1、第一章 血液学一般(ybn)检验,第五节 血栓与止血(zh xu)一般检验,第一页，共四十九页。,第五节 血栓与止血(zh xu)一般检验,内 容 概述 一、出血时间测定 二、凝血酶原时间测定 三、血浆活化部分凝血活酶时间 四、血浆凝血酶时间 五、血浆纤维蛋白原测定 六、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定 七、血浆D-二聚体测定 八、出凝血检查(jinch)的临床应用,第二页，共四十九页。,概述(i sh),凝血机制(jzh),第三页，共四十九页。,4,概述(i sh),凝血与纤溶的关系(gun x),第四页，共四十九页。,2023/6/30,概述(i sh),出凝血障碍(zhng i)的因素,第
2、五页，共四十九页。,定义(dngy),出血(ch xi)时间（bleeding time，BT）是指在特定条件下，皮肤小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的时间称为出血时间。,一、出血(ch xi)时间测定,第六页，共四十九页。,（一）TBT法,1TBT（template bleeding time）原理 使用出血时间测定器在受检者前臂皮肤上造成一个标准切口，记录血液自行流出到自然(zrn)停止所需要的时间，即为出血时间（BT）。2主要器材 血压计、出血时间测定器、秒表。3简要操作 加压 消毒皮肤造成切口计时。,一、出血时间(shjin)测定,第七页，共四十九页。,（二）质量保证,1减少药物
3、的影响 检测前1周内不能服用抗血小板药物（如阿司匹林等），以免影响结果。2选择合适的测定器 不同年龄应该选择不同类型的出血时间测定器。新生儿型：切口(qi ku)为0.5mm2.5 mm。儿童型：切口为1.0mm3.5 mm。成人型：切口为1.0mm5.0 mm。,一、出血时间(shjin)测定,第八页，共四十九页。,（二）质量保证,3注意温度的影响 应在25左右的室内进行，以保证穿刺部位温度恒定。4选择正确穿刺部位 穿刺时应避开浅表静脉、疤痕、水肿和溃疡等处皮肤。5避免接触和挤压伤口(shngku)血液应自行流出，采用滤纸吸去流出的血液时，应避免与伤口接触，更不能挤压伤口。,一、出血时间(s
4、hjin)测定,第九页，共四十九页。,（三）方法学评价(pngji),一、出血时间(shjin)测定,第十页，共四十九页。,11,参考(cnko)区间及临床意义,（四）参考区间TBT：（6.92.1）分钟。（五）临床意义1BT延长(ynchng)主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。见于：血小板数量异常，如血小板减少症、原发性血小板增多症。血小板功能缺陷，如血小板无力症、巨大血小板综合征。某些凝血因子缺乏，如血管性血友病（vWD）、低（无）纤维蛋白原血症和DIC。2BT缩短主要见于某些严重的血栓性疾病。,一、出血(ch xi)时间测定,第十一页，共四十九页。,定义(dngy),凝血酶原时间（p
5、rothrombin time，PT）是在体外模拟体内外源性凝血的全部条件，从加入组织因子(ynz)开始到血浆凝固所需要的时间测。PT是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十二页，共四十九页。,PT原理(yunl),2023/6/30,第十三页，共四十九页。,（一）手工(shugng)法,1原理 采用Quick一步凝固法。37条件下，在待检血浆中加入足量的组织凝血活酶（含组织因子、磷脂）和适量的钙离子(lz)，通过激活因子而启动外源性凝血途径，使乏血小板血浆凝固。从加钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为凝血酶原时间。2简要操作 采血并分离血
6、浆加血浆与凝血活酶试剂（12）混匀并立即计时倾斜试管，观察结果。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十四页，共四十九页。,（二）质量保证,1病人准备 停用影响(yngxing)止凝血功能的药物至少1周。2采血 要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血，止血带使用时间不超过1分钟，采血要顺利，加血液至抗凝管后，应立即轻轻地颠倒混匀58次，避免标本溶血和凝固。创伤性或留置导管的血标本、溶血或凝块形成的标本、输液时同侧采集的标本均不宜做PT等止凝血试验。3标本运送 及时送检，因为血液离体后，凝血因子逐渐消耗，随着标本存放时间延长，消耗加快。4标本离心 按规定离心力与离心时间要求，及时分离标本
7、，获得乏血小板血浆。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十五页，共四十九页。,（二）质量保证,5组织凝血活酶（thromboplastin）的质量 必须使用标有国际敏感指数（international sensitivity index，ISI）的PT试剂。6ISI和国际标准化比值（international normalization ratio，INR）ISI值越接近1.0，表示灵敏度越高。ISI为组织凝血活酶参考品与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率，即在双对数的坐标纸上，纵坐标为用参考品测定的PT对数值，横坐标为用待标定的组织凝血活酶测定的相同(xin tn)标本PT对数值INR
8、计算公式为：INR（病人PT值/正常人平均PT值）ISIWHO等国际权威机构要求，每次（每批）PT测定的正常对照值，必须用至少来自20名以上男女各半的正常人混合血浆所测定的结果。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十六页，共四十九页。,（二）质量保证,7测定 试剂、标本温浴时间应控制在310分钟内，测定温度应控制在（371），准确判断血浆凝固终点（纤维蛋白形成）是PT测定结果准确性的关键。8结果审核与复查 结果审核应该结合标本质量和临床诊断等作出综合(zngh)判断，才能发出正确的检验报告。重视异常结果的复查，必要时重新采集标本进行复查，并加强与临床沟通，及时掌握反馈信息，持续改进检验质
9、量。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十七页，共四十九页。,（三）报告(bogo)方式,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十八页，共四十九页。,（四）方法学评价(pngji),二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第十九页，共四十九页。,参考(cnko)区间及临床意义,（五）参考区间每个实验室必须建立相应的参考区间。PT：成人1113秒，超过正常对照值3秒为异常(ychng)。INR：依ISI不同而异。PTR：成人0.851.15。PTA：70130。（六）临床意义1PT延长 先天性凝血因子、缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症。获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏症（影响凝血
10、因子、合成）、原发纤溶亢进症、DIC等。血循环中存在抗凝物质，如口服抗凝剂等。2PT缩短 先天性凝血因子增多症。高凝状态和血栓性疾病。药物，如长期服用避孕药等。,二、血浆(xujing)凝血酶原时间,第二十页，共四十九页。,定义(dngy),活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）是在体外模拟体内内源性凝血的全部(qunb)条件，测定血浆凝固所需的时间。APTT反映内源性凝血因子是否异常和血液中是否存在抗凝血物质，是常用而且比较灵敏的内源性凝血系统的筛检指标之一。,三、血浆活化(huhu)部分凝血活酶时间,第二十一页，共四十九
11、页。,APTT原理(yunl),第二十二页，共四十九页。,（一）手工(shugng)法,1原理 在37条件下，于待检血浆中加入足量的接触因子激活剂（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），在Ca2+参与下，通过激活因子而启动内源性凝血途径，观察血浆凝固所需的时间。2简要操作(cozu)采血并分离血浆加血浆与APTT试剂（11）温育活化3分钟加氯化钙混匀并立即计时倾斜试管观察结果。,三、血浆活化部分(b fen)凝血活酶时间,第二十三页，共四十九页。,（二）质量保证,1标本 采血后应尽快测定。2APTT试剂 是激活剂和部分凝血活酶的混合物。3激活时间 血浆加入APTT试剂后被激活的时间要保证
12、为3分钟。时间过短，APTT延长。4其它 与PT试验相同，如采血顺利、抗凝剂的种类(zhngli)及比例等。,三、血浆(xujing)活化部分凝血活酶时间,第二十四页，共四十九页。,（三）方法学评价 与PT试验相同。（四）参考区间 2535秒，超过正常对照值10秒为异常。（五）临床意义1APTT延长 因子、水平降低的血友病甲、乙，因子缺乏症，部分血管性血友病。严重(ynzhng)的因子、缺乏，如严重肝脏疾病、维生素K缺乏症等。原发性或继发性纤溶亢进。口服抗凝剂、应用肝素等。血液循环中存在病理性抗凝物质，如抗因子或抗体、狼疮样抗凝物等。2APTT缩短 高凝状态和血栓性疾病，如DIC高凝期、心肌梗
13、死、深静脉血栓形成等。,三、血浆(xujing)活化部分凝血活酶时间,第二十五页，共四十九页。,概述(i sh),凝血酶时间（thrombin time，TT）是从加入凝血酶开始至血浆中纤维蛋白原（Fg）转变为纤维蛋白（Fb）所需的时间。TT延长主要(zhyo)反映Fg浓度减少或功能异常以及血液中存在相关的抗凝物质（肝素、类肝素等）。,四、血浆(xujing)凝血酶时间,第二十六页，共四十九页。,XIII,XIIIa,交联的纤维蛋白(xin wi dn bi),TT原理(yunl),第二十七页，共四十九页。,（一）手工(shugng)法,1原理 37条件下，在待检血浆中加入“标准化”凝血酶后，
14、直接将血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白，使乏血小板血浆凝固，其凝固时间即为TT。2简要操作 采血并分离血浆加血浆与凝血酶试剂（11）混匀并立即计时倾斜试管(shgun)观察结果。,四、血浆(xujing)凝血酶时间,第二十八页，共四十九页。,（二）质量保证与PT试验相同。（三）方法学评价与PT试验相同。（四）参考区间1618秒，超过正常对照值3秒为异常。由于试剂中凝血酶浓度不同，其检测(jin c)结果存在差异。因此，每个实验室必须建立相应的参考区间。,四、血浆(xujing)凝血酶时间,第二十九页，共四十九页。,1TT延长低（无）纤维蛋白原血症和异常纤维蛋白原血症，其中(qzhng)更多见于获得
15、性低纤维蛋白原血症。肝素或类肝素抗凝物质，如肝素治疗、肿瘤和SLE等。原发性或继发性纤溶亢进时（如DIC），由于FDP增多对凝血酶有抑制作用，可导致TT延长。2TT缩短 一般无临床意义。,四、血浆(xujing)凝血酶时间,（五）临床意义,第三十页，共四十九页。,概述(i sh),纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）是由肝脏合成，是血浆浓度最高的凝血因子。Fg浓度或功能异常(ychng)均可导致凝血障碍。Fg是出血性疾病与血栓性疾病诊治中常用的筛检指标之一。常用的方法有Clauss法、PT衍生法等。,五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定,第三十一页，共四十九页。,XIII,XIIIa,交
16、联的纤维蛋白(xin wi dn bi),Fg原理(yunl),第三十二页，共四十九页。,（一）Clauss法,1原理 在待检稀释的血浆中加入(jir)足量的凝血酶，使血浆中的Fg转变成纤维蛋白，血浆凝固，其血浆凝固时间与Fg含量呈负相关；以Fg含量一定的国际标准品为参比血浆，测定其对应的凝固时间，制作标准曲线；通过标准曲线，可以得到待检血浆中Fg含量。2简要操作 采血并分离血浆溶解Fg试剂及参比血浆制备标准曲线检测待检血浆报告结果。,五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定,第三十三页，共四十九页。,（二）质量保证,1保证结果的可靠性和准确性 Fg参比血浆必须与待检血浆平行测定，以保证测定结果的可靠性。当Clauss法测定结果超出其检测线性时，必须改变稀释度，并重新测定，才能(cinng)保证其结果的准确性。如Fg5.00g/L时，可将原来设定的稀释度110改变为120的稀释血浆进行检测，结果乘以2。,五、血浆(xujing)纤维蛋白原测定,第三十四页，共四十九页。,（二）质量保证,2注意异常结果的复查 当标本中存在异常纤维蛋白原、纤维蛋白（原）降解产物（FDP）、肝素和类肝素抗凝物质
