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38-0816-大鼠心组织MDA含量测定过程(1).doc

上传人:a****2 文档编号:3466573 上传时间:2024-05-09 格式:DOC 页数:1 大小:33.50KB
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浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:实验时间:月 日8:3020:30请勿透露学校、教师和个人信息大鼠心组织MDA含量测定过程【实验目的】熟悉并掌握MDA试剂盒的使用方法;测定大鼠心组织MDA含量【实验材料】大鼠心组织匀浆液、MDA试剂盒、分光光度计、水浴锅等【实验步骤】1. 组织研磨:将解冻的心组织于玻璃匀浆器中,加入裂解液(1mL/0.06g组织),冰上研磨2. 将匀浆液加入到EP管中,4放置30 min,4下2000 r/min离心10 min,取上清液4.混合试剂的配制:a) 测定管混合试剂:取 2mL 1号试剂、60 mL 2号试剂、20 mL 3号试剂共82 mL 分装于2只50 mL离心管中; b)对照管混合试剂:取2 mL 1号试剂、60 mL 2号试剂、20 mL 50%冰醋酸共82 mL 分装于2只50 mL离心管中5.对22只试管进行分组编号6.加样:标准管标准空白管测定管测定空白管样本数22181810nmol/mL 标准品(mL)0.1无水乙醇(mL)0.1测试样品(mL)0.10.1测定管混合试剂(mL)444对照管混合试剂(mL)47.将所有试管旋涡混合器混匀,试管口用保鲜膜扎紧,用针头刺一小孔,95水浴40 min8.水浴40 min后取出试管,流水冷却,53 nm处,1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度9.数据记录及处理

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