大鼠心肌组织ET-1的表达测定【实验结果】大鼠心肌组织ET-1表达测定结果如图1所示: 图1 OJP1对大鼠心肌组织ET-1表达的影响(,n=3)【讨论】由结果可知,正常组大鼠ET-1表达明显高于其他给药组,说明造模不成功,尤其高于模型组,可能在加样时将模型组样品和正常组样品混淆,也可能是加样时由于操作原因使试剂遭到污染,以致反应体系出现过高的情况。从300与正常和模型组可以看出麦冬多糖对大鼠心肌ET-1的表达有降低作用,但100组和阳性组的表达却极低,可能由于引物稀释时混合不均匀,导致荧光定量PCR反应无法完全进行。而且组内的显著差异较大,说明在加样过程中的确存在问题。【注意事项】1. 使用的枪头等一次性用品要经过高压蒸汽灭菌2. 加样时要注意,避免体系受到污染,导致特征曲线出现多重峰,得到不准确的结果3. 在RNA提取时要注意,尽量减少基因组DNA污染4. 在试剂准备和样品处理时应使用超净工作台,以防止对环境的污染5. 操作台、移液器、离心机、PCR扩增仪等仪器设备应经常用75%乙醇擦拭消毒。每次实验前后用70%乙醇擦拭移液器、操作台6. 配制反应体系时,应注意移液器的使用方法,所有的液体都要缓慢加至管底,不要加至管壁,所有液体的混匀要用振荡器进行,不能用移液器吹打,反应体系配制完毕后低速离心数秒,避免产生气泡