1、DB32/T3762.7-20206.1.2进入P2实验室,检查垃圾袋、纸巾、Tp头、冻存管、冻存盒、EP管、封口膜、标签笔、一次性乳胶于套、核酸提取试剂数量,不足时应及时补充。6.1.3在生安柜内铺一次性软吸收垫:在垃圾缸内放置垃圾袋,倒少量含氯消毒剂。6.2负压P2实验过程中6.2.1应在生安柜内两人同时操作。6.2.2取出待检样本,在生安柜内打开密封袋,核对送检单,在样本管上标记,注明采样地点、日期、样本类型等。若管壁外有不明液体,应用有效氯消毒剂擦拭。6.2.3暂不检测样本放转运冻存盒,预留待检测样本放置位置。6.2.4对于未分装拭子样本需进行分装,分装于2L带螺旋盖内有垫圈冻存管。所
2、有样本旋紧管盖后需用封口膜密封。6.2.5废弃Tp头打入含氯消毒剂的废液缸中,注意需浸入液体中。6.2.6将核酸提取试剂槽样本孔(第一孔)中的裂解液吸出至1.5mLEP管中,每管加入20uL用于病毒DNA/RNA提取的蛋白酶K和20OuL样本,在涡旋器上充分振荡混匀后室温孵育1Omin。6.2.7将EP管置于离心机中短暂离心(12000rpm10min),离心完成后将EP管中裂解后的样本吸回至核酸提取试剂槽的样本孔(第一孔)中。6.2.8将试剂槽加套管置入全自动核酸提取仪中进行核酸提取。6.2.9剩余样本旋紧管盖后需用封口膜密封,放入样本转运盒。6.2.10取出提取好的核酸,转入1.5mLEP
3、管,注明采样地点、日期、样本类型等。6.2.11将核酸管放入核酸转运盒,连同样本转运盒进行盒内外消毒后转出生安柜。6.3负压P2实验结束后6.3.1生安柜内清场:使用后的核酸提取条板放入垃圾袋,包扎垃圾袋,含氯消毒剂喷洒消毒外表面,将一次性软吸收垫喷洒含氯消毒剂后折叠。于消毒后将垃圾袋和一次性软吸收垫一起带出生安柜放入核心区中号垃圾袋。6.3.2试管架,试验台面、移液器等喷洒含氯消毒剂消毒后用75%乙醇擦拭。6.3.3关闭生安柜,厂启紫外消毒。6.3.4消毒反穿衣、脱一次件反穿衣放入中号垃圾袋,包扎垃圾袋。消毒垃圾袋外表面、核酸和样本转运盒。6.3.5退出核心区,将中号垃圾装水入缓冲大号垃圾袋内。6.3.6每日固定时间对核心区进行过氧化冬末洲毒,消毒前应以塑料袋覆盖机器如核酸提取仪、离心机等,记录终末消毒记录。6.3.7在缓冲区按合理程序脱卸个人防护用品。脱内层乐会前开启核心间紫外。6.3.8出缓冲区,将垃圾袋放入高灭菌器高压,并灵6.3.9开启缓冲区紫外消毒。6.3.10将核酸交核酸检测人员。样本转入病毒样本专用专人保管冰箱6.4扩增体系配制与扩增按照DB32/T3762.3-2020第8章的要求。6.5结果判定按照DB32/T3762.3-2020中9.3的要求。3