1、化学原料药质量研究化学原料药质量研究 及原始记录常见问题讨论及原始记录常见问题讨论 余立余立 特性研究特性研究-理化、稳定性理化、稳定性 对照品研究对照品研究-标化、校正因子标化、校正因子 方法研究方法研究-建立、验证建立、验证 原料药研究的特点原料药研究的特点 杂质研究杂质研究-工艺、残留溶剂工艺、残留溶剂 1 4 3 2 其他参考资料其他参考资料 化学药物杂质研究的技术指导原则化学药物杂质研究的技术指导原则 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则 建立标准时要考虑的问题建立标准时要考虑的问题 2008 2007 2006 2005 2004 200
2、3 2002 2001 2000 常见研究误区以及供参常见研究误区以及供参考的经验和体会考的经验和体会 新版药典动态对化学原新版药典动态对化学原料药质量研究的影响料药质量研究的影响 研发原始记录中常见问研发原始记录中常见问题及改进建议题及改进建议 主要讨论内容主要讨论内容 Page 5 碘值、皂化值、酸值碘值、皂化值、酸值 折光率折光率 比旋度比旋度 熔点熔点 相对密度相对密度 馏程馏程 吸收系数吸收系数 黏度黏度 凝点凝点 物理常数研究物理常数研究 吸收系数吸收系数 新药尽可能详细、全面、规范新药尽可能详细、全面、规范 注意测定方法的准确性注意测定方法的准确性 实验样品的纯度实验样品的纯度
3、SOPSOP、温度校正、仪器台间差、温度校正、仪器台间差 实验环境的温湿度并实验环境的温湿度并记录！记录！仿制药与文献核对一致性仿制药与文献核对一致性 物理常数研究物理常数研究 吸收系数吸收系数 物理意义为当溶液浓度为物理意义为当溶液浓度为1%1%（g/mlg/ml）,液液层厚度为层厚度为1cm1cm时的吸光度数值。时的吸光度数值。研究意义及应用趋势的改变研究意义及应用趋势的改变 原始记录问题原始记录问题 Page 8 干燥失重干燥失重 重金属重金属 溶液的澄清度溶液的澄清度 硫酸盐硫酸盐 酸碱度酸碱度 氯化物氯化物 水分水分 铵盐铵盐 结晶性结晶性 一般检查项研究一般检查项研究 药典变化提示
4、药典变化提示 pHpH测定法：测定法：氢氧化钙标准缓冲液氢氧化钙标准缓冲液 是要用是要用2525时取饱和溶液的上清液，所以临用时需核时取饱和溶液的上清液，所以临用时需核对温度才能取用上清液！）对温度才能取用上清液！）纯化水：取本品纯化水：取本品100100mlml，加饱和氯化钾溶液加饱和氯化钾溶液0 0.3 3mlml。极弱电解质品种的极弱电解质品种的pHpH值测定可采用相同的测定方法值测定可采用相同的测定方法 药典附录通用检测方法变化提示药典附录通用检测方法变化提示 重金属检查法：重金属检查法：甲管（标准）乙管（供试品）甲管（标准）乙管（供试品）+丙管（标准丙管（标准+供试品）供试品）如丙管
5、颜色浅于甲管则将一法改为二法进行检查如丙管颜色浅于甲管则将一法改为二法进行检查 勘误！第二法规定乙管（标准）中显出的颜色勘误！第二法规定乙管（标准）中显出的颜色与甲管（供试品）比较，不得更深。与甲管（供试品）比较，不得更深。药典附录通用检测方法的使用药典附录通用检测方法的使用 氯化物氯化物 5.0ml5.0ml 常用常用 硫酸盐硫酸盐 2.0ml2.0ml 检查法检查法 铵盐铵盐 2.0ml2.0ml 铁盐铁盐 1.0ml1.0ml 注意标准液的取用量！注意标准液的取用量！应保证灵敏检测的需要！应保证灵敏检测的需要！建议：必要时改用仪器法判断建议：必要时改用仪器法判断 Click to edi
6、t title style 杂质控制杂质控制 微粒控制微粒控制 安全性安全性 控制控制 注射剂所用的原辅料应从注射剂所用的原辅料应从来源及工来源及工艺等艺等生产环节进行严格控制并应符生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求。合注射用的质量要求。标准标准 增项增项 杂质谱的比较杂质谱的比较 供注射用原料质控重点供注射用原料质控重点 应在制剂申报资料中体现！应在制剂申报资料中体现！杂质控制力度大幅度提高杂质控制力度大幅度提高 未修订品种未修订品种 有关物质有关物质（常规）（常规）增项增项 增指标增指标 严限度严限度 改方法改方法 TLCHPLC 等度等度 梯度梯度 理论板数理论板数 分离度分离
7、度 特定杂质特定杂质 增订单列项增订单列项 盐酸阿糖胞苷盐酸阿糖胞苷 项目项目 20052005年版年版 20102010年版年版 含量限度含量限度 97.097.0103.0103.0 98.0%98.0%102.0%102.0%鉴别鉴别 3 3项项 3 3+1+1项（项（+HPLC+HPLC）检查检查 干燥失重干燥失重 干燥失重干燥失重 -溶液的澄清度与颜色溶液的澄清度与颜色 -含氯量含氯量 -有关物质有关物质 梯度、校正、梯度、校正、3 3个特定杂质个特定杂质 -残留溶剂残留溶剂 -炽灼残渣和重金属炽灼残渣和重金属 含量测定含量测定 UVUV吸收系数法吸收系数法 HPLCHPLC外标法外
8、标法 *性状项下还有熔点和比旋度项性状项下还有熔点和比旋度项，第一次飞跃第一次飞跃 第二次飞跃第二次飞跃 纯度控制纯度控制 杂质控制杂质控制 杂质谱杂质谱 控制控制 有关物质的研究有关物质的研究 杂质质控理念的变迁杂质质控理念的变迁 杂质谱的定义杂质谱的定义 Impurity Profile（杂质谱杂质谱）:A description of the identified and unidentified impurities present in a drug substance.对存在于药品中所有已知杂质和未知杂质对存在于药品中所有已知杂质和未知杂质的总的描述。的总的描述。已鉴定杂质已鉴定杂
9、质 Identified Impurity 特定杂质特定杂质 Specified Impurity 潜在杂质潜在杂质 Potential Impurity 杂质谱杂质谱 Impurity Profile 已确证了已确证了结构特征结构特征的杂质的杂质 在质量标准中在质量标准中规定检查并有规定检查并有自己限度标准自己限度标准的杂质。已鉴的杂质。已鉴定或未鉴定定或未鉴定 理论推测在理论推测在生产或贮藏生产或贮藏过程中可能过程中可能产生的杂质产生的杂质实际产品中实际产品中不一定存在不一定存在 存在于药存在于药品中的所品中的所有杂质组有杂质组成或模式成或模式 Click to edit title st
10、yle 选择最优选择最优 多种互补多种互补 结构确证结构确证 比较杂质的比较杂质的数数与与量量，一致或基本一致，一致或基本一致，物质基础相同决定可否桥接已上市药品物质基础相同决定可否桥接已上市药品的安全有效性结果的安全有效性结果 杂质谱杂质谱 比较比较 杂质谱的比较杂质谱的比较 项目项目 原研厂标准原研厂标准 拟定标准拟定标准 EP7.0EP7.0 USP34USP34 JP15JP15 含量限度 按干燥品计算，每1mg的效价不得少于150单位 按干燥品计算，每1mg的效价不得少于150单位 按干燥品计算，每1mg效价不得少于150I.U.（非口服制剂），每1mg效价不得少于120I.U.（口
11、服制剂 按干燥品计算，每1mg中效价不得少于180USP 肝素单位 每1mg的效价不得少于110单位。性状 白色或类白色的粉末，有引湿性 白色或类白色的粉末，极具引湿性 白色或几乎白色的粉末，有适度的引湿性 白色到灰棕色的粉末或颗粒 溶解度 在水中易溶 在水中易溶，在乙醚中不溶 在水中易溶 在水中溶解，在乙醚中不溶 比旋度 不小于+35(40mg/ml,水)应不小于+50(40mg/ml,水)鉴别 1、电泳法 2、钠盐 1、电泳法 2、钠盐 A、具有抗凝血作用 B、比旋度 C、电泳法：D.钠盐 A、H-NMR B、IC法 C、抗Xa/抗IIa：D、钠盐 酸碱度 5.07.5（0.10g到10m
12、l水）5.07.5（0.10g到10ml水）5.58.0（0.10g到10ml水）5.07.5（0.10g到10ml水）6.08.0 新方法新方法 分析方法的有效性（氨苄西林钠分析方法的有效性（氨苄西林钠/舒巴坦钠）舒巴坦钠）原方法原方法 中国抗生素杂志，中国抗生素杂志，2009，34：734 在对各国药典方法比较的基础上确定分析方法 杂质谱的比较多种互补杂质谱的比较多种互补 不同色谱系统（流动相、色谱柱、波长）不同色谱系统（流动相、色谱柱、波长）不同检测器（不同检测器（uv、DAD）不同原理的方法不同原理的方法 -分离或检测分离或检测 新杂质的研究新杂质的研究 药物杂质的可能来源药物杂质的可
13、能来源 1.原料：原料：红霉素红霉素 A、红霉素、红霉素 B、红霉素、红霉素 C、红霉素、红霉素D、红霉素、红霉素 E、红霉素、红霉素 F、阿奇霉素阿奇霉素B、阿奇霉素、阿奇霉素C、阿奇霉素、阿奇霉素E、阿奇霉素、阿奇霉素F 2.中间体：中间体：红霉素红霉素A肟（肟（Z）、）、6，9-亚胺醚、氮红霉素亚胺醚、氮红霉素A、红霉素、红霉素A肟（肟（E）、红）、红霉素霉素 C肟（肟（E）、）、9，11-亚胺醚、红霉素亚胺醚、红霉素C 6，9-亚胺醚、红霉素亚胺醚、红霉素A内酰胺内酰胺 3.副产物：副产物：红霉素红霉素-N-氧化物、氧化物、N-去甲基红霉素去甲基红霉素A、N-去甲基阿奇霉素去甲基阿奇霉
14、素A、氨基阿奇霉素氨基阿奇霉素A、N-甲酰基甲酰基-N去甲基阿奇霉素去甲基阿奇霉素A、N-去甲基去甲基-N-苯磺酰基阿奇苯磺酰基阿奇 霉素、阿奇霉素霉素、阿奇霉素N-氧化物、氧化物、3-去（二甲氨基）去（二甲氨基）-3,4-去氢阿奇霉素、去氢阿奇霉素、O-甲苯甲苯 磺酰基红霉素肟、红霉素磺酰基红霉素肟、红霉素Z肟重排物、氮红霉素肟重排物、氮红霉素11，12-硼酸酯、硼酸酯、N，N-去去 二甲基二甲基N-甲酰基阿奇霉素甲酰基阿奇霉素A、丙基阿奇霉素、丙基阿奇霉素、3-N，N-去二甲基氨基去二甲基氨基-酮酮 基阿奇霉素基阿奇霉素A、阿奇霉素、阿奇霉素11，12-硼酸酯硼酸酯 4.降解产物：降解产物
15、：去克拉克定糖阿奇霉素去克拉克定糖阿奇霉素A、去克拉克定糖氮红霉素、红霉素、去克拉克定糖氮红霉素、红霉素8，9-脱水脱水-6，9-半缩酮、红霉素半缩酮、红霉素6，9：9，12-螺缩酮螺缩酮 阿奇霉素中可能存在的杂质：阿奇霉素中可能存在的杂质：37种种 Company Logo 结构确证常用的方法 热分析热分析 粉末衍射粉末衍射 核磁核磁 元素分析元素分析 质谱质谱 紫外紫外 红外红外 杂质谱的比较杂质谱的比较 平行列表、逐峰比较平行列表、逐峰比较 新杂质个数新杂质个数 单一新杂质量（单一新杂质量（0.1%）新杂质总量所占比例（新杂质总量所占比例（2.0%）毒性快速评价平台 斑马鱼斑马鱼毒性快速
16、评价平台，对杂质的胚胎毒性、神经毒性，心脏毒性等进行评价。优点：优点：杂质用量少杂质用量少 无需知道杂质结构无需知道杂质结构 实验周期短实验周期短（34天一个周期）天一个周期）药物耳毒性检测药物耳毒性检测 利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。存活状态，来判断检测物的耳毒性。下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少，黄色圈示给下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少，黄色圈示给药后药后1神经丘消失。神经丘消失。给药后给药后 系统对照组系统对照组（正常幼体）（正常幼体）原始记录中常见问题原始记录中常见问题 溶剂的选择无依据：溶剂的选择无依据：溶液稳定性考察溶液稳定性考察 -溶解度高且稳定溶解度高且稳定 8小时不需提示小时不需提示 4小时提示临用现配或立即进样小时提示临用现配或立即进样 2小时改换溶剂小时改换溶剂 -无背景干扰或小无背景干扰或小 溶剂峰、倒峰溶剂峰、倒峰 -低毒价廉低毒价廉 检出杂质的数与量检出杂质的数与量
