1、DB12/T1066一2021前言本文件按照GB/T1.1一2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由天津市农业农村委员会提出并归口。本文件起草单位：天津市农业科学院。本文件主要起草人：张峰峰、谢凤行、周可、赵琼、李瑞环、赵玉洁、孙海波、王姝、张越、高晶琳、张新建。DB12/T1066-20214.2.2菌种培养室进行培养基的配制和菌种的保种、培养及检查等操作的房间。配有恒温光照培养箱、pH计、电子天平（精度0.01g)、分光光度计、光学显微镜(1000）、照度计（精度0.11x)、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅等。4.2.3规模生产车间进行菌剂规模生产。配有光
2、照设备和不同容量的透明发酵容器等。5生产技术流程5.1生产流程生产流程应按附录A执行。5.2菌种质量用于发酵的菌种应有菌种鉴定报告或菌株来源相关信息。发酵之前需检测菌种的有效活菌数和纯度，不能有杂菌污染，菌数110CFU/mL,有效活菌数的检测应按照GB/T38579中8.3要求操作。5.3培养基光合细菌液体培养基配方见附录B。保种固体培养基和计数培养基为液体培养基加入20g/L琼脂粉。5.4灭菌消毒保种固体培养基、生产液体菌种培养基以及计数培养基采用高压蒸汽灭菌，灭菌条件为121125 C,0.1 MPa0.15 MPa,灭菌20 min30 min。规模发酵容器用10mg/L20mg/L高
3、锰酸钾溶液或有效氯浓度为0.10.3%次氯酸钠溶液等消毒剂浸泡12h24h,消毒后，用清水洗净，检查无杂藻杂物后，加水和培养基。也可加入水和培养基后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为121C125，0.1MPa0.15MPa,灭菌20min30min。5.5液体菌种培养5.5.1容器容器为200mL500mL透明玻璃瓶，可高压蒸汽灭菌。5.5.2培养条件从穿刺培养基接种原菌种到液体培养基中，光照强度40001x50001x,光照周期14L:10D,培养温度25C35，静置培养7d10d。5.5.3质量检测配制计数培养基，利用平板涂布法测定菌数及杂菌率，按照GB/T38579中8.3要求操作。菌数110CFU/mL,杂菌率0.1%，即为合格菌种。5.6规模发酵5.6.1容器2
