收藏 分享(赏)

提取细胞全蛋白操作方法.docx

上传人:la****1 文档编号:99832 上传时间:2023-02-24 格式:DOCX 页数:1 大小:12.82KB
下载 相关 举报
提取细胞全蛋白操作方法.docx_第1页
第1页 / 共1页
亲,该文档总共1页,全部预览完了,如果喜欢就下载吧!
资源描述

细胞全蛋白提取步骤吸取培养基,预冷PBS清洗细胞三次,细胞刮刮脱细胞,收集至离心管,1000rpm离心5分钟。洗涤后的细胞转移至洁净EP管,冰上操作,配制细胞裂解液,1ml Lysis,Buffer中加入10 l磷酸酶抑制剂、1 l蛋白酶抑制剂、5l 100mM的PMSF。混匀后冰上保存数分钟待用。在洗涤好的细胞中按照每107个细胞加入1ml细胞裂解液的比例,加入细胞裂解液。200l移液器反复吹打,至蛋白析出。4摇床,温和振摇15分钟。14000rpm,4离心15分钟,上清即为细胞全蛋白提取物。BCA法测蛋白浓度。蛋白分装后保存于-70冰箱,避免反复冻融。提取细胞全蛋白整个过程中所有使用的物品及试剂均需预冷,防止蛋白降解。

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索

当前位置:首页 > 专业资料 > 医药卫生

copyright@ 2008-2023 wnwk.com网站版权所有

经营许可证编号:浙ICP备2024059924号-2