1、中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J Diabetes，January 2023，Vol.31，No.1 糖尿病分子生物学和遗传学 2型糖尿病患者外周血hsa_circ_0071336表达及临床意义的研究刘宇虹胡丽坤路亚柯董晶褚熙闫宇翔【摘要】目的探讨 T2DM 患者外周血 hsa_circ_0071336 表达及临床意义。方法选取 2017年 5 月至 2019 年 8 月于首都医科大学附属宣武医院就诊的 89 例新诊断 T2DM 患者（T2DM 组）、76例 IFG 患者（IFG 组）及 83 名同期体检健康者（NC 组），分析各组 hsa_circ_0071336 表达
2、水平与糖代谢指标的相关性。采用多元线性回归和 Logistic 回归分析 IR、T2DM 和 IFG 的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线评价 hsa_circ_0071336 对鉴别 T2DM 和 IFG 的程度。结果T2DM 组 BMI、腰高比、WC，SBP、DBP，FPG、HbA1c、FIns、TG、LDL-C，HOMA-IR、TyG、Mets-IR 高于 NC 组（P0.05），APN 低于 NC、IFG 组（P0.05）。Spearman 相关分析显示，hsa_circ_0071336 表达水平与 APN 呈正相关（P0.05），与 FPG、HbA1c、FIns 呈负相关（P0.
3、05）。多元线性回归分析和 Logistic 回归分析结果显示，hsa_circ_0071336 是 IR、T2DM 和 IFG 的影响因素，联合传统危险因素鉴别 T2DM 和 IFG 的ROC 曲线下面积为 0.865、0.743。结论T2DM 患者外周血 hsa_circ_0071336 表达降低，可作为T2DM 潜在生物标志物。【关键词】环状 RNA；糖尿病，2 型；空腹血糖受损；胰岛素抵抗doi：10.3969/j.issn.1006-6187.2023.01.003Expression and clinical significance of hsa_circ_0071336 in
4、peripheral blood of patients with type 2 diabetesmellitus LIU Yuhong，HU Likun，LU Yake，et al.School of Public Health，Capital Medical University，Beijing 100069，ChinaCorresponding author：YAN Yuxiang，Email：【Abstract】ObjectiveTo investigate the expression of hsa_circ_0071336 in patients with type 2diabet
5、es mellitus（T2DM）and evaluate its clinical significance.MethodsA total of 248 study subjectswere selected from the Health Management Center of Xuanwu Hospital from 2017 to 2019.The correlationbetween the expression level of hsa_circ_0071336 and glucose metabolism-related indexes was analyzed.Linearr
6、egression and logistic regression were used to explore whether hsa_circ_0071336 could be a risk factor forinsulin resistance（IR），T2DM and impaired fasting glucose（IFG）.Receiver operating characteristic curves（ROC）were used to evaluate the ability of hsa_circ_0071336 in distinguishing between T2DM an
7、d IFG.ResultsBMI，waist height ratio（WHtR），WC，SBP，DBP，FPG，HbA1c，FIns，TG，LDL-C，HOMA-IR，TyG，Mets IR were higher in T2DM group than in NC group（P0.05），and APN was lowerin T2DM group than in NC and IFG groups（P0.05）.Spearman correlation analysis showed that theexpression level of hsa_circ_0071336 was pos
8、itively correlated with APN（P0.05），and negatively correlatedwith FPG，HbA1c，and FIns（P0.05）.The results of multiple linear regression analysis and logisticregression analysis show that hsa_circ_0071336 is the influencing factor for IR，T2DM and IFG.Combiningtraditional risk factors，the area under the
9、ROC curve in identifying T2DM and IFG was 0.865 and 0.743respecitively.ConclusionThe level of hsa_circ_0071336 decreased in patients with T2DM，and could be基金项目：国家自然科学基金（81773511）作者单位：100069 北京，首都医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系（刘宇虹、胡丽坤、路亚柯、闫宇翔）；首都医科大学宣武医院健康管理中心（董晶、褚熙）通信作者：闫宇翔，Email： 7中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J
10、 Diabetes，January 2023，Vol.31，No.1a potential biomarker for T2DM.【Key words】circ RNA；Diabetes mellitus，type 2；Impaired fasting glucose；Insulin resistance截至 2021 年，全球成年 DM 患者为 5.37 亿，我国 DM 患者约 1.4 亿，其中 51.7%未确诊1。T2DM 占 DM 患者的 90%以上2。T2DM 患者均经历 DM 前期阶段，即 IFG 和 IGT，持续时间约10 年3。胰岛素信号通路与 IR、T2DM 的发生发展密切相关
11、4。随着生物信息学、基因测序发展，环状 RNA（circRNA）与多种疾病相关，在 DM 及其并发症中，circRNA 发挥重要作用5-6。有研究7分 析 T2DM 患 者 显 著 下 调 的 hsa_circ_0071336 是否参与胰岛素信号通路。本研究通过探讨 T2DM 患者外周血 hsa_circ_0071336 表达及临床意义，旨在为临床治疗提供依据。对象与方法一、研究对象选取 2017 年 5 月至 2019 年 8 月于首都医科大学附属宣武医院就诊的 89 例新诊断 T2DM 患者（T2DM 组）、76 例 IFG 患者（IFG 组）及 83 名同期体检健康者（NC 组）。T2D
12、M 与 IFG 诊断均符合 1999 年 WHO 糖尿病诊断标准，其中 T2DM符合 FPG7.0 mmol/L 或 2 hPG11.1 mmol/L，IFG 符合 6.1FPG7.0 mmol/L。本研究通过首都医科大学伦理委员会审核批准，所有研究对象均签署知情同意书。二、研究方法收集各组身高、体重、WC、BP 等，计算 BMI、腰高比（WHtR）。禁食 8 h 以上，于次日晨空腹抽取 肘 静 脉 血 5 ml，检 测 FPG、HbA1c、TG、TC、HDL-C、LDL-C。采用 ELISA 法检测 FIns、APN和瘦素（LEP）。稳态模型评估胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）FInsFPG
13、/22.5。IR 替代指标：甘油三酯葡萄糖指数（TyG）ln TGFPG/2，IR代谢评分（Mets-IR）ln （2FPG）+TG BMI/ln（HDL-C）。采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞，实时荧光定量 PCR 实验，以 b-actin 作为内参，2-ct计 算 hsa_circ_0071336 相 对 表 达 量。hsa_circ_0071336 引 物 序 列 上 游 5ACCTCCCTGCT-GATTTTTGCAT3，下游 5 TCATTCTGTCC-TCTGCTTGGC3。三、统计学处理采用 R 4.0.3 和 GraphPad Prism 7.0 软件进行统计学分析。正态分
14、布计量资料以 xs 表示，两组间比较采用独立样本 t 检验，多组间比较采用单因素方差分析。非正态分布计量资料以中位数及四分位间距 M（QL，QU）表示，采用秩和检验。计数资料以 n（%）表示，采用 2检验。Spearman 相关分析 hsa_circ_0071336 与各指标的相关性。多元线性回归分析 IR 的影响因素。Logistic 回归分析 T2DM 和 IFG 的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲 线 评 估 hsa_circ_0071336 对 T2DM 和IFG 的诊断性能。以 P0.05 为差异有统计学意义。结果一、各组一般资料及生化指标比较T2DM 组 BMI、WHtR、WC
15、、SBP、DBP、FPG、HbA1c、FIns、TG、LDL-C、HOMA-IR、TyG、Mets-IR 高于 NC 组（P0.05），APN 低于 NC、IFG 组（P0.05）。（表 1）二、各组 Hsa_circ_0071336 表达水平比较T2DM、IFG 组 hsa_circ_0071336 表达水平低于 NC 组，且 T2DM 组低于 IFG 组（P0.05）。（图 1）三、Spearman 相关分析 hsa_circ_0071336 与各指标的相关性Spearman 相关分析显示，hsa_circ_0071336 表达 水 平 与 APN 呈 正 相 关（P0.05），与 FPG
16、、HbA1c、FIns 呈负相关（P0.05）。（表 2）8中国糖尿病杂志2023年1月第31卷第1期Chin J Diabetes，January 2023，Vol.31，No.1表 1各组一般资料及生化指标比较 xs，M（QL，QU），n（%）Tab 1Comparison of general data and biochemical indexes among the three groups xs，M（QL，QU），n（%）组别GroupNCIFGT2DM例数（男/女）n（M/F）83（47/36）76（43/33）89（51/38）年龄（岁）Age（Years）51.279.6952.829.7052.338.81吸烟史Smoking9（10.8）8（10.5）11（12.4）饮酒史Drinking9（10.8）9（11.8）11（12.4）体育锻炼Exercises71（85.5）70（84.2）64（78.7）BMI（kg/m2）23.782.6025.353.1626.433.27*#WHtR0.480.050.510.050.530.05*#组别GroupNCIFG
