1、GB/T19182-2003/1S010095:1992咖啡咖啡因含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定用高效液相色谱测定普通的和脱咖啡因的生咖啡和焙炒咖啡豆，以及普通的和脱咖啡因的咖啡抽提粉中的咖啡因含量的一种方法。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，数励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。1S01447:1978生咖啡一水分含量的测定（常规法）IS03726:1983速溶咖啡一在70C减压条件下减重
2、的测定IS04072袋装咖啡取样IS06670衬里箱装速溶咖啡取样IS06673:1983生咖啡一在105下减重的测定3原理将试料放入水中，加热至90，在有氧化镁存在的条件下，抽提咖啡因并过滤，然后用苯基改性二氧化硅微柱将全部抽提液纯化。使用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定其咖啡因含量。4试剂除非另有规定，只能使用确认的分析级试剂，以及蒸馏水或脱矿物质水或与之等效纯度的水。4.1甲醇，液相色谱级。4.2氨溶液(0.3mol/L):甲醇，90：10体积混合液。4.3洗提溶剂，纯化柱用，甲醇：水：乙酸，75：25：1体积混合液。4.4流动相，甲醇：水，30：70体积混合液。取600mL甲醇(4.1)倒入2L单标容量瓶内，加水至刻度，混合后混合液用孔径为0.45m过滤器过滤。4.5乙醇：水，1：4体积混合液。4.6氧化镁。4.7咖啡因储备液：相当于每升含0.5g咖啡因溶液。称取125mg咖啡因，精确至0.1mg,放入250L棕色玻璃容量瓶内，并用乙醇：水(4.5)加至半满，咖啡因溶解后，再加相同的乙醇：水混合液到刻度。该溶液在冰箱内可保存一个月。4.8咖啡因标准溶液A,相当于每升含0.010g咖啡因，用于脱咖啡因的产品。将储备液(4.7)加温至室温后，用吸移管(5.12)吸取2mL移入100mL单标容量瓶内，用水补充至刻度并摇匀。该溶液于当日配制使用。
