1、I C S6 5.1 0 0B 1 7NY中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 N Y/Tl l 5 5.8 一2 0 0 7农药室内生物测定试验准则除草剂第8 部分:作物的安全性试验 茎叶喷雾法G uldsU n eforL a b o r a t o r yB i o a s s 叮 o fP e s ti c i d e sP a rt s:F o l i a rA P P l i c a ti o nT estforH e r bici d eC r o PS a fety E v ai u atio n2007一 04一 j 7发布2 0 0 7 一 0 7 一 0 1
2、 实施中 华 人 民 共 和 国农 业 部 发布N Y/Tl l 5 5.8 一2 0 0 7月 U舀 农药室内生物测定试验准则除草剂 为系列标准。第 1 部分:活性试验平皿法第2部分:活性测定试验玉米根长法第3 部分:活性测定试验土壤喷雾法第4 部分:活性测定试验 茎叶喷雾法第5 部分:水田 除草剂土壤活性测定 试验 浇灌法第 6 部分:对作物的安全性试验土壤喷雾法第7 部分:混配的联合作用测定第 8 部分:作物的安全性试验茎叶喷雾法第 9 部分:水田除草剂活性测定试验茎叶喷雾法本部分是 农药室内生物测定试验准则除草剂 的第8部分。本部分由中华人民共和国 农业部提出 并归口。本部分起草单位:
3、农业部农药检定所。本部分主要起草人:张宏军、刘学、张佳、张宗俭、王贵启。NY/T l l 5 5.8 一2 0 0 7 农药室 内生物测定试验准则除草剂第 8 部分:作物的安全性试验茎叶喷雾法1 范围 本部分规定了 茎叶喷雾处理法测定除草剂对 作物安全性试验的基本要求和方法。本部分适用于农药登记用除草剂茎叶 喷雾处理对作物安全性测定室内 试验。2 仪器设备 普通 实验室常规仪器设备;2 1 光照培养箱或可控日 光温室(光照、温度、湿度等);2.2 可控喷雾设备;2.3 电子天平(感量0.1 1 1 19);2.4 移液器或移液管等。3 试荆与材料 所用试剂,凡未指明规格者,均为分析纯。3.1
4、试验土坡 采用有机质含量(4%、中 性(州 6.0 一 8.0)、通透性良 好的 过筛风干砂壤土。3 2 生物试材3.2.1 作物 根据除草剂类型选择应用作物对象,记录作物品种及种子来源。3 2.2 杂草 选择易于培养、生育期一致的代表性敏感杂草,其种子发芽率在80%以上。常用杂草种类如下:马 唐(D igita r iasa 刀 9“i na“:)、狗尾草(反 ta r 纽“r id i:)、稗草(E 法 in 献俪。ru,一 galli)、牛筋草(Ele u s 艺 nei n d i ca)、看麦娘(A I。扭 望 u ru,a 亡 q 故 2 1 1:)、日 本看麦娘(A l l 享、
5、u ru 了 a 加n i c u、)、野燕麦(A,nafat 撇)、棒头草(几2,扭 卿 斑了 飞 理 孕 口)、蔺 草(且 戈 关 优 anni a syzlga动n,)、早熟禾(只 刀洲n ua)、简麻(A b ut ilo。th e 妒入 ra st i)、刺芡(A mara nt hu,咖n os u:)、反枝觅(A maTa川 hu:re t 八 州 乙 巴 刁 u:)、马齿觅(Port ul a ca O 1 已 犷-a cea)、黎(以en吵冤 Z i u ma lb u m)、皱叶酸模(R u mex:ri P“:)、鸭踌草(。m、li na,m unis)、苍耳(Xant
6、hi u mstru mari o m)、龙葵(肠la numn 唱,1 砚 m)、决明(山55 她to ra)、繁缕(s te lla、刀 2 进汉 敏)、牛繁缕(s te l 勿 r 血aquat lca)、卷 耳(。ra stiu ma 二n se)、猪殃殃(阮11 o n 己 户 Z r in。)、婆婆纳(vero 爪 cad 安 匀”靛 二)、一年蓬(Erlge二 annuu:)、大巢菜(vicla sa 瓦,)、拟南芥(A rab 左 10 户 s istha l 边 na)、碎米莎草(C、户 了ru:1、)、异型莎草(巧 了 犯 ru:d ifj乙 r m i、)、水莎草(知。c
7、e l l usse ro ri 二,)、香附子(巧 户ru:ro t undu、)、千金子(乙 功 之。五 初 动 i n e n s i s)、双 穗雀稗(几咖 l u m己 is t i 认u m)、眼子菜(几ta m og6 t o n 己 i s t i n ct u:)、鲤肠(&l ip taP rost ra ta)、鸭舌草江么,n 诚 or。乙 罗nalis)、矮慈 菇(5 之 9 泛 t ta r otr i l 乙 l ia)、浮萍 Lem na m i。二)等。33 试验药剂:原药(或母药)。3.4 对照药剂:采用已 登记注 册且生产上常用农药的原药(或母药),其化学结构
8、类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。Ny/T l l 5 5.8 一2 0 0 74试验步骤4.1 试材准备4.1.1 作物 将试验土壤定量装至盆钵的4 巧处,从顶部浇水使土壤完全湿润。将预处理的供试作物种子均匀撒播于土壤表面,根据种子大小覆土05 c m 一 2.o c m,播种 后移人温室或光照培养箱中 常规培养。早田作物以 盆钵底部渗灌方式补水,水田 作物(水稻)则以盆钵顶部灌溉方式补水至饱和状态。作物出 苗后进行间苗定植,根据药剂特性,选 择适宜叶龄试材进行喷雾处理。4.1.2 杂草 将试验土壤定量装至盆钵的4/5处。采用盆钵底部渗灌方式,使土壤完全湿润。将预处理的供试杂草种子均匀撒
9、播于土壤表面,根据种子大小覆土0.s rm一 2.o cln,播种后移人温室常规培养。旱田 杂草以 盆钵底部渗灌方式补水,水田 杂草以盆钵顶部灌溉方式补水至饱和状态。杂草出苗后进行间苗定株,保证杂草的密度一致(总 密度 在 1 20株一1 50株/时)。根据药剂除草特点,选择适宜叶龄试材进行喷雾处理。4.2 药剂配制 水溶性药剂用蒸馏水溶解、稀释。其他药剂选用合适的 溶剂(丙酮、二甲基甲酞胺或二甲 基亚矾等)溶解,用0.1%吐温80水溶液稀释。根据药剂特性,试验药剂和对照药剂各设5 个一 7 个系列剂量。4.3 药剂处理 标定喷雾设备参数(喷 雾压力、喷头高 度、喷液量和喷头型号),按试验设计
10、从低剂量到高剂量顺序进行喷雾处理。每处理不少于4 次重复 并设不含药剂的 处理作空白 对照。处理后移人温室常规培养,旱田 作物和杂草以 盆钵底部渗灌方 式补水;水田 作物和 杂草以顶部直接灌溉的方式补水,并保持I C m 一 4 cm 水层。记录试验期间温室内的 温湿度动态数据。4,4 检查 处理后定期观察记载作物和杂草的 生长状态。处理后14d 或21d,目 测法和生长抑制法检查记录药剂对作物和杂草的影响,同时描述药害症状,主要症状有:颜色变化(黄化、白化、变紫等);形态变化(新叶畸形、扭曲等);生长变化(脱水、枯萎、矮化、簇生等)。可根据试验要求和药剂特性,调节检查时间或进行产量测定5 数
11、据统计与分析5.1 计算方法5.1.1 作物5,!.1.1 目测法 根据 测试靶标作物受害症状,0 表示安全,50 以上 表示有 严重药害。评价指标见表1:表 1 药害评价指标药害程度(%)结果描述0安全,无药害1一 1 0无 明显 药 害1 1 一 3 0轻微药害NY/T l l 5 58 一2 0 0 7表 1(续)药害程度(%)结 果 描 述3 1 一 5 0中度药害 5 0严重药害按公式(1)计算选择性指数。计算结果保留小数点后两位。=里.,.(1、W、一尹 式中:1 选择性指数;C-一-作物的E】1 0;W杂草的 E l 与。5.!.1.2 生长抑制法 根据检查数据,按公式(2)计算
12、各处理的鲜重、株高、产量的抑制率。计算结果保留小数点后两位。_X、一X:双二一 一不 于 又I U U 。,。(2)人 1 式中:R生长抑制率,单位为百分率(%);x。对照鲜重(或株高、或产量),单位为克或厘米(9 或C m);x,处理鲜重(或株高、或产量),单位为克或厘米(9 或c m)。按公式(1)计算选择性指数。计算结果保留 小数点后两 位。5.1.2 杂草5.1.2.1 目测法 根据测试靶标杂草受害症状和 严重 程度,评价药剂的 除草活性。可以采用下列统一分级方法进行检查:1 级:全部死亡;2 级:相当于空白 对照区杂草的0 一 25%;3 级:相当于空白 对照区杂草的2.6%一5%;
13、4 级:相当于空白 对照区杂草的5.1%一10%;5 级:相当于空白 对照区杂草的10.1%一巧%;6 级:相当于空白 对照区杂草的巧.1%一 25%;7 级:相当于空白 对照区杂草的25.1%一 35%;8 级:相当于空白 对照区杂草的35.1%一 67.5%;9 级:相当于空白对照区杂草的67.6%一1 00%。5.1.2.2 生长抑制法 根据检查数据,按公式(3)计算各处理的鲜重防效或株防效,计算结果保留小数点后两位。E 一 几 轰 工 工 大 1 0 0 ,.,.(3)1 0式中:E鲜重防效(或株防效),单位为百分率(%);TO 对照杂草地上部分鲜重(或杂草株数),单位为克或株(9 或株);T l 处理杂草地上部分鲜重(或杂草株数),单位为克或株(9 或株)。N Y/T l l 5 5.8 一2 0 0 75.2 统计分析 用D P S(数据处理系统)、S A S(统计分析系统)或sPSS(社会科学统计程序)标准统计软件对药剂剂量的对数 值与抑制率的几率值进行回 归分析,计算作物ED10 值及 95%置信限和杂草E I 与 值及95%置信限。6 结果与报告编写 根据统计结果进行分析评价,写出正式试验报告.并列出原始数据。