1、GB5413.10-2010食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素K,的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素K,的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素K,的测定。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。3原理用脂肪酶降解试样中的脂肪和不饱和脂肪酸,对于含淀粉试样需先用淀粉酶降解试样中的淀粉,经碱皂化后,用正己烷提取维生素K,。通过液相色谱法分离,柱后还原维生素K,荧光检测器检测,外标法定量。4试剂和材料除非另有规定,本方法所用试剂
2、均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。4.1氢氧化钠溶液(10mol/1):临用前配制。4.295%乙醇。4.3饱和氯化钠溶液,4.4正已烷:色谱纯。4.5无水硫酸钠。4.6甲醇:色谱纯。4.7二氯甲烷:色谱纯,4.8冰乙酸,4.9氯化锌,4.10无水乙酸钠。4.11流动相:甲醇(4.6)900mL,二氯甲烷(4.7)100mL,冰乙酸(4.8)0.3mL,氯化锌(4.9)1.5g,无水乙酸钠(4.10)0.5g,溶解后用0.45m滤膜过滤。4.12淀粉酶:酶活力1.5U/mg。4.13脂肪酶:酶活力700U/mg。4.14锌粉:粒度50m70m。4.15维生素K标准溶液:标准溶液浓度校正方法参见附录A。4.15.1维生素K,标准贮备液(2mg/mL):称取0.05g维生素K1标准品(精确到0.1mg),于25mL容量瓶中,用正己烷溶解定容。4.15.2维生素K标准中间液(20g/mL):取标准贮备液(4.15.1)1mL加正己烷定容至100mL。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪,带有荧光检测器。