1、0 2 1CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESIS论著癌变畸变突变2023 年 1 月第 35 卷第 1 期收稿日期：2022-04-20；修订日期：2022-12-31基金项目：河北省卫生健康委医学科学研究课题计划项目(20230143)作者信息：邓会岩，E-mail：denghuiyan_。*通信作者，刘月平，E-mail：肺癌组织样本和血液样本EGFR基因检测对比研究邓会岩1，刘畅1，贾迎1，李芳1，尹丹静1，檀紫瑞2，苏冰3，刘月平1，*(1河北医科大学第四医院病理科，河北石家庄050011；2河北医科大学第四医院胸外科，河北石家庄050011；
2、3河北省宁晋县妇幼保健院，河北邢台055550)Comparative detection of the EGFRgene in lung adenocarcinomatissues and blood samplesDENG Huiyan1,LIU Chang1,JIA Ying1,LI Fang1,YIN Danjing1,TAN Zirui2,SU Bing3,LIU Yueping1,*(1.Department of Pathology,the Fourth Hospital of Hebei MedicalUniversity,Shijiazhuang 050011;2.Depar
3、tment of Thoracic Surgery,theFourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011;3.Maternal and Child Health Hospital of Ningjin County,Xingtai 055550,Hebei,China)【摘要】目的：研究肺腺癌患者不同样本EGFR基因检测结果的异同，以更精准地反映患者体内EGFR突变情况。方法：收集2016年7月2017年12月收治的期经病理确诊为肺腺癌患者175例，175例均有血浆样本，其中119例同时有活检组织样本，12例同时有
4、胸水沉渣细胞样本。采用突变扩增系统(ARMS)-聚合酶链式反应(PCR)方法对收集到的活检组织样本、胸水沉渣细胞样本和血液样本进行EGFR基因检测，分析不同类型样本间结果的差异，以及与患者临床病理指标的关系。结果：联合检测的EGFR基因突变总阳性率较单纯血液样本阳性率提高了8.6%，较单纯组织样本提高了3.1%。EGFR突变在不同的性别(2=3.451，P=0.045)、肿瘤直径(2=8.911，P=0.002)、T分期(2=17.567，P=0.000)、淋巴结转移(2=18.511，P=0.000)、转移站数(2=3.341，P=0.047)和远处转移(2=10.874，P=0.001)组
5、间的差异有统计学意义。将血液和组织两组样本EGFR突变率进行比较，差异有统计学意义(P=0.000)。在患者临床病理指标与生存时间的分析中，肿瘤直径95%CI(0.151，0.725)，P=0.006、淋巴结转移95%CI(0.180，0.865)，P=0.020、远处转移95%CI(0.097，0.612)，P=0.003均是影响患者无进展生存期的重要因素。结论：肺癌患者血液样本、活检组织样本、胸水沉渣细胞样本在EGFR检测过程中的联合应用能够获得更高的检出率，可为临床更多地筛选出适合EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗的人群。对于女性患者、肿瘤直径3 cm、T4期、淋巴结转移且超过3
6、站、远处转移患者检测到血液EGFR基因突变的几率更高。其中肿瘤直径3 cm、淋巴结转移、远处转移患者的无进展生存期更短。【关键词】肺腺癌；EGFR基因；血液样本；活检组织样本；胸水沉渣细胞样本；对比研究中图分类号：R365文献标志码：A文章编号：1004-616X(2023)01-0021-05doi：10.3969/j.issn.1004-616x.2023.01.004【ABSTRACT】OBJECTIVE：To detect expression of the EGFR gene in lung adenocarcinomas so as tounderstand EGFR gene m
7、utation in patients.METHODS：From July 1，2016 to December 1，2017，a totalof 175 patients with stage III-IV lung adenocarcinomas who were admitted to our hospital were collected.Among them，all patients provided blood samples，119 provided tissue biopsy samples，175 provided plasmasamples and 12 provided
8、pleural fluid sediment cell samples.EGFR gene detection was performed on thesesamples using ARMS-PCR.Differences in results among the different types of samples and their relationshipswith patients clinicopathological data were analyzed.RESULTS：Detection of EGFR gene expression wasconducted on all b
9、lood and tissue samples.The total positive rate was 8.6%higher in the tissues than in thatof blood samples and 3.1%higher than that in paraffin block tissues.EGFR mutation was found in differentsex(2=3.451，P=0.045)，tumorsize(2=8.911，P=0.002)，Tstage(2=17.567，P=0.000)，lymphnodemetastasis(2=18.511，P=0.
10、000)，metastasis station(2=3.341，P=0.047)and distant metastasis(2=10.874，P=0.001).EGFR mutation rates in blood and tissue samples were compared，and the difference was statisticallysignificant(P=0.000).Tumor size 95%CI(0.151，0.725)，P=0.006，lymph node metastases 95%CI(0.180，0.865)，P=0.020，distantmetast
11、ases95%CI(0.097，0.612)，P=0.003wereimportantfactorsaffecting论著癌变畸变突变0 2 2CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESISVol.35No.1Jan.2023progression-free survival.CONCLUSION：The combined application of samples from different tissues wasuseful in enhancing detection of EGFR gene expression.In addition，highe
12、r detection rate can increase thenumber of patients who are suitable for EGFR-tyrosine kinase inhibitors(TKIs)treatment in clinical practice.For female patients，the incidence of blood EGFR mutation was higher in those with tumor diameter 3 cm，stage T4，lymph node metastases with more than 3 stations，
13、and distant metastases.Patients with tumordiameter 3 cm，lymph node metastasis and distant metastasis had shorter progression-free survival.【KEY WORDS】lung adenocarcinoma；EGFR gene；plasma samples；biopsy tissue samples；pleural fluidsediment cell samples；comparative study目前，肺癌的发病率和死亡率在全球范围内的肿瘤疾病中居首位，且发
14、病率仍有逐年上升的趋势，我国亦不例外，全球癌症数据表明，肺癌导致的死亡占总体癌症死亡人数的 18.0%1-2。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)约 占 肺 癌 总 数 的85，大多数NSCLC患者发现时即为晚期或已出现转移。近年来，肺腺癌发病率已超过鳞状细胞癌3。放化疗是最常用于局部晚期或晚期NSCLC的治疗方法，它可以一定程度地改善症状、延长生存期，但存在肿瘤进展快、药物副作用大等缺点。随着目前分子检测技术的广泛开展，肿瘤的分子生物学检测和靶向治疗为患者提供了新的治疗策略。NSCLC 中表皮生长因子受体(epidermal growthfacto
15、r receptor，EGFR)基因突变的发现引导了一种新的治疗模式4。针对有EGFR基因突变的肺腺癌患者，诊断、治疗和临床预后有别于非EGFR基因突变的患者，EGFR 基因突变患者进行酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors，TKIs)治疗，对于延长患者生存期及改善患者生存质量都具有显著的指导意义5。组织活检是进行EGFR基因检测的金标准，可进一步提供有关肿瘤遗传特征的信息，有助于确定可接受治疗的患者6。然而，临床上组织样本取材困难，二次取材活检更是无法实现7。此时，外周血及胸水是一种存在于实性肿瘤组织外，可用于EGFR基因检测的肿瘤成分。外周血循环肿瘤 DNA
16、(circulatingtumor DNA，ctDNA)可提供与侵入性肿瘤活检组织相似的分子遗传信息，通常被称为“液体活检”，可用于疗效监测、早期辅助诊断及肿瘤进展与不良预后的早期预警8。除此之外，联合胸水及胸水沉渣细胞检测已成为检测NSCLC患者EGFR突变的几种新的、有前景且侵入性较小的补充方式，均是目前临床常用的检测手段。本研究回顾分析收治的175例肺腺癌患者，均为和期患者病例，所有病例均通过突变扩增系统(amplification refractory mutation system，ARMS)-聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)方法进行了EGFR基因突变检测，并对比不同样本间的检测结果。为进一步提升肺腺癌患者的EGFR突变检出率，更多地筛选出适合靶向治疗的患者提供了依据。1材料与方法1.1研究对象收集2016年7月2017年12月在河北省肿瘤医院呼吸内科和肿瘤内科收治的期肺腺癌住院和门诊病例175例，本研究所有病例均取得患者知情同意及通过伦理审查(2020KY314)。所有患者均经病理证实为肺腺癌(131例患者经组织病理证实为肺腺癌，
