department of Emergency Medicine，The First Affiliated Hospital of Wannan Medical College(Yijishan Hospital)，Wuhu 241000，Chi-na)Abstract:ObjectiveTo analyze the correlation between the expre
5、ssion levels of Bax and Caspase3 in peripheral blood andliver injury in patients with acute organophosphorus pesticide poisoning(AOPP)MethodsA total of 145 AOPP patients admitted tothe Department of Emergency Medicine of the first affiliate hospital of Wannan Medical College from September 2018 to J
6、uly 2020 wereselected as the research objects，and the disease classification standards formulated in the Diagnostic Criteria and Principles of Treat-ment of Occupational Acute Organophosphorus Pesticide PoisoningThe subjects were divided into severe group(n=56 cases)，moder-ate group(n=50 cases)and m
7、ild group(n=39 cases)The expressions of Bax and Caspase3 in peripheral blood，and the liver func-tion indexes albumin(ALB)，total bilirubin(TBL)，alanine aminotransferase(ALT)，Aspartate aminotransferase(AST)，total pro-tein(TP)of subjects in each group were compared at admission，day 1，day 3，and day 7 af
8、ter admissionPearson analysis was used toanalyze the correlation between the expression levels of Bax and Caspase3 in peripheral blood and liver injuryesultsThe expres-sion of Bax and Caspase3 in the peripheral blood of AOPP patients decreased successively in the severe，moderate，and mild groups，and
9、the differences in values at different time points were statistically significant(P005)，and the overall trend was increased firstand then decreasedConclusionThe expression of Bax and Caspase3 in the peripheral blood of AOPP patients is closely related tothe degree of poisoning，the time of poisoning
10、and the early liver injuryDynamic observation of the expression of Bax and Caspase3 inthe peripheral blood is helpful for timely detection of early liver function changes in patientsKey words:AOPP;Bax;Caspase3;apoptosis factor;liver injury急性有机磷农药中毒(AOPP)是临床常见的急危重症，发作迅速且病情凶险，既往重症中毒流行病学调查结果显示1，随着有机磷农药
11、的广泛使用，有机磷中毒事件发生率居高不下，且 AOPP 病死率已高达 1039%20%。研究证实23，有机磷农药主要在肝脏进行生物转化，代谢产物常会加重肝细952023 年 02 月牡丹江医学院学报Feb.2023第 44 卷第 1 期JournalofMuDanJiangMedicalUniversityVol.44No.12023DOI:10.13799/ki.mdjyxyxb.2023.01.038胞受损程度，以致器官功能损伤重。因此，早期明确患者组织损害程度则可为临床治疗及预后改善提供指导。细胞凋亡在保持机体自身稳态维持正常组织细胞生长和组织细胞更新过程中扮演着关键角色，既往一项基础研
12、究就显示4，酒精性肝损伤程度与肝细胞凋亡的发生发展密切相关。Bax 和 Caspase3 是介导细胞凋亡信号通路调控基因，激活后可参与与 DNA 修复、mNA 裂解及细胞骨架重建等细胞关键组分的降解过程，在细胞凋亡中起着不可替代的作用56。然而，现阶段临床尚未有公认能反映AOPP 患者早期肝损伤的灵敏指标，且关于细胞凋亡因子表达随病程进展变化及与肝损伤相关性报道甚少。为此，本研究通过探讨 Bax 和 Caspase3 因子在不同中毒程度 AOPP 患者不同时间点外周血中的表达，以期为临床预防和针对性治疗提供理论依据。1资料与方法11诊断标准有明确有机磷农药口服史，伴不同程度中毒症状及体征，如流
13、涎、肌肉颤动及瞳孔缩小等，表现为全血胆碱酯酶(ChE)活力明显下降，典型的毒蕈碱样(M)和烟碱样(N)中毒，且患者血液、洗胃液或大便中均可检出有机磷农药成分，肝功能损伤标准:肝功能指标的各项指标异常，如清蛋白(ALB)、总胆红素(TBL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)7。12纳入标准(1)均为口服单一种类农药，且服毒至就医时间均12 h;(2)入组前 1 个月内未曾有肝脏毒性药物使用史;(3)未合并原发性心脑血管疾病;13排除标准(1)合并恶性肿瘤或血液系统疾病者;(2)因接触及其他非口服中毒者;(3)临床资料不全，如中毒种类不明、临床数据缺失过多等;(4)合并原
14、发性肝肾功能不全、营养不良、恶性贫血、重度感染者。14一般资料选取于2018 年9 月至2020 年7 月期间皖南医学院弋矶山医院急诊科收治的 AOPP 患者 145 例作为研究对象，男 81 例，女 64 例;年龄 2264 岁，平均年龄为(3954647)岁;中毒至就诊时间 111 h，平均为(573204)h;农药类型:甲伴磷中毒 31 例，乐果中毒 50 例，敌敌畏中毒 38 例，对硫磷中毒 26 例。根据职业性急性有机磷农药中毒诊断标准及处理原则 中制定的病情分级标准，将研究对象分为重度中毒(伴 M、N 症状，且合并抽搐、昏迷及呼吸肌麻痹，ChE 低于 30%)56 例，记为重度组;
15、中度中毒(M 症状加重，且伴 N 症状，ChE 活性为30%50%)50 例，记为中度组;轻度中毒(以 M 症状为主，ChE 活性在 50%70%)39 例，记为轻度组。15方法所纳入研究对象入院后迅速组织抢救，并于入院时、入院第 1 天、3 天、7 天清晨 6:00 时空腹抽取外周静脉血 2 mL，置于干燥管中，放置于 37 水中 20 min，以 3 000 转/min 离心 10 min，收集血清，采用酶联免疫吸附法(粤深 GC1 200)测定血清中细胞凋亡相关指标(Bax、Caspase3)，同时采用购自于日立产机系统(中国)有限公司的 7600020型日立式全自动生化仪测定清蛋白(A
16、LB)、总胆红素(TBL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)等肝功能指标。16统计学方法采用 SPSS 190 进行统计分析，经 KS 检验服从正态分布的计量资料采取“均数标准差”的形式作统计描述，符合方差齐的两独立样本之间比较采取两独立样本 t 检验，多组间比较采用方差分析;对 AOPP 患者外周血 Bax、Caspase3表达与肝功能的相关关系检验采用 person 相关分析。P005 提示差异显著。2结果21各病情分级 AOPP 患者不同时间点外周血Bax、Caspase3 表达比较三组基线资料比较无显著差异(P 005)，可继续进行研究。详见表 1。AOPP 患者外周血 Bax、Caspase3 表达均为重度组中度组轻度组，于不同时间点数值比较差异均有统计学意义(P005)，且整体趋势均为先升高后下降。其中轻度组外周血 Bax、Caspase3 表达从入院到入院第 7 天变化不大，差异无统计学意义(F时间=2648、2348，P时间=0098、0112);中度组外周血Bax、Caspase3 表达在入院时即升高，并随病程发展而升高，第 3 天达到最大值
