1、DB37/T34202018混合型饲料添加剂中雌二醇的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了混合型饲料添加剂中雌二醇含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于不含无机载体的混合型饲料添加剂以饲料原料稻壳粉、玉米皮、葡萄糖、玉米淀粉、玉米芯粉以及多种饲料原料混合物（包括稻壳粉、玉米皮、葡萄糖、玉米淀粉、玉米芯粉、桔梗、甘草、白术、赤药、知母、茯苓等混合)为载体)中雌二醇的测定。本标准的检出限为0.5mg/kg,定量限为1.0mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于
2、本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中雌二醇用乙腈溶液提取，经固相萃取柱净化后，上高效液相色谱仪测定，外标法定量。4试剂或材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1乙睛：色谱纯。4.2甲醇：色谱纯。4.3雌二醇标准品：CAS号：50-28-2。雕醇含量98.5%。4.45%甲醇溶液：准确量取5mL甲醇(4.2)，月水稀释至100mL。4.5乙腈水溶液：乙腈+水=4+6，V+V。4.6雌二醇标准贮备溶液：称取雌二醇标准品(4.3)10g(精确至0.0001g),置于10mL容量瓶中，用甲醇(4.
3、2)定容，配成浓度为1mg/L的标准贮备溶液。28保存，有效期6个月。4.7雌二醇标准工作溶液：准确移取雌二醇标准贮备溶液(4.6)1mL置了10mL容量瓶中，用甲醇(4.2)定容至刻度。该溶液雌二醇的浓度为100g/mL。28保存，有效期3个月。4.8雌二醇标准系列溶液：准确移取雌二醇标准工作溶液(4.7)适量，用乙腈水溶液(4.5)稀释成浓度分别为0.50g/mL、1.00g/mL、2.00g/mL、5.00g/mL、10.0045/mL、20.00g/mL的标准系列溶液。现用现配。4.9固相萃取柱：HLB固相萃取柱(60mg/3mL),或其它等效柱。4.10微孔滤膜：0.22m,有机相。1
