1、1SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准s N 0 6 0 7 一 1 9 9 6出 口肉及肉制品中唾苯哒哇 残 留量 检 验 方 法Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f t h i a b e n d a z o l er e s i d u e s i n m e a t a n d m e a t p r o d u c t s f o r e x p o r t1 9 9 6 一 1 1 一 1 5 发布1 9 9 7 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局 发 布S N 0 6 0 7 一 1
2、 9 9 6前言 本标准是根据我国GB/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则第 1 单元:标准的起草与表述规则第 1部分:标准编写的基本规定 及S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定 的要求而进行编写的。其中测定方法是参考有关文献，经研究、改进和验证后制定的。在标准中同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际上对猪肉中唾苯哒哇残留量的最高限量和本标准测定方法的灵敏度而制定的。本标准的附录A为提示的附录。本标准由 中华人民共和国国家 进出口 商品 检验局 提出 并归口。本标准起草单位:中华人民共和国湖北、湖南进出口商品检
3、验局。本标准起草人:邵俊杰、袁智能、聂洪勇。本标准系首次发布的行业标准。中华人民共和国进出口 商品检验行业标准出口肉及肉制品中唾苯哒哇残留量检验方法s N 0 6 0 7-1 9 9 6M e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f t h i a b e n d a z o l er e s i d u e s i n me a t a n d me a t p r o d u c t s f o r e x p o r t范围 本标准规定了出口肉及肉制品中唾苯哒哇(又名哩菌灵)残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。本标准适用于
4、出口猪肉中噬苯哒哇残留量的检验。2 抽样和制样2.，检验批 以不超过 2 5 0 0 件商品为一检验批。同一检验批的商品应具有相同特征，如:包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量 批量，件最低抽样数，件 1 2 5 1 2 6-1 0 0 5 1 0 1 2 5 0 1 0 2 5 1 5 0 0 1 5 5 0 1 1 0 0 0 1 7 1 0 0 1 2 5 0 0 2 02.3 抽样方法 按2.2 规定的抽 样件数，随机抽取，逐件开启。从每件内抽取一袋，作为原始样品。总量不少于2 k g,装入清洁的容器内，加封后，标明标记并及时送实验室。如每件中无小包 装或有小包装但重量超过
5、2 k g 者，则可用锋利刀(用酒精灭菌后)在抽出的包件中，每件割取不少于1 0 0 g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的 重量不少于2 k g,加封后，标明标记，及时送交实验室。2.4 试样制备 从所取全部样品中分取出1 k g，充分绞碎混匀，分成两等份，装入清洁的 容器内密封，作为试样，并标明标记。2.5 试样保存 将试样于一1 s 以下冷冻保存。注:在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化3 测定方法3.1 方法提要山.中 华人民共和国国家进出口 商品检验局1 9 9 6-1 1 一 1 5 批准1 9 9 7-0 5-0 1 实 施 1s
6、N 06 07 一 1 996 样品用碳酸钠碱化，以乙睛一 三氯甲烷混合溶剂提取试样中唾苯哒哇，将提取液挥发至近干，残留物在磷酸和正己 烷之间 进行分配以除去脂肪。将含有唾苯哒wVI 的酸 性溶液进行中和，再用乙腊 一 三氯甲 烷混合溶剂提取。将提取液挥发至刚干，残渣溶解于流动相中，用带荧光检测器的液相色谱仪测定唾苯哒哇残留量，外标法定量。3.2 试剂 除特别说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.1 乙睛。3.2.2 三氯甲烷。3.2.3 正己烷。3.2.4 氯化钠。3.2.5 助滤剂,C e l it e 5 4 5,3.2.6 碳酸钠水溶液:1 m o l/L,3.2.7 磷酸水
7、溶液:1 m o l/L,3.2.8 氢氧化 钾水溶 液:1 0 m o l/L,3.2.9 离子对溶液:1 0 mm o l 澳化四丁基按溶于 1 L 0.5%(v/v)三乙胺水溶液中，再用乙酸调节p H为3.5 0,3.2.1 0 乙 睛一 三氯甲 烷混合溶剂:1 0+1(V/V),3.2.1 1 唾苯哒哇标准品:纯度)9 9 y-3.2-1 2 01 苯哒哇标准溶液:称取1 0.0 m g P苯哒哇标准品，用乙 睛溶解并定容至1 0 0 m L，得浓度为1 0 0 la g/m L唾苯哒哇标准贮备 液。根据需要由标准贮备液用流动相逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液。3.3 仪器和设备3.3
8、.1 高效液相色谱仪:配有荧光检测器。3.3.2 组织捣碎机。3.3.3 快速混匀器或匀浆机。3.3.4 多功能微量化样品处理仪，或相当者。3.3.5 离心机:4 0 0 0 r/m i n,3.3.6 微量可调移液 管:4 0 1 0 0 K L,2 0 0-1 0 0 0 IA L,3.3.7 离心管:1 5 mL,3.3.8 微量进样器:2 0 y L,3.3.9 高速离心机:1 4 0 0 0 r/m i n,3.4 测定步骤3.4.1 提取 试样经组织捣碎机捣碎后，加人与试样等重量的助滤剂(C e l i t e 5 4 5)，充分捣碎混匀，即为待测试样。称取约2 g(精确至0.0
9、1 g)待测试样于1 5 m L 离心管中，加入1.5 m L碳酸钠溶液和5 m L乙睛一 三氯甲 烷(1 0+1)，于快速混匀器中匀浆2 m i n。加入1 g 氯化钠，再匀浆，然后以3 0 0 0 r/m i n 离心2 m i n,将上清液倾人另一 1 5 mL离心管中。再用 5 mL乙睛一 三氯甲烷(1 0+1)提取残渣，离心后，合并提取液。将提取液在多功能微量化样品处理仪上于8 0 吹至 近干。3.4.2 净化 加入 2 m L磷酸溶液以溶解残渣。用2 X2 mL正己烷于混匀器上混匀，弃去正己烷相，以除去脂肪。用1 0 m o l/L氢氧化 钾溶液调节水相p H至8.5(+1.0)，
10、加1 g 氯化钠，混匀至 大部分氯化钠溶解。用2 X 5 m L 乙睛一 三氯甲 烷(1 0+1)提取，合并提取液。于多功能微量化样品处理仪上 8 0 刚吹干。以1.0 0 mL 流动相溶解残渣。经高速离心(1 4 0 0 0 r/m i n)或过滤后，澄清液供液相色谱测定。S N 060 7一 199 63.4.3 测定3.4.3.1 液相色谱条件 a)色谱柱:2 5 c mX4.6 mm(id),5 p m,O D S;b)流动相:乙睛一 离子对溶液(5 0+5 0);c)流动相流速:。.8 m L/m i n;d)检测器:荧光检测器，激发波长:3 0 5 n m;发射波长:3 5 0 n
11、 m;e)色谱柱温度:4 0 C;f)进样量:2 0 V L,3.4-3.2 液相色谱测定 根据样液中唾苯哒哇含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中噢苯哒哇响应 值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，唾苯哒哇保留时间约为 4.2 m i n,唾苯哒哇标准品液相色谱图见附录 A中图Al,3.4.4 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。3.5 结果计算和表述 用色谱数据处理机，或按式(1)计算试样中唾苯哒哇残留量:X=h人，跳.。一，。二(1)式中:X 试样中 99苯哒Wl 残留量，m g/k g;h 样液中 唾苯哒哇峰
12、高，m m;从标准工作溶液中唾苯哒哇峰高,mm;c 标准工作溶液中 噢苯哒哇浓度，p g/m L;V 样液最终定容体积，mL;M-最终样液所代表的试样量，9.注:计算结果需扣除空白值4 测定低限、回收率41 测定低限 本方法的测定低限为。0 2 m g/k g,4.2 回收率 回收率的实验数据:09苯哒哇添加浓 度在。.0 2 m g/k g 时，回 收率为9 5.2 5 0 a;ps苯哒哇添加浓 度在。.1 0 m g/k g 时，回 收率为9 6.0 5%:ml苯哒哇添加浓度在。.2 0 mg/k g时，回收率为 9 0.5 0 0 0S N 06 07 一 1 996 附录A (提示的附
13、录)标准品液相色谱图图A 1 唾苯哒哇标准品的液相色谱图S N 0 6 0 7 一1 9 9 6Fo r e wo r d Th i s s t a n d a r d w a s d r a f t e d i n a c c o r d a n c e w i t h t h e r e q u i r e m e n t s o f G B/T 1.1-1 9 9 3 D i r e c t i v e s f o rt h e w o r k o f s t a n d a r d i z a t i o n-U n i t 1:D r a f t i n g a n d p r e
14、s e n t a t io n o f s t a n d a r d s-P a r t 1:G e n e r a l r u l e sf o r d r a f t i n g s t a n d a r d s a n d S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 G e n e r a l r u l e s f o r d r a f t i n g t h e s t a n d a r d m e t h o d s f o r t h ed e t e r m i n a t i o n o f p e s t i c i d e,v e t e r i n a r y
15、 d r u g r e s i d u e s a n d b i o t o x i n s i n c o mm o d i t i e s f o r e x p o r t .T h em e t h o d o f d e t e r mi n a t i o n o f t h is s t a n d a r d w a s d r a f t e d b y r e f e r r i n g t o r e l e v a n t d o me s t i c a n d f o r e i g n l i t-e r a t u r e s t h r o u g h r
16、 e s e a r c h,mo d i f i c a t i o n a n d v e r i f ic a t i o n.I n a d d i t i o n,me t h o d s o f s a mp l i n g a n d s a m p l ep r e p a r a t io n a r e a l s o s p e c i f ie d i n t h i s s t a n d a r d.Th e l i mi t o f d e t e r mi n a t i o n i s d e f i n e d i n t h i s s t a n d a r d o n t h e b a s i s o f t h e c u r r e n t i n t e r n a t i o n a lma x i m u m l i mit f o r t h ia b e n d a z o l e r e s i d u e s i n me a t a n d t h e s e n s i t i v i t y o f t h e m e
