1、ICS65.020B65LY中华人民共和国林业行业标准LY/T2896-2017大熊猫种群遗传档案建立技术规程A regulation for giant panda population genetic archives2017-10-27发布2018-01-01实施国家林业局发布LY/T2896-2017大熊猫种群遗传档案建立技术规程1范围本标准规定了大熊猫样品采集保存、DNA提取、性别鉴定、个体识别、遗传多样性评估和种群遗传档案建立的技术和方法,本标准适用于圈养大熊猫和野生大熊猫。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1微卫星序列microsatellite sequence基因组
2、中由1个6个核苷酸为基本重复单元组成的DNA串联重复序列,例如(AC)n、(ACG)n、(ATTT)n等,也称短串联重复序列(short tandem repeats,STR)或简单重复序列(simple sequencesrpeats,SSR)。在个体间重复次数发生变化的多态性微卫星位序列,可以作为微卫星标记使用。2.2IDNA样品DNA samples利用大狼猎组织(如毛发、血液,精液、肌肉组织等)或新鲜粪便提取的大熊猫基因组DNA。3采样频次、时间和路线3.1采样频次与时间野生大熊猫样品的采集可结合保护区监测和巡护等日常工作常年进行。野生大熊猫样品大规模集中采样可在春季化雪后(繁殖季节)
3、和冬季积雪前(非繁殖季节)开展;对于交通比较方便的大熊猫分布密集区,可以根据具体情祝和工作目标增加采样次数。各地可根据当地大熊猫的习性以及当地的物候、气候、大熊猫主食竹发竹规律、野外工作条件和后勤保障等因素,确定具体采样时间。野外采样工作应尽量在最短时间内完成,一般为10d20d。圈养大熊猫样品可以结合日常工作随时采集。3.2采样路线样品的大规模集中采集路线以全国第四次大熊猫调查方法为依据,将保护区大熊猫栖息地划分为若干个面积为2km2的网格,每个网格作为1个采样小区,并编号。在单个小区内,根据地形地貌、道路、河流、植被、大熊猫主食竹等因素布设实际采样路线。样品的日常采集可根据监测巡护路线确定。4样品的采集和保存方法4.1采样工具手持终端设备、卫星定位仪,地形图、记录表格、一次性PE手套、500L塑料样品瓶、分析纯无水