1、DB44/T2024-20174.2培养基播种育苗4.2.1设备与操作流程按LY/1882执行。4.2.2无菌试管内播种采用4.1.1的方法处理的种子经阴干后转至超净台上，先用75%酒精浸泡1mim,用无菌水冲洗1次，然后转入5%NaC1O溶液中灭菌15min,用无菌水冲洗5次，均匀播入MS基本培养基中，各营养成分参照附录A。每瓶播种量0.02g左右。培养的环境条件是：适宜温度为2528，光照强度为1500Lx2000Lx,光照时间每天12h。其它条件按LYT1882执行。4.3芽苗培育芽苗培育程序如下：a)播种后7d左右种子开始萌发，芽长至1.0cm1.5cm时即转入新的壮苗培养基进行生根壮
2、苗、20株/瓶，培养基各成分参照附录A,培养温度、光照强度、光照时间按4.2执行。b)培养20d后，芽苗根系发达，苗高可达3cm左右，此时移到温室进行炼苗，炼苗光照强度控制在50001，x一10000Lx,炼苗时间7d10d。出瓶移植前】d一2d,适当松开培养瓶的盖子，使瓶苗逐步适应适度小的自然环境。c)炼苗7d后即可移入容器袋培养。5组培育苗5.1外植体准备采用经过选择的优树，或经省级以上良种认定的优良繁殖材料作为采集外植体的母株。对母株进行基部促萌，以萌枝为外必，或采集母株枝条嫁接到黄梁木小苗砧木上，以接穗萌枝为外植体。5.2外植体采集在生长旺盛的5月11月采集。采快，先甲杀菌剂每周喷淋植
3、株-次，连续3次一4次。选择连续晴天3d5d以上的天气，采集半木质化健康忙年，为外植体保湿带回实验室，剪去叶片（留2cm叶柄），用保鲜袋密封置4冰箱备用。5.3外植体消毒用无菌水将外植体洗净。在超净工作台上，用75%酒精消毒1，无艺水冲洗一次。再用添加数滴吐温-80的1%的氯化汞溶液消海，依据幼嫩程度消毒8min一20min,最：3无菌水冲洗4次5次，每次2min-3min5.4腋芽诱导培养将消毒后的外植体切成含有1个2个叶腋的枝段，接入腋芽诱导培养基，每瓶培养基接1个外植体。诱导培养基参照附录B。腋芽诱导适宜温度为2428，光照强度1500Lx2000Lx,光照时间每天12h:其它条件按LYT1882执行。5.5增殖培养25
