1、食品平安突发事件样品采集及实验室检验 微生物局部微生物局部 本溪市疾控中心郭振坤本溪市疾控中心郭振坤 疾控中心微生物检验室面临的形势 随着随着?突发公共卫生事件处理条例突发公共卫生事件处理条例?的实施,的实施,各级各部门对突发公共卫生事件引起了高各级各部门对突发公共卫生事件引起了高度重视,特别是涉及人数多的,大型活动度重视,特别是涉及人数多的,大型活动期间的,发生在托有机构,学校的,社会期间的,发生在托有机构,学校的,社会影响较大的,更受到各级领导及社会各界影响较大的,更受到各级领导及社会各界的关注,这给我们疾控中心的检验能力提的关注,这给我们疾控中心的检验能力提出了更高的要求,也给我们微生物
2、实验室出了更高的要求,也给我们微生物实验室增加了压力增加了压力,迫切需要提高食物中毒检验专迫切需要提高食物中毒检验专业技术水平。业技术水平。概述 食物中毒是指人摄人了含有生物性、化学性有食物中毒是指人摄人了含有生物性、化学性有毒有害物质后或把有毒有害物质当作食物摄入毒有害物质后或把有毒有害物质当作食物摄入后所出现的而非传染性的急性或亚急性疾病,后所出现的而非传染性的急性或亚急性疾病,属于食源性疾病的范畴。食物中毒既不包括因属于食源性疾病的范畴。食物中毒既不包括因暴饮暴食而引起的急性胃肠炎、食源性肠道传暴饮暴食而引起的急性胃肠炎、食源性肠道传染病染病(如伤寒如伤寒)和寄生虫病和寄生虫病(如囊虫病
3、如囊虫病),也不包括,也不包括因一次大量或者长期少量摄入某些有毒有害物因一次大量或者长期少量摄入某些有毒有害物质而引起的以慢性毒性为主要特征质而引起的以慢性毒性为主要特征。细菌性食物中毒实验室检验的意义 细菌性食物中毒,有易发性和发病普遍性细菌性食物中毒,有易发性和发病普遍性的特点,它全年皆可发生,对人类的健康的特点,它全年皆可发生,对人类的健康构成危害构成危害 细菌性食物中毒实验室诊断资料是判定是细菌性食物中毒实验室诊断资料是判定是否为细菌性食物中毒的重要依据。实验室否为细菌性食物中毒的重要依据。实验室诊断是为确定中毒病因,查明中毒原因,诊断是为确定中毒病因,查明中毒原因,控制中毒事件蔓延;
4、对食物中毒事故责任控制中毒事件蔓延;对食物中毒事故责任人确实定及处分提供证据的。人确实定及处分提供证据的。细菌性食物中毒 定义:定义:(1)(1)细菌性食物中毒:指因摄人被致病菌或其毒素污细菌性食物中毒:指因摄人被致病菌或其毒素污染的食物引起的急性或亚急性疾病,是食物中毒中最染的食物引起的急性或亚急性疾病,是食物中毒中最常见的一类。常见的一类。2 2特点:发病率较高而病死率较低,有明显的季特点:发病率较高而病死率较低,有明显的季节性,不具传染性。与食物有关,停止食用就不再有节性,不具传染性。与食物有关,停止食用就不再有病例。血清学:微生物性食物中毒可有双相血清抗体病例。血清学:微生物性食物中毒
5、可有双相血清抗体凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不升高。升高。无论从国内还是从国际的资料都说明,微生物污染食无论从国内还是从国际的资料都说明,微生物污染食品是最重要的食品卫生问题,细菌性食物中毒无论从品是最重要的食品卫生问题,细菌性食物中毒无论从发生的起数人数都是占第一位的。我们每年发生的细发生的起数人数都是占第一位的。我们每年发生的细菌性食物中毒事件约占所有食物中毒事件的菌性食物中毒事件约占所有食物中毒事件的303040%40%,人数约占整个中毒人数的人数约占整个中毒人数的606090%90%。在各类食物中毒中,细菌性食物中毒最多见,
6、占在各类食物中毒中,细菌性食物中毒最多见,占食物中毒总数的一半左右。细菌性食物中毒具有明显食物中毒总数的一半左右。细菌性食物中毒具有明显的季节性,多发生在气候炎热的季节。细菌性食物中的季节性,多发生在气候炎热的季节。细菌性食物中毒发病率高,病死率低,其中毒食物多为动物性食品。毒发病率高,病死率低,其中毒食物多为动物性食品。20012001年,卫生部共收到重大食物中毒事件报告年,卫生部共收到重大食物中毒事件报告185185起,起,1571515715人中毒,死亡人中毒,死亡146146人,其中第三季度报告的重大人,其中第三季度报告的重大食物中毒起数、中毒人数、死亡人数最多。报告的重食物中毒起数、
7、中毒人数、死亡人数最多。报告的重大食物中毒中,细菌性食物中毒人数最多,化学性食大食物中毒中,细菌性食物中毒人数最多,化学性食物中毒发生起数最多,且死亡人数最多。按就餐形式物中毒发生起数最多,且死亡人数最多。按就餐形式分类,集体食堂中毒人数最多,家庭食物中毒死亡人分类,集体食堂中毒人数最多,家庭食物中毒死亡人数最多。在餐馆或家庭厨房内常见是细菌性食物中毒。数最多。在餐馆或家庭厨房内常见是细菌性食物中毒。之所以发生细菌性食物中毒,是因为首先是食品被细之所以发生细菌性食物中毒,是因为首先是食品被细菌污染;其次是细菌在适宜的条件下,在被污染的食菌污染;其次是细菌在适宜的条件下,在被污染的食品中大量繁殖
8、或产生毒素;最后是未对食品加热或加品中大量繁殖或产生毒素;最后是未对食品加热或加热处理不彻底,未能杀死细菌或破坏细菌毒素。热处理不彻底,未能杀死细菌或破坏细菌毒素。细菌性食物中毒分类 1感染型:是指食入含有大量活菌的食物导致感染型:是指食入含有大量活菌的食物导致的食物中毒。其前提是食物被致病菌污染,并且的食物中毒。其前提是食物被致病菌污染,并且有一定的时间和条件使细菌在食品中大量繁殖到有一定的时间和条件使细菌在食品中大量繁殖到达可引起发病的数量,如沙门氏菌属中的某些细达可引起发病的数量,如沙门氏菌属中的某些细菌,蜡样芽胞杆菌等。菌,蜡样芽胞杆菌等。2毒素中毒型:是由于食品受到细菌污染后,毒素中
9、毒型:是由于食品受到细菌污染后,在食品中繁殖并在适宜的条件下产生大量的外毒在食品中繁殖并在适宜的条件下产生大量的外毒素所引起的中毒。常见的有葡萄球菌肠毒素,肉素所引起的中毒。常见的有葡萄球菌肠毒素,肉毒梭菌素毒引起的食物中毒。毒梭菌素毒引起的食物中毒。世界公认的8种细菌性食物中毒病原菌 沙门氏菌属、金黄色葡萄球沙门氏菌属、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、付溶血菌、蜡样芽孢杆菌、付溶血性孤菌、产气荚膜梭菌,肉性孤菌、产气荚膜梭菌,肉毒梭菌、致病性大肠菌等,毒梭菌、致病性大肠菌等,椰毒假单胞菌。椰毒假单胞菌。我国常见食物中毒病原菌 除以上除以上8种外,还有变形杆菌,小种外,还有变形杆菌,小肠结肠炎耶
10、尔森氏菌,空肠弯曲菌,肠结肠炎耶尔森氏菌,空肠弯曲菌,溶血性链球菌,粪链球菌,志贺氏溶血性链球菌,粪链球菌,志贺氏菌,气单胞菌,类志贺氏邻单胞菌,菌,气单胞菌,类志贺氏邻单胞菌,溶藻弧菌,麦氏弧菌,不凝集弧菌。溶藻弧菌,麦氏弧菌,不凝集弧菌。我市近年来引起食物中毒细菌 变形杆菌,蜡样芽孢杆菌,变形杆菌,蜡样芽孢杆菌,沙门氏菌,致泻大肠埃希氏沙门氏菌,致泻大肠埃希氏菌,副溶血性弧,志贺氏菌,菌,副溶血性弧,志贺氏菌,弗尼斯杆菌。弗尼斯杆菌。我市食物中毒情况我市食物中毒情况 我市2002-2022年共实验室诊断检测食物 中毒26起,中毒人数454人。引起食物中 毒常见原因是食品受到细菌污染,共发生
11、 细菌性食物中毒18起,中毒人数299人。食物中毒病原检验情况食物中毒病原检验情况 2022 西湖区慧海幼儿园 20 蜡样芽孢 标本采集 样品质量对微生物检验有非常重要的作用,样样品质量对微生物检验有非常重要的作用,样品的采集应在边调查边分析的根底上确定,这品的采集应在边调查边分析的根底上确定,这样可采集到典型的样品。同时在调查分析时,样可采集到典型的样品。同时在调查分析时,检验人员与流调人员的密切配合可确定更合理检验人员与流调人员的密切配合可确定更合理的检验样品和检验方法。的检验样品和检验方法。样品采集的关键因素样品采集的关键因素1 样品采集的数量与质量直接关系到治病物质的样品采集的数量与质
12、量直接关系到治病物质的判定,要查明食物中毒的治病子,必须采集与判定,要查明食物中毒的治病子,必须采集与中毒相关的所有样品,并根据病人的临床病症,中毒相关的所有样品,并根据病人的临床病症,结合流行病学调查资料,有重点,有目的地采结合流行病学调查资料,有重点,有目的地采集。这些样品包括剩余食物,患者便样,从业集。这些样品包括剩余食物,患者便样,从业人员便样,血液,呕吐物,工具容器涂抹物。人员便样,血液,呕吐物,工具容器涂抹物。特别是剩余食物,便样,血液初期,恢复期特别是剩余食物,便样,血液初期,恢复期 样品采集的关键因素样品采集的关键因素2 采样的及时准确是查明食物中毒致病物质的重采样的及时准确是
13、查明食物中毒致病物质的重要环节。不同采样时间与食物中毒确实证率有要环节。不同采样时间与食物中毒确实证率有很大关系,由于采样不及时,导致可疑食物被很大关系,由于采样不及时,导致可疑食物被处理,中毒现场被清扫干净,即使采到剩余食处理,中毒现场被清扫干净,即使采到剩余食物,检出致病菌,也可能与来至病人的样品不物,检出致病菌,也可能与来至病人的样品不符合,因此,及时准确采样致关重要。符合,因此,及时准确采样致关重要。食物中毒现场采样常备用品 注射器注射器 止血带止血带 消毒棉签消毒棉签 75%酒精棉球酒精棉球 碘酒棉球碘酒棉球 灭菌空试管灭菌空试管 酒精灯酒精灯 火柴火柴 消毒纱布消毒纱布 调匙调匙
14、勺子勺子 夹子夹子 镊子镊子 剪刀剪刀 记号笔记号笔 记录记录 无菌无菌广口瓶广口瓶 灭菌玻璃试管灭菌玻璃试管 灭菌粪便盒灭菌粪便盒 无菌无菌塑料袋塑料袋 肛拭棉棒肛拭棉棒 工作衣工作衣 口罩口罩 帽子帽子 手套手套 灭菌生理盐水灭菌生理盐水 无菌平皿无菌平皿 胶布胶布 胶水胶水 无菌干棉球无菌干棉球 其他根据需要培养基其他根据需要培养基。细菌性食物中毒病原菌检验 方法选择 食物中毒是突发事件,在食物中毒事件过程中检验时间要求,所以实验室为了尽快出具报告,要根据具体情况,选择正确的检验方法。引起食物中毒的细菌种类繁多,临床病症和潜伏期各不相同,检验人员要了解各种食物中毒的机理,了解食物中毒的治
15、病环节进行分析寻找食物中毒的污染来源和可能感染途径。以确定原因食品,判定检验方向,当临床病症不明显,原因食品不明确时,有针对性的选择会顾此失彼而漏检,而且目前发生的食物中毒,已由单一的菌转为两种或两种以上共同引起,在开始检测时,就要多项选择几个工程。几种常用方法 经典方法:常规标准的检验方法,包括形态观察,培经典方法:常规标准的检验方法,包括形态观察,培养特征,生化特性,血清学试验,噬菌体应用,抗体养特征,生化特性,血清学试验,噬菌体应用,抗体测定,毒力试验。测定,毒力试验。新的快速检验方法:自动鉴定仪器,手工新的快速检验方法:自动鉴定仪器,手工API方法,方法,一些特殊显色培养基,纸片法。经
16、典方法准确性高,一些特殊显色培养基,纸片法。经典方法准确性高,稳定性也较好,但时间较长:快速方法时间短,但准稳定性也较好,但时间较长:快速方法时间短,但准确性差,食物中毒检验中,应采用多种方法,快速方确性差,食物中毒检验中,应采用多种方法,快速方法灵敏性高,可以用于初筛,用其他方法同时验证,法灵敏性高,可以用于初筛,用其他方法同时验证,进行确认。进行确认。食物中毒检验的物资准备 1合成培养基:一些选择性培养合成培养基:一些选择性培养 基。基。新新鲜羊血,一些涉及到的抗菌素。鲜羊血,一些涉及到的抗菌素。2光电两用双目显微镜。光电两用双目显微镜。3诊断用品:血清。诊断用品:血清。4消耗性材料。消耗性材料。5根据情况储藏一些新的快速检验材根据情况储藏一些新的快速检验材 料。料。常见中毒细菌在食品中的分布 沙门氏菌。沙门氏菌。动物和人的动物和人的肠脏。肠脏。蛋、奶类及蛋、奶类及奶类制成品、奶类制成品、肉类及肉类肉类及肉类制成品,特制成品,特别是家禽类别是家禽类食品食品 金黄葡萄球金黄葡萄球菌。菌。咽喉、鼻腔、咽喉、鼻腔、皮肤、头发皮肤、头发和伤口。和伤口。糕点、雪糕、糕点、雪糕、奶及奶类制奶及