1、 第第10章章 肠杆菌科肠杆菌科 (Enterobacteriaceae)p.116 概述概述 一大群居住在人和动物肠道中一大群居住在人和动物肠道中,生物学性状近似的革兰阴性杆菌生物学性状近似的革兰阴性杆菌 属于肠杆菌科属于肠杆菌科Enterobacteriaceae 多数是肠道的正常菌群多数是肠道的正常菌群 至少有至少有44个菌属,个菌属,170多个菌种多个菌种 少数为致病菌,是胃肠传染病的最重要病原菌少数为致病菌,是胃肠传染病的最重要病原菌 肠杆菌科细菌分类及致病性肠杆菌科细菌分类及致病性 埃希菌属 大肠埃希菌 肠道及肠道外感染 志贺菌属 痢疾志贺菌 细菌性痢疾 沙门菌属 伤寒沙门菌 沙门
2、菌病 枸橼酸杆菌 非劳地枸橼酸杆菌 泌尿道感染等 克雷伯菌属 肺炎克雷伯菌 呼吸道及泌尿路的医院内感染 肠杆菌属 产气肠杆菌 欧文菌属 草原欧文菌 植物病原 沙雷菌属 粘液沙雷菌 呼吸道及尿路的医院内感染 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 胃肠炎 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 肠道及肠道外感染 变形杆菌属 普通变形杆菌 普罗非登菌属 雷极普罗非登菌 尿路及灼伤感染或其他医院内感染 摩根菌属 摩根菌 耶尔森菌属 鼠疫耶尔森菌 鼠疫 小肠结肠鼠疫耶尔森菌 肠炎 主要的肠道感染细菌主要的肠道感染细菌 致病性肠道杆菌:沙门菌属;致病性肠道杆菌:沙门菌属;志贺菌属;志贺菌属;局部埃希菌属。局部埃希菌属。条件致病
3、性肠道杆菌:局部埃希菌属;条件致病性肠道杆菌:局部埃希菌属;变形杆菌属;变形杆菌属;克雷伯杆菌属。克雷伯杆菌属。乳糖发酵试验乳糖发酵试验 共同特性:共同特性:1、相似的形态染色、相似的形态染色 2、简单的培养条件、简单的培养条件 3、活泼的生化反响、活泼的生化反响 重要试验重要试验 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌肠道致病菌 肠道非致病菌肠道非致病菌 多数多数不发酵不发酵乳糖乳糖 多数多数发酵发酵乳糖乳糖 4、抗原构造、抗原构造复杂复杂 鞭毛抗原H 菌体抗原O K或Vi抗原 还有:还有:多种菌毛抗原多种菌毛抗原 共同抗原共同抗原 5、抵抗力:、抵抗力
4、:不强 6、易变异:、易变异:溶源性转换溶源性转换 生化反响性变异生化反响性变异 通过 引起 耐药性变异耐药性变异 毒力性变异毒力性变异 转导转导 接合接合 第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 (Escherichia)包括包括6种菌,以大肠杆菌最常见。种菌,以大肠杆菌最常见。大肠埃希菌大肠埃希菌(E.coli)正常菌群、条件致病菌、致病菌、环卫和食品卫生正常菌群、条件致病菌、致病菌、环卫和食品卫生 的检测指标。的检测指标。一、生物学特性:一、生物学特性:1、形态与染色:、形态与染色:2、培养特性:、培养特性:3、生化反响:活泼,能酵解多种糖、生化反响:活泼,能酵解多种糖(乳糖乳糖)类产酸类产酸
5、产气,产气,IMViC实验为实验为:+、+、-、-S-S平板平板:形成红色菌落形成红色菌落 S-S平板培养结果平板培养结果 4、抗原构造:复杂 大肠杆菌主要有O、H、K三种抗原 血清学的排列方式按:O:K:H 5、抵抗力:较弱,胆盐、亚硝酸盐、煌绿对其有 抑制作用。二、致病性 一致病物质 粘附素、外毒素。二所致疾病二所致疾病 1、肠道外感染、肠道外感染 败血症、新生儿脑膜炎、泌尿道感染。败血症、新生儿脑膜炎、泌尿道感染。2、胃肠炎肠道内感染、胃肠炎肠道内感染 1肠产毒型大肠埃希菌肠产毒型大肠埃希菌ETEC A.大肠杆菌肠毒素大肠杆菌肠毒素(enterotoxin)a.不耐热肠毒素不耐热肠毒素l
6、abile enterotoxin,LT:对热不稳定,对热不稳定,65。C 30 min 失活失活,与霍乱与霍乱 肠毒素有共同抗原肠毒素有共同抗原75%分分 LT-和和LT-LT-组成组成:B亚单位:亚单位:受体受体GM1 A2:与:与B亚单位结合亚单位结合 A 1:毒素的活性局部:毒素的活性局部 作用机制:作用机制:B识别受体,识别受体,A 进入细胞,进入细胞,A 1激活腺苷酸环化酶,激活腺苷酸环化酶,ATP 转化转化cAMP,导致小肠液分泌过度,超过重,导致小肠液分泌过度,超过重 吸收能力,引起剧烈腹泻。吸收能力,引起剧烈腹泻。A亚单位:亚单位:b.耐热肠毒素耐热肠毒素stable ent
7、erotoxin,ST:ST分分STa和和STb两型,两型,STa与人类疾病有关。与人类疾病有关。ST是通过激活鸟苷酸环化酶,使是通过激活鸟苷酸环化酶,使GTP转化为转化为 cGMP,导致小肠液吸收减少而腹泻。,导致小肠液吸收减少而腹泻。B.定居因子定居因子colonization factor,粘附素:粘附素:一种特殊的菌毛一种特殊的菌毛 2肠侵袭型大肠埃希菌肠侵袭型大肠埃希菌EIEC 侵犯较大儿童和成人,病症类似菌痢。侵犯较大儿童和成人,病症类似菌痢。侵袭力与含编码侵袭性侵袭力与含编码侵袭性 pINV 基因的一种基因的一种 大质粒大质粒120140MD有关。有关。3肠致病型大肠埃希菌肠致病
8、型大肠埃希菌EPEC 婴幼儿腹泻的主要病原菌,病菌在小肠粘婴幼儿腹泻的主要病原菌,病菌在小肠粘 膜外表大量繁殖,致细胞结构破坏,导致膜外表大量繁殖,致细胞结构破坏,导致 严重腹泻。严重腹泻。步骤:步骤:1.Bfp介导菌与细胞的疏松粘附介导菌与细胞的疏松粘附 2.信号传递,信号传递,eaeA基因活化基因活化 3.紧密粘附素介导菌与细胞的紧密结合。紧密粘附素介导菌与细胞的紧密结合。4肠出血型大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌 EHEC 致病因子:致病因子:Vero毒素毒素 紧密粘附素紧密粘附素 所致疾病:病症轻重不一,严重者并发溶血性所致疾病:病症轻重不一,严重者并发溶血性 尿毒综合征尿毒综合征(HUS
9、),死亡率,死亡率10%。5肠集聚型大肠埃希菌肠集聚型大肠埃希菌EAEC 婴幼儿持续性腹泻婴幼儿持续性腹泻 毒素为肠集聚耐热毒素毒素为肠集聚耐热毒素EAST 三、微生物学检查三、微生物学检查 一细菌的别离鉴定一细菌的别离鉴定 1、标本:、标本:肠道外感染肠道外感染 中段尿、血液、脓液、中段尿、血液、脓液、脑积液等脑积液等 肠道感染肠道感染 粪便粪便 2、别离培养与鉴定:、别离培养与鉴定:菌株 作用部位 所致疾病 致病机理 ETEC 小肠 旅行者腹泻 婴幼儿腹泻 ST、LT EPEC 小肠 婴儿腹泻 粘附和破坏上皮细胞 EIEC 大肠 痢疾样腹泻 侵袭和破坏 结肠粘膜上皮细胞 EHEC 大肠 出
10、血性结肠炎 Vero 毒素 致病性大肠杆菌引起的腹泻致病性大肠杆菌引起的腹泻 EAEC 小肠 婴儿持续型腹泻 侵袭和毒素 四、防治原那么四、防治原那么 菌毛疫苗在家畜已成功菌毛疫苗在家畜已成功 高卫生标准高卫生标准 防止水防止水ETEC、肉类和牛奶、肉类和牛奶EHEC的污染的污染 耐药普遍,根据药敏结果选用药物耐药普遍,根据药敏结果选用药物 在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染的检测指标在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染的检测指标 3 3个大肠菌群个大肠菌群/1L饮水饮水 100100个个细菌总数细菌总数/1ml饮水饮水 卫生学指标卫生学指标 大肠菌群指数大肠菌群指数 每每1000ml水
11、中大肠菌群数水中大肠菌群数 我国饮用水卫生标准:我国饮用水卫生标准:细菌总数细菌总数 每每1ml或或1g样品中细菌总数样品中细菌总数 在分子生物学和基因工程实验中在分子生物学和基因工程实验中,大肠杆菌大肠杆菌 也是重要的实验材料和研究对象也是重要的实验材料和研究对象 重要的实验材料和研究对象重要的实验材料和研究对象 志贺菌属志贺菌属Shigella 通称痢疾杆菌,包括通称痢疾杆菌,包括4群,近群,近50种血清型。年种血清型。年 病例病例2亿,死亡达亿,死亡达65万例。发病前万例。发病前5,死亡前十,死亡前十 一、生物学特性一、生物学特性 1、形态与染色:、形态与染色:G-中等大小杆菌,无芽胞,
12、中等大小杆菌,无芽胞,无荚膜,无鞭毛,有菌毛无荚膜,无鞭毛,有菌毛 2、培养特性:、培养特性:S-S平板上无色、透明菌落平板上无色、透明菌落 3、生化反响:不发酵乳糖、生化反响:不发酵乳糖 宋内志贺菌能缓慢发酵乳糖宋内志贺菌能缓慢发酵乳糖 4、抗原构造与分类:、抗原构造与分类:该菌有该菌有O 和和K 两种两种Ag,据据O抗原可将该菌分为抗原可将该菌分为4群、群、50个血清型。个血清型。A群:群:痢疾志贺菌,有痢疾志贺菌,有10个血清型个血清型 B群:群:福氏志贺菌,有福氏志贺菌,有13个血清型个血清型 C群:群:鲍氏志贺菌,有鲍氏志贺菌,有18个血清型个血清型 D群群:宋内志贺菌,只有宋内志贺
13、菌,只有1个血清型个血清型 我国以我国以福氏福氏多见,其次是多见,其次是宋内宋内 双糖铁培养基和动力实验结果双糖铁培养基和动力实验结果 A.大肠埃希菌大肠埃希菌 B.志贺菌志贺菌 C.阴性对照阴性对照 二、致病性二、致病性 一致病物质:一致病物质:1、侵袭力:菌毛能粘附于回肠末端和结、侵袭力:菌毛能粘附于回肠末端和结 肠的上皮细胞,穿入固有层生长繁殖,引肠的上皮细胞,穿入固有层生长繁殖,引 起炎症。入血罕见起炎症。入血罕见 2、内毒素、内毒素(endotoxin):作用于肠壁,使:作用于肠壁,使 其通其通 透性增高,促进内毒素的吸收;破坏肠粘膜,透性增高,促进内毒素的吸收;破坏肠粘膜,形成炎症
14、、溃疡,呈现典型的脓血粘液便;形成炎症、溃疡,呈现典型的脓血粘液便;作用于肠壁植物神经,使肠蠕动共济失调,作用于肠壁植物神经,使肠蠕动共济失调,肠功能紊乱。肠功能紊乱。3、外毒素:志贺毒素、外毒素:志贺毒素shiga toxin,Stx 一个一个A亚单位与亚单位与5个个B亚单位构成,亚单位构成,A亚单位亚单位 可裂解可裂解60S核糖体亚单位的核糖体亚单位的28S rRNA,致使蛋,致使蛋 白质合成中断,肠上皮细胞损伤。白质合成中断,肠上皮细胞损伤。1、侵袭力、侵袭力:菌毛菌毛有利于菌粘附至肠粘膜有利于菌粘附至肠粘膜 2、毒、毒 素素:加重局部和全身病症加重局部和全身病症 内毒素内毒素 作用于肠
15、壁作用于肠壁 通透性增加通透性增加 粘膜炎症、粘膜炎症、溃疡溃疡 局部局部 全身全身 内毒素血症内毒素血症 外毒素外毒素A群群1型型 与内毒素协同作用与内毒素协同作用 里急后重里急后重 二所致疾病二所致疾病 痢疾志贺菌感染病情一般较重,宋内志贺菌多痢疾志贺菌感染病情一般较重,宋内志贺菌多 引起轻型感染,福氏志贺菌感染易转为慢性。引起轻型感染,福氏志贺菌感染易转为慢性。1、急性菌痢、急性菌痢(acute bacterial dysetery):常有:常有发发 热、腹痛、里急后重、粘液脓血便等典型热、腹痛、里急后重、粘液脓血便等典型 病症。病症。中毒性菌痢中毒性菌痢(toxic bacterial
16、 dysetery):以小儿:以小儿 为多见,无明显消化道病症,全身中毒病症明为多见,无明显消化道病症,全身中毒病症明 显,死亡率高。显,死亡率高。2、慢性菌痢、慢性菌痢(chronic bacterial dysetery):10%-20%急性菌痢患者可转为慢性,病症常不典急性菌痢患者可转为慢性,病症常不典 型,易误诊。型,易误诊。临床表现临床表现 急性细菌性痢疾急性细菌性痢疾 急性典型:发热、腹痛、脓血粘液便急性典型:发热、腹痛、脓血粘液便 急性急性非非典型:小儿典型:小儿中毒型中毒型 成人成人易误漏诊易误漏诊 慢性细菌性痢疾慢性细菌性痢疾:病程迁移二月以上:病程迁移二月以上 三、免疫性三、免疫性 以消化道粘膜外表的以消化道粘膜外表的SIgA为主。病后免疫期短。为主。病后免疫期短。四、微生物学检查四、微生物学检查 1.细菌的别离鉴定:细菌的别离鉴定:取脓血粘液便及时送检或保存于甘油缓冲盐水中。取脓血粘液便及时送检或保存于甘油缓冲盐水中。脓血粘液便脓血粘液便 S-S平板平板 鉴定鉴定 生化反响生化反响 血清学鉴定血清学鉴定 2.快速诊断法:快速诊断法:荧光菌球法;荧光菌球法;协同凝集