1、广西农学报Journal of Guangxi Agriculture第 38 卷第 3 期Vol.38,No.3352023 年 6 月June,202320192022 年广西部分地区猪场主要病毒性疫病流行病学调查及分析张碧1 袁翠平1 胡帅1 梁昌良1 曾家家2 马宇毅1 植淇业3 贺会利1*(1.广西壮族自治区兽医研究所,广西兽医生物技术重点实验室,广西 南宁 530001;2.广西壮族自治区玉林市水产技术推广站,广西 玉林 537000;3.广西壮族自治区凭祥市凭祥镇乡村振兴服务中心,广西 凭祥 532600)摘要:为了解 20192022 年广西地区猪场主要病毒性传染病的流行特征,
2、应用 PCR 及 RT-PCR 方法对近四年临床上送检的疑似猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒 2 型(PCV-2)、猪圆环病毒 3 型(PCV-3)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(PoRV)感染的 1046 份病料进行病原检测,并开展流行病学分析。结果显示:CSFV、PRRSV、PCV-2、PCV-3、PRV、TGEV、PEDV 和 PoRV 的阳性率分别是 3.91%(21/537)、20.46%(143/699)、29.90%(116/388)、16.10%(81/503)、27.
3、75%(121/436)、2.10%(8/381)、28.50%(61/214)和 13.74%(18/131)。其中,PCV-2 和PEDV 的感染率呈逐年递减的趋势,TGEV 的感染率呈逐年上升的趋势。单一性感染中 PRV 和 PEDV 感染率较高,平均感染率为别为 13.53%,18.22%;双重感染中 PRRSV 和 PCV-2 的感染率最高,平均感染率达 11.34%。其次为 PEDV 和 PoRV 二重感染,平均感染率为 8.05%。PCV-3 和 PEDV 的感染率在春季较高,分别为 18.80%和40.00%。PRRSV、PCV-2、PRV、TGEV、PoRV 的感染率在冬季比
4、较高,分别为 24.40%、40.57%、37.30%、3.23%、19.44%。结果表明:对广西猪场危害较为严重的病毒性疫病为 PRRSV、PCV-2、PRV 和 PEDV,需要加强病原的监测和提高综合防控能力,以减少疾病的发生及经济损失。关键词:广西;病毒性疫病;流行病学;混合感染;季节中图分类号:S432.1 文献标识号:A 文章编号:1003-4374(2023)03-0035-07 Epidemiological Investigation and Analysis of Major Viral Diseases of Pig Farms in Guangxi from 2019 t
5、o 2022Zhang Bi1,Yuan Cui-ping1,Hu Shuai1,Liang Chang-liang1,Zeng Jia-jia2,Ma Yu-yi1,Zhi Qi-ye3,He Hui-li1*(1.Guangxi Veterinary Research Institute,Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Nanning,Guangxi 530001,China;2.Yulin Aquaculture Technology Extension Station,Yulin,Guangxi 537000,Chi
6、na;3.Pingxiang Town Rural Revitalization Service Center of Pingxiang City,Chongzuo,Guangxi 532600,China)Abstract:In order to understand the epidemic characteristics of major viral infectious diseases of pig farms in Guangxi from 2019 to 2022,this study applied the PCR and RT-PCR method to detect the
7、 pathogens of 1046 samples suspected CSFV(swine fever virus),PRRSV(porcine reproductive and respiratory syndrome virus),PCV-2(porcine circovirus virus type 2),PCV-3(porcine circovirus virus type 3),PRV(pseudorabies virus),TGEV(transmissible gastroeneritis of pigs virus),PEDV(porcine epidemic diarrhe
8、a virus)and PoRV(porcine rotavirus)infections in recent four years,and to carry out epidemiological analysis.The results showed that CSFV,PRRSV,PCV-2,PCV-3,PRV,TGEV,PEDV and PoRV positive rate was 3.91%(21/537),动物科学收稿日期:2023-06-09 修回日期:2023-06-12第一作者简介:张碧,女,1981 年生,助理兽医师,本科,主要从事动物疾病研究、防治及其他工作。*通讯作者:
9、贺会利,女,1987 年生,助理研究员,硕士,主要从事动物疫病防治与病原分子生物学研究工作。广西农学报362023 年20.46%(143/699),29.90%(116/388),16.10%(81/503),27.75%(121/436),2.10%(8/381),28.50%(61/214)and 13.74%(18/131)respectively.The infection rate of PCV-2 and PEDV was decreasing year by year,the infection rate of TGEV increasing year by year.The
10、higher infection rate of single infection were PRV and PEDV,with an average infection rate of 13.53%and 18.22%,The highest rate of mixed infection was PRRSV and PCV-2,with an average infection rate of 11.34%,The second rate of mixed infection was PEDV and PoRV,the average infection rate was 8.05%.Th
11、e infection rate of PCV-3 and PEDV was higher in spring,with18.80%and 40.00%respectively.The infection rate of PRRSV,PCV-2,PRV,TGEV and PoRV was higher in winter,with 24.40%,40.57%,37.30%,3.23%and 19.44%respectively.The results show that PRRSV,PCV-2,PRV and PEDV are the main viral diseases with seri
12、ous damage to pig farms in Guangxi.It is necessary to strengthen pathogen monitoring and improve comprehensive prevention and control ability,in order to reduce the incidence of disease and economic losses.Key words:Guangxi,viral diseases,molecular epidemiology,mixed infection,season广西地区的生猪出栏量和猪肉产量在
13、全国均占有重要的地位。非洲猪瘟疫情的出现对我国的养猪业造成了沉重打击,导致养殖企业损失巨大。在非洲猪瘟的影响下,2020 年广西地区的生猪产量为 174.05 万吨,同比负增长 9.40%。2020 年之后广西地区的生猪生产逐步回升,跨区域调运逐渐频繁,一些中小养猪企业和养殖户的生物安全意识相对薄弱,对疫病的有效防控能力不足,增加了广西地区生猪养殖疫病传播的风险。猪传染病的防控一直是重点研究问题。非洲猪瘟疫情的暴发,使猪病毒性疾病成为我国养猪业面临的主要问题1。目前临床上主要危害猪群健康的病毒为 CSFV、PRRSV、PCV-2、PCV-3、PRV、TGEV、PEDV 和 PoRV 等。这些病
14、毒性传染病具有感染范围广、发病率高、感染时间长、传播速度快、易复发、导致多重感染及隐性带毒等特点,严重威胁猪群自身健康、影响生产性能,同时造成机体免疫功能下降,导致继发感染,阻碍养猪业的健康发展2,3。为全面了解广西猪场的主要病毒性疫病流行情况,本文对 20192022 年广西地区猪场送检病料样品中的病毒性传染病的感染情况进行调查分析,为有效防控猪场该类疫病的发生与传播、制定切实可行的防控措施、降低养殖风险推动广西养猪业健康稳定发展提供数据参考。1 材料与方法1.1 试剂ViralDNA/RNAKit、HiFiScriptcDNASynthesisKit、2ESTaqMasterMix、DL2
15、000Marker,北京康为世纪生物科技有限公司产品。琼脂糖,西班牙GENE 公司产品。其他有关试剂由本实验室提供。1.2 仪器组织研磨均质仪,天根生化科技(北京)有限公司产品。小型台式离心机,德国 Eppendorf 公司产品。普通 PCR 仪,LifeTechnologies 公司产品。凝胶成像系统,美国伯乐公司产品。其他有关仪器由本实验室提供。1.3 病料来源20192022 年采集广西南宁、玉林、桂林、贵港、柳州、北海、钦州、贺州、崇左和来宾等地规模化猪场 1046 份病料,所有检测猪均接种了猪瘟兔化弱毒疫苗和伪狂犬病 gI/gE 双基因缺失疫苗,部分猪接种了 PRRSV 弱毒疫苗,所
16、有猪均未接种PCV-2 疫苗。病料包括肺、脾、肝、淋巴结、脑、肠内容物等,保存备用。阳性样品由本实验室保存。1.4 组织样品 RNA/DNA 提取无菌取适量病料样品,剪碎后收集于 2mL 的组织研磨管中,使用组织研磨均质仪,设置运行时间 190s,停顿时间 1120s,循环 5 次,研磨后将研磨管置于-40反复冻融 3 次,8000r/min 离心约5min 后,取上清液置于另一灭菌的 1.5mL 离心管中。参考病毒 DNA/RNA 提取试剂盒的说明书提取组织样品中的核酸,-20保存,作为模板备用。1.5 引物合成CSFV、PRRSV、PCV-2、PCV-3、TGEV、PEDV和PoRV检测方法按罗廷荣等4、蒋小红等5、连慧香等6、KUX.等7、陈焕春等8、田小艳等9方法进行检测(PCR 检测所用引物信息见表 1)。引物委托广州华大基因科技有限公司合成。37张碧等:20192022 年广西部分地区猪场主要病毒性疫病流行病学调查及分析第 3 期表 1 PCR 检测所用引物信息扩增基因引物序列(5 3)长度(bp)退火温度()CSFVF1:GCTCCTGGTTGGTAACCTCGGR1:T