1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口化妆品中双香豆素和环香豆素的测定液相色谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犱 犻 犮 狌 犿 犪 狉 狅 犾 犪 狀 犱犮 狔 犮 犾 狅 犮 狅 狌 犿 犪 狉 狅 犾 犻 狀犮 狅 狊 犿 犲 狋 犻 犮 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委
2、员会提出并归口。本标准由中国检验检疫科学研究院负责起草。本标准主要起草人：程艳、王星、武婷、陈伟、林远辉、张帆、刘柳、王超。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售进出口化妆品中双香豆素和环香豆素的测定液相色谱法范围本标准规定了进出口化妆品中双香豆素和环香豆素的液相色谱测定方法。本标准适用于皮肤护理类、皮肤清洁类、皮肤美容修饰类进出口化妆品中双香豆素和环香豆素的测定。原理化妆品中的双香豆素和环香豆素用乙腈 氢氧化钠溶液（，体积比）超声提取，过滤后，采用反相高效液相色谱技术进行分离、测定。根据其保留时间定性，外标法定量。试剂和材料除非另有说明，所用试
3、剂均为分析纯，水为二次去离子水。乙腈，色谱纯。甲醇，优级纯。双香豆素，纯度。环香豆素，纯度。氢氧化钠溶液：称取 氢氧化钠，加水溶解后转移至 容量瓶中，定容至刻度。乙酸溶液：移取 冰醋酸，加水溶解后转移至 容量瓶中，定容至刻度。乙酸铵溶液（含 体积比的乙酸）：称取 乙酸铵，加水溶解后转移至 容量瓶中，加入 冰醋酸，定容，过滤后备用。双香豆素和环香豆素标准储备液（）：分别准确称取双香豆素（）和环香豆素（），精确至 ，加入 二氯甲烷，再加入 乙腈（），超声使固体全部溶解，用乙腈定容至 ，冰箱冷藏保存。根据需要用乙腈稀释成适用浓度的标准工作溶液，现用现配。乙腈氢氧化钠溶液：量取乙腈（），加入 氢氧化钠
4、溶液（），混合均匀，配制成 溶液。仪器 液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。微量进样器：。超声波清洗器。离心机：大于 。溶剂过滤器和 有机过滤膜。测定步骤 试样处理称取化妆品试样 至聚四氟乙烯容器中，精确到 ，加入乙腈氢氧化钠溶液（），在超声波清洗器中超声振荡 后，加入 乙酸溶液（），并用乙腈氢氧化钠溶犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售液（）定容至 ，混匀。取部分溶液放入离心管中，在离心机上于 离心 ，离心后的上清液经 有机滤膜过滤，滤液待测定用。样品测定 色谱条件 色谱柱：柱 （内径），或相当者。流动相：（）相：甲醇（）乙腈（）；（）相：甲醇（）的 乙酸铵溶液（含 体积比的乙酸）（）
5、。梯度条件：如表所示。表梯度洗脱条件时间 流速：。检测波长：。柱温：室温。进样量：。标准工作曲线绘制分别移取双香豆素和环香豆素标准储备液（）配制成 ，标准工作溶液。取 注入液相色谱仪，按色谱条件（）进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准物质色谱图参见附录。试样测定用微量进样器准确吸取 试样溶液（）注入液相色谱仪，按色谱条件（）进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应的被测物浓度。样品溶液中双香豆素和环香豆素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。双香豆素和环香豆素含量高的试样可取适量试样溶液用乙腈稀释后进行测定。
6、结果计算化妆品中的双香豆素和环香豆素的含量按式（）计算：犡犮犞犿 （）式中：犡 化妆品中双香豆素和环香豆素的质量含量，单位为毫克每千克（）；犮 从工作曲线上查出的样品溶液中双香豆素和环香豆素的浓度，单位为毫克每升（）；犞 试样定容体积，单位为升（）；犿 试样的质量，单位为克（）。测定低限本方法对双香豆素的测定低限为 ；对环香豆素的测定低限为 。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售回收率和精密度双香豆素和环香豆素含量在 范围的回收率和精密度如表所示。表双香豆素和环香豆素的回收率和精密度名称添加浓度（）平均回收率相对标准偏差双香豆素 环香豆素 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犛 犖犜 附录犃（资料性附录）标准物质液相色谱图 双香豆素（）；环香豆素（）。图犃 双香豆素和环香豆素标准物质液相色谱图犜犖犛
