1、第 卷第期年月西 安 交 通 大 学 学 报(医 学 版)J o u r n a l o fX ia nJ i a o t o ngU n i v e r s i ty(M e d i c a l S c i e n c e s)V o l N o S ep 本刊网址:h t t p:/y x x b x j t u e d u c n微信公众号:西安交通大学学报医学版基础研究收稿日期:修回日期:基金项目:国家自然科学基金项目(N o ),陕西省重点研发计划社发项目(N o S F 、N o Y B S F ),西安交通大学 年“国家级大学生创新训练项目”(N o )S u p p o r t
2、 e db yt h eN a t i o n a lN a t u r a lS c i e n c eF o u n d a t i o no fC h i n a(N o ),K e yR e s e a r c ha n dD e v e l o p m e n tP r o g r a mo fS h a a n x iP r o v i n c e,C h i n a(N o S F a n dN o Y B S F ),a n dN a t i o n a l I n n o v a t i v eT r a i n i n gP r o g r a mf o rC o l l
3、e g eS t u d e n t s i n i nX ia nJ i a o t o n gU n i v e r s i t y(N o )通信作者:程彦斌,教授.E m a i l:c h e n g y b x j t u e d u c n网络出版地址:h t t p s:/k n s c n k i n e t/k c m s/a r t i c l e/a b s t r a c t?v u o q I h G C S n f L s u R a d T y E V l p W U r h T D C d P D b j e n C B I A_r T r Hh n F u
4、B i s p B m t P K I o K g ONm F E c i K F W k G z&u n i p l a t f o r mN Z K P T()R H株弓形虫颅内定位注射建立急性弓形虫脑炎小鼠模型的研究司开卫,刘建新,吴锋,李小其,付子豪,巩锦华,王军阳,程彦斌(西安交通大学:基础医学院病原生物学与免疫学系;基础医学院神经生物学研究所;医学研究生实验中心;级宗濂实验班;级基础医学班,陕西西安 )摘要:目的观察RH株弓形虫定位感染小鼠海马引起的组织病变,以构建急性弓形虫脑炎小鼠模型.方法利用颅内定位注射技术,将定量(、个)RH株弓形虫滋养体,定位注射入小鼠海马C A 区,观察
5、小鼠的生存状况;G i e m s a染色方法观察小鼠腹水和脑组织匀浆中弓形虫数量的变化;尼氏染色和HE染色观察小鼠海马神经组织的病理改变;用免疫组化A B C法观察弓形虫在脑组织的分布.结果RH株弓形虫感染各组小鼠在感染第天表现出明显的弓背、竖毛、腹胀、头颅细微震颤、偏瘫等症状.定量 感染组小鼠生存时间较长,腹水中未发现弓形虫滋养体,脑组织匀浆在 h后发现少量的假包囊,小鼠死亡后则有较多滋养体;尼氏染色和H E染色则在 h发现较多的组织坏死灶,C A 区神经细胞缺失;随感染时间的延长而脑组织损伤加重.而定量 感染组和定量 感染组小鼠腹水和脑匀浆中均发现弓形虫滋养体;尼氏染色发现海马区神经元丢
6、失和大量坏死;HE染色发现组织坏死灶及炎性细胞浸润,脑组织损伤均较定量 感染组小鼠显著加重;免疫组化证实坏死灶中有弓形虫的分布.结论定位感染RH株弓形虫 个滋养体小鼠存活时间较长,脑组织病理变化逐渐加重,损伤局限于脑组织内,小鼠表现典型的弓形虫脑炎症状.因此定位感染 个弓形虫滋养体可以构建急性弓形虫脑炎小鼠模型,可为弓形虫对脑神经的损伤机制研究奠定基础.关键词:弓形虫;颅内定位注射;海马;弓形虫脑炎中图分类号:R 文献标志码:AD O I:/j d y x b C o n s t r u c t i o no fa na c u t e t o x o p l a s m ae n c e p
7、 h a l i t i sm o u s em o d e l b yt h e s t e r e o t a x i c s u r g e r yw i t hR Ht o x o p l a s m a t r o p h o z o i t e sS IK a i w e i,L I UJ i a n x i n,WUF e n g,L IX i a o q i,F UZ i h a o,GONGJ i n h u a,WANGJ u n y a n g,CHE NGY a n b i n(D e p a r t m e n to fP a t h o g e n i cB i o
8、 l o g ya n dI mm u n o l o g y;I n s t i t u t eo fN e u r o b i o l o g y;C e n t e ro fM e d i c a lE x p e r i m e n tT e a c h i n gf o rP o s t g r a d u a t e s;Z o n g l i a nE x p e r i m e n t a lC l a s so fG r a d e ;B a s i cM e d i c i n eC l a s so fG r a d e ,X ia nJ i a o t o n gU n
9、 i v e r s i t yH e a l t hS c i e n c eC e n t e r,X ia n ,C h i n a)A B S T R A C T:O b j e c t i v eT o c o n s t r u c ta n a c u t et o x opl a s m a e n c eph a l i t i s m o u s e m o d e lbyo b s e r v i ngt h epa t h o l ogi c a l c h a nge si nt h eh ip po c a mpu so fm i c ei n f e c t e
10、d w i t hT o x opl a s m ago n d i is t r a i n RHM e t h o d sT h equ a n t i t a t i v eRHT o x opl a s m ago n d i i(,a n d t r oph o z o i t e s)w e r ei nje c t e di n t ot h eh ip po c a mpa lC A r egi o no fm i c ebyt h es t e r e o t a x i cs u rge ry;t h es u r v i v a ls t a t u so fm i c
11、ew a so b s e r v e d G i e m s as t a i n i ngw a su s e dt oo b s e r v et h ec h a nge s o f t o x opl a s m a i nm o u s ea s c i t e s a n db r a i n t i s s u eh o m oge n a t e s N i s s l s t a i n i nga n dH Es t a i n i ngw e r eu s e dt oo b s e r v et h epa t h o l ogi c a l c h a nge s
12、o fh ip po c a mpa l n e r v e t i s s u e T h ed i s t r i b u t i o no fT o x opl a s m ago n d i ii nb r a i nt i s s u ew a so b s e r v e dbyi mm u n o h i s t o c h e m i c a lA B C m e t h o d R e s u l t sT h eRHT o x opl a s m ago n d i ii n f e c t e d m i c e期司开卫,刘建新,吴锋,等 RH株弓形虫颅内定位注射建立急性
13、弓形虫脑炎小鼠模型的研究本刊网址:h t t p:/y x x b x j t u e d u c n微信公众号:西安交通大学学报医学版s h o w e do b v i o u s sympt o m s s u c ha s a r c h e db a c k,b r i s t l i ngh a i r,a b d o m i n a l d i s t e n s i o n,s u b t l e t r e m o r a n dh e m ipl egi ao nt h ef o u r t h d ayo fi n f e c t i o n T h es u r v i
14、 v a lo f m i c ei n t r oph o z o i t e sgr o upw a sl o nge r,n ot r oph o z o i t e so fT o x opl a s m ago n d i iw e r ef o u n d i na s c i t e s,af e wps e u d o cys t sw e r ef o u n di nb r a i nt i s s u eh o m oge n a t e sa f t e r i n f e c t e df o r h o u r s,a n d m o r et r oph o z
15、o i t e sw e r ef o u n da f t e rd e a t h Nys ls t a i n i nga n d H Es t a i n i ngs h o w e d m o r et i s s u en e c r o s i s f o c i a n d l o s so fn e r v ec e l l s i nC A a r e aa f t e r i n f e c t e d h T h e i nju ryag gr a v a t e dw i t ht h epr o l o nga t i o no fi n f e c t i o n
16、t i m e T o x opl a s m at r oph o z o i t e sw e r ef o u n di na s c i t e sa n db r a i nh o m oge n a t e so fm i c ei n a n d t r oph o z o i t e sgr o ups N i s s ls t a i n i ngr e v e a l e dn e u r o n a ll o s sa n d m a s s i v en e c r o s i si nt h eh ip po c a mpu s H Es t a i n i ngs h o w e dn e c r o s i sa n di n f l a mm a t o ryc e l l i n f i l t r a t i o n T h eb r a i nt i s s u ei nju rys ign i f i c a n t lyag gr a v a t e dc o mpa r e dw i t h t r oph o z o i t e sgr o
