1、2023.1 试验研究紫荆（Cercis chinensis Bunge）别名满条红，豆科紫荆属，落叶灌木1。丛生紫荆是紫荆的优良品种，先花后叶，24月和810月为花期，一年开2次花，花期长，花色艳丽，萌蘖性强，耐修剪。花紫红色或粉红色，花长1.01.3 cm，410余朵成束，簇生于老枝和主干上，密密层层，满树嫣红，绚丽动人。叶纸质，近圆形或三角状心形，两面通常无毛，嫩叶绿色，只有叶柄略带紫色。丛生紫荆树姿优美，既可用作庭院、公园绿地、道路两旁的绿化美化，也可用来盆栽观赏，对氯气有一定的抵抗性，滞尘能力强，皮、果、木、花皆可入药，是家庭和美、骨肉情深的象征，具有较高的经济、生态、景观利用价值，
2、而且花海应用前景广阔。丛生紫荆扦插成活率低，主要依靠播种、嫁接繁殖，繁殖速度慢；组培快繁技术是解决目前丛生紫荆苗木稀缺、质量参差不齐问题的主要途径。在丛生紫荆组织培养过程中，培养基的分装厚度设置、高温高压灭菌是关键步骤。本试验研究丛生紫荆培养基的不同分装厚度、不同灭菌时间对抗污染及丛生紫荆组培苗生长情况的影响，以期为丛生紫荆规模繁育、工厂化生产提供良好的技术平台。1材料与方法1.1试验地概况本试验在钦州市林业科学研究所完成，所内各项试验设施完善，为本试验的顺利完成提供了必要条件。高压灭菌锅为广州豪尔生医疗设备有限公司生产的自动控制压力蒸气灭菌锅器；培养瓶是广口玻璃瓶（150 mL容量圆柱瓶)，
3、瓶高9.5 cm，瓶口直径5.5 cm。1.2试验材料试验所用材料为MS培养基及钦州市林业科学研究所培养室提供的丛生紫荆无菌芽。1.3试验方法1.3.1丛生紫荆培养基高压灭菌时间筛选按丛生紫荆培养基灭菌时间的长短设计7个处理。灭菌时间 分 别 为17 min、18 min、19 min、20 min、21 min、22 min、24 min。每个处理15瓶，重复3次。每瓶装培养基的厚度为2.0 cm（35 mL）。培养基在121高压灭菌锅灭菌后静置于培养室内进行空培，分别在空培第3天、第7天、第14天观察并统计空培培养基污染率。丛生紫荆培养基厚度、灭菌时间对抗污染及组培苗的影响基金项目：广西钦
4、州市科学研究与技术开发计划项目（编号：20204102）。作者简介：李芳菲（1980-），女，本科，工程师，从事植物组培及种苗繁育研究。E-mail:通讯作者：杨利平（1981-），女，硕士，高级工程师，从事植物组培及种苗繁育研究。E-mail:李芳菲1杨利平1黄李丛2陈丽文1时群1杨琼1韦冬玲1（1.钦州市林业科学研究所广西钦州535099；2.钦州市林业局广西钦州535099）摘要：培养基的分装厚度和灭菌时间是培养基抗污染的关键，直接影响组培苗的生长和生产，对降低污染意义重大。通过不同灭菌时间及不同分装厚度丛生紫荆培养基抗污染效果试验、不同分装厚度培养基对丛生紫荆组培苗生长发育的影响试验，
5、筛选出MS丛生紫荆培养基最佳灭菌时间为20 min、最佳分装厚度为2.0 cm。本试验可降低组培过程中受污染的风险，降低组培苗成本，减少经济损失，为丛生紫荆规模繁育、工厂化生产提供良好的技术平台。关键词：丛生紫荆；培养基；分装厚度；灭菌时间50-试验研究 2023.11.3.2丛生紫荆培养基分装厚度筛选（1）空培培养基。按丛生紫荆培养基分装厚度设计7个处理。处理：1.4 cm（15 mL）；处理：1.6 cm（20 mL）；处理：1.8 cm（30 mL）；处理：2.0 cm（35 mL）；处理：2.2 cm（40 mL）；处理：2.5 cm（50 mL）；处理：3.0 cm（65 mL）。每
6、个处理15瓶，重复3次。培养基在121高压灭菌锅灭菌20 min后静置培养室进行空培，分别在第3天、第7天、第14天观察并统计空培培养基污染率。（2）丛生紫荆组培苗培养。按丛生紫荆培养基分装厚度设计5个处理。处理：1.4 cm（15 mL）；处理：1.8 cm（30 mL）；处理：2.0 cm（35 mL）；处理2.2 cm（40 mL）；处理：2.5 cm（50 mL）。每个处理15瓶，重复3次。培养基在121高压灭菌锅灭菌20 min后静置冷凝备用。接种时，在超净工作台上左手执摄子轻轻夹起无菌芽，右手拿剪刀选取生长状态旺盛的腋芽茎段插入装有培养基的广口培养瓶中，每瓶接种5个腋芽茎段。30
7、d后观察并统计污染率、生长情况。1.3.3培养基、培养条件及操作要点（1）培养基配置。每次试验都是用同一种MS培养基，培养基均添加0.35%琼脂粉、3%蔗糖，pH 5.7。分装后的培养基在压力0.13 MPa、温度121下的高压灭菌锅灭菌，然后静置冷却备用。（2）培养条件。培养室温度保持在（252）：空气湿度为50%70%，光照度为1 5003 000 lx，光照时间为12 h/d。（3）操作要点。培养基配制、高压灭菌、无菌芽接种等步骤都要严格遵守操作规程。接种前，打开超净工作台，开启工作台机风通风，打开紫外灯照射15 min以上，然后关掉紫外灯，约5 min后紫外灯产生的臭氧散尽，方可使用超
8、净工作台进行接种操作。接种盘、剪刀、镊子等接种工具均要放入专用接种消毒器内高温消毒。接种人员要穿专用拖鞋、专用工作服、戴专用工作帽和口罩。2结果与分析2.1不同灭菌时间对丛生紫荆培养基的抗污染效果由表1可知，灭菌时间是丛生紫荆培养基灭菌效果的关键。处理灭菌时间最短，污染率最高，空培第3天污染率为17.9%，被污染的丛生紫荆培养基上有的长着水渍状、斑块状的乳白色或黄色细菌菌落；有的长着绒毛状、絮状的白色或灰黑色真菌菌落；有的培养瓶内壁也不同程度地长出絮状、网状菌丝（图1）。第7天污染率达22.3%（图2）。随着灭菌时间的增加丛生紫荆培养基抗污染效果越来越好，灭菌时间达20 min时，已经能把丛生
9、紫荆培养基里的真菌、细菌全部杀灭。但灭菌时间超过20 min时，丛生紫荆培养基中的蔗糖、琼脂、有机物质、维生素、激素等物质就会分解，导致培养基变质、变色，pH降低使培养基凝固性不好2-6。处理的培养基颜色呈褐黄色，凝固性差，拿起培养瓶使之倾斜45后，瓶内培养基随之塌落、变形，轻轻摇晃培养瓶时培养基有明显的颤动，呈可流动黏稠状;将无菌芽茎段放于培养基表面，无菌芽茎段很快下沉到培养基中间或底部，无法用于接种。可见丛生紫荆培养基的最佳灭菌时间为20 min。7个处理中，空培的第814天都没有新增的污染数（表1），可见丛生紫荆培养基的真菌、细菌污染表1不同灭菌时间对丛生紫荆培养基抗污染效果处理灭菌时间
10、（min）分装厚度（cm）第3天污染率（%）第7天污染率（%）第14天污染率（%）培养基状态172.017.922.322.3呈较软半透明果冻状，有部分污染真菌、细菌，部分可用于接种,但接种的无菌芽茎段直立不稳固182.011.213.413.4呈较软半透明果冻状，有部分污染真菌、细菌，部分可用于接种。接种的无菌芽茎段直立较稳192.08.98.98.9呈半透明果冻状，有部分污染真菌、细菌，部分可用于接种202.0000呈半透明果冻状，适合用于接种212.0000呈米黄色果冻状，可用于接种222.0000呈较软淡黄色果冻状，不利于接种242.0000呈褐黄色可流动黏稠状，不能用于接种51-20
11、23.1 试验研究一般在7 d内显现出来。2.2不同分装厚度对丛生紫荆培养基的抗污染效果分装厚度对丛生紫荆培养基抗污染效果有一定的影响。由表2可知，当丛生紫荆培养基分装厚度达到3.0 cm(65 mL）时，培养基溶液超过了培养瓶容量的1/3，开始有污染现象发生。其原因可能是培养基厚度太大时菌体数量多而蒸汽穿透消杀不够；或是培养基沸腾时溢出瓶盖引起污染。培养基空培7 d后表2不同分装厚度处理丛生紫荆培养基抗污染效果处理分装厚度（cm）灭菌时间（min）第3天污染率（%）第7天污染率（%）培养基状态1.42000呈半透明果冻状，可用于接种1.62000呈半透明果冻状，可用于接种1.82000呈半透
12、明果冻状，可用于接种2.02000呈半透明果冻状，适合用于接种2.22000呈半透明果冻状，可用于接种2.52000呈半透明果冻状，可用于接种3.0206.78.9呈半透明果冻状，有部分污染真菌、细菌，部分可用于接种表3不同分装厚度的培养基对丛生紫荆组培苗生长发育的影响处理分装厚度（cm）灭菌时间（min）污染率（%）苗高（cm）生长情况1.42005.3叶色黄绿，植株弱小，生根少、根而细而短1.82006.9叶色翠绿，植株较弱，生根较多、细2.02007.1叶色深绿，植株强壮，生根多、粗2.22007.0叶色深绿，植株强壮，生根多、粗2.52007.1叶色深绿，植株强壮，生根多、粗图2分装厚
13、度为2.0 cm(35 mL），高压灭菌17 min，空培第7天被污染的培养基图1分装厚度为2.0 cm(35 mL），高压灭菌17 min，空培第3天被污染的培养基无污染的可以用来接种丛生紫荆。2.3不同分装厚度的培养基对丛生紫荆组培苗生长发育的影响培养基是植物组织培养的物质基础，也是植物组织培养能否获得成功的重要因素之一，分装时要掌握好分装量，多了浪费培养基，少了影响生长7。MS丛生紫荆培养基能让丛生紫荆无菌芽茎段在同一种培养基中同步进行继代增殖和壮苗生根，一次成苗。由表3可知，处理的培养基量最少、层最薄，由于营养不足、根的伸展空间不足，丛生紫荆组培苗长得弱小，生根少，根细而短。随着培养基
14、厚度的增加，丛生紫荆组培苗长势越来越好，厚度增加至2.0 cm时，丛生紫荆组培苗叶色深绿，植株强壮，生根多而粗，长势佳。但培养基厚度继续增加时，丛生52-试验研究 2023.1单179、硕秋702、金海1908、德发106等15个品种。抗病性较差的品种有鑫星321、鑫研156、鑫玉518、登海606、登海111、金海188、宁研503、齐单805、连胜253、登海371、來玉238等11个品种。（4）锈病。抗病性较好的品种有安玉706、德单5、宁研678、立源296、中农大688、京农玉658、桓丰107、胜风1号、中天308、MC121、宁研519、天泰619、京科927、鑫瑞57、德单12
15、3、德单179、金海1908、道吉1+1、郑源玉432、农大778、鑫瑞76、登海682、道吉158等23个品种。抗病较差的品种有博信212、桓丰601、鲁禾1号、鲁单9088、NK815、德发718、DH710、天泰366、来玉238、DH371、齐单805、宁研503、DH111、鑫玉518、金海188、DH606、鑫研156、鑫星321等18个品种。3讨论与结论通过分析各品种的产量、抗病性、抗倒性等性状可知，表现较好的品种有硕秋702、鑫瑞76、立原296、农大778、中农大688、京科927、徳单5号、胜风1号、鑫瑞57、金海1911、徳单123、安玉706、桓丰107等。近年来，寿光
16、地区气候条件较为异常，6月阴雨天气较多且降水量较大，容易产生水涝，影响玉米播种，在玉米生长后期降雨严重，影响收获和碳水化合物积累。鉴于近几年时长发生的异常气候，未来寿光地区要重视筛选高产、稳产、耐极端天气、综合抗病的玉米品种。参考文献1沈峰,张亚静,邱华峰.鲜食甜玉米新品种比较试验初报J.上海农业科技,2019（6）:56-57，68.2柯建武,杨青龙,孙海艳,等.通辽市北部牧区青贮玉米品种筛选试验研究J.草原与草业,2019,31（3）:58-61.3王菊芬.芒市2016年普通玉米区域试验J.种子世界,2018（4）:18-20.（上接46页）紫荆组培苗仍保持处理的长势，由此可知，既有利于丛生紫荆组培苗生长又不造成浪费的培养基厚度为2.0 cm。3讨论与结论污染对植物组织培养危害很大。培养基的分装厚度和灭菌时间是培养基抗污染的关键，还直接影响组培苗的生长和生产。本试验通过筛选出最佳丛生紫荆培养基分装厚度、灭菌时间，来避免培养基污染，快速繁育出优质丛生紫荆苗，从而降低组培苗成本，减少经济损失，以期为丛生紫荆规模繁育、工厂化生产提供良好的技术平台。灭菌时间是决定培养基灭菌效果的关键。不同
