1、第第6章章 肠道杆菌肠道杆菌 p67 enterobacteriaceae 1.肠道杆菌的共性。肠道杆菌的共性。2.大肠埃希菌的致病性。大肠埃希菌的致病性。3.沙门菌引起的疾病及别离与鉴定程序。沙门菌引起的疾病及别离与鉴定程序。4.Widal test，结果判断。，结果判断。重点：重点：肠道杆菌：肠道杆菌：寄生于肠道的一大群生物学性寄生于肠道的一大群生物学性状相似的状相似的G-中等大小杆菌的总称。中等大小杆菌的总称。多数多数 正常菌群正常菌群 局部局部 条件致病菌条件致病菌 少数少数 致病菌致病菌 肠道杆菌肠道杆菌 2.培养：兼性厌氧，普通琼脂平板培养，培养：兼性厌氧，普通琼脂平板培养，肠道肠
2、道SS培养基培养基选择培养基选择培养基别离培养，别离培养，结果：结果：肠道非致病菌：红色大菌落，肠道非致病菌：红色大菌落，肠道致病菌：无色透明小菌落。肠道致病菌：无色透明小菌落。肠道杆菌的共同特征：肠道杆菌的共同特征：1.形态特征：形态特征：G-中等大小的杆菌，无芽胞，中等大小的杆菌，无芽胞，2.多数多数有周鞭毛有周鞭毛及及菌毛菌毛。根底培养基，乳糖根底培养基，乳糖底物底物，胆盐、煌绿，胆盐、煌绿抑抑 制非致病菌制非致病菌，中性红，中性红指示剂指示剂。SS培养基：培养基：沙门菌属沙门菌属Salmonella 志贺菌属志贺菌属Shigella SS平板平板鉴别鉴别/选择培养基选择培养基 肠道非致
3、病菌肠道非致病菌 乳糖乳糖 肠道致病菌肠道致病菌 乳糖乳糖 -3.生化反响：活泼，分解多种糖类、蛋白质。生化反响：活泼，分解多种糖类、蛋白质。乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病菌。菌。代表种代表种 动力动力 葡萄糖葡萄糖 乳糖乳糖 靛基质靛基质 H2S 尿素酶尿素酶 埃希菌属埃希菌属 大肠埃希菌大肠埃希菌 +-志贺菌属志贺菌属 痢疾志贺菌痢疾志贺菌 -+-+/-沙门菌属沙门菌属 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 +-/+-变形杆菌属变形杆菌属 变形杆菌变形杆菌 +-+四类肠道杆菌的生化反响四类肠道杆菌的生化反响:菌体抗原菌体抗原 O-Ag 鞭毛抗原鞭毛抗原 H-A
4、g 毒力抗原毒力抗原Vi-Ag、K-Ag)5.抵抗力：抵抗力：弱。胆盐和煌绿对非致病性肠弱。胆盐和煌绿对非致病性肠道杆菌有选择性抑制作用。道杆菌有选择性抑制作用。4.抗原构造抗原构造 6.变异：变异：耐药性变异。耐药性变异。维生素维生素营养营养 细菌素细菌素拮抗拮抗 条件条件 免疫力免疫力 寄居部位改变寄居部位改变 第第1节节 埃希菌属埃希菌属Escherichia 大肠埃希菌大肠埃希菌大肠杆菌，大肠杆菌，E.coli 2.特殊菌株：特殊菌株：腹泻。腹泻。1.正常菌群：正常菌群：人类出生不久进入肠道，并延续终人类出生不久进入肠道，并延续终 身，合成身，合成 条件致病菌条件致病菌 肠外感染。肠外
5、感染。一、生物学特性一、生物学特性 1.形态染色：形态染色：G-中等大小杆菌，周鞭毛及普通菌毛中等大小杆菌，周鞭毛及普通菌毛 2.和性菌毛。和性菌毛。2.培养特性：培养特性：SS培养基上形成红色大菌落。培养基上形成红色大菌落。3.生化特点：生化特点：葡萄糖葡萄糖+、乳糖、乳糖+，动力，动力+，H2S-O抗原：抗原：170种种 4.抗原构造抗原构造 H抗原：抗原：56种种 K抗原：抗原：100种种 血清型表示方式血清型表示方式：O:k:H 如：如：O111:k58:H2 二、致病性二、致病性 一一致病物质致病物质 1.黏附素：黏附素：定植因子抗原定植因子抗原,2.外毒素外毒素 志贺毒素志贺毒素
6、耐热肠毒素耐热肠毒素ST 不耐热肠毒素不耐热肠毒素LT 3.其他致病物质其他致病物质 内毒素内毒素 荚膜荚膜 载铁蛋白载铁蛋白 型分泌系统：型分泌系统：LT ST 对热稳定性对热稳定性 不耐热不耐热 耐热耐热 65 C30min灭活灭活 耐耐100 C20min 亚单位亚单位 A、B a、b 黏膜受体黏膜受体 GM1神经节苷脂神经节苷脂 不清不清 致泻机理致泻机理 活化腺苷酸环化酶活化腺苷酸环化酶 活化鸟苷酸环化酶活化鸟苷酸环化酶 ATP cAMP GTP cGMP B亚单位与肠黏膜上皮细胞膜外表亚单位与肠黏膜上皮细胞膜外表 GM1神经节苷脂结合，神经节苷脂结合，A亚单位穿过细胞膜激活亚单位穿
7、过细胞膜激活 腺苷酸环化酶，使腺苷酸环化酶，使ATP cAMP 肠液肠液分泌分泌 致泻。致泻。型分泌系统：型分泌系统：犹如分子注射器，是指细菌接触宿主细胞后，犹如分子注射器，是指细菌接触宿主细胞后，能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统，能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统，约由约由20余种蛋白组成。余种蛋白组成。1.肠外感染肠外感染条件致病菌条件致病菌：二二所致疾病所致疾病 寄居部寄居部 位改变位改变 肠外感染肠外感染 化脓性感染化脓性感染 泌尿道感染泌尿道感染 肠内正常菌群肠内正常菌群 腹膜炎腹膜炎 阑尾炎阑尾炎 败血症败血症 新生儿脑膜炎新生儿脑膜炎 尿道炎尿道炎 膀胱炎膀
8、胱炎 肾盂肾炎肾盂肾炎 ETEC：婴幼儿、旅游者腹泻：婴幼儿、旅游者腹泻 EI EC：大儿童、成人腹泻：大儿童、成人腹泻 EPEC：婴儿腹泻：婴儿腹泻 EHEC：O157:H7 2.肠内感染肠内感染某些血清型某些血清型：胃肠炎胃肠炎腹痛、腹腹痛、腹 泻、恶心、呕吐泻、恶心、呕吐 外源性大肠杆菌外源性大肠杆菌 污染的食污染的食 物、饮水物、饮水 三、卫生细菌学检查三、卫生细菌学检查 大肠菌群数：大肠菌群数：作为饮水、食品等粪便污染的作为饮水、食品等粪便污染的 指标之一。指标之一。我国卫生标准规定：我国卫生标准规定：每每1000ml饮水饮水3个个 每每100ml瓶装汽水、果汁瓶装汽水、果汁5个个
9、大肠菌群大肠菌群 细菌总数细菌总数 每每ml样品样品100个个 第第3节节 沙门菌属沙门菌属Salmonella 沙门菌属：血清型沙门菌属：血清型2500余种余种 甲型甲型付伤寒沙门菌付伤寒沙门菌 肖氏沙门菌肖氏沙门菌 希氏沙门菌希氏沙门菌 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 付伤寒沙门菌付伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌肠炎沙门菌 猪霍乱沙门菌等。猪霍乱沙门菌等。常见致病性沙门菌：常见致病性沙门菌：一、生物学性状一、生物学性状 1.形态染色：形态染色：G-，有菌毛及周鞭毛。，有菌毛及周鞭毛。2.培养特性：培养特性：SS培养基：无色透明小菌落。培养基：无色透明小菌落。3.生化反响：生化反响：
10、葡葡 乳乳 尿尿 靛靛 H2S 动力动力 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 +-+甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌 -+乙型副伤寒沙门菌乙型副伤寒沙门菌 -+4.抗原结构抗原结构：O抗原抗原/菌体抗原菌体抗原脂多糖脂多糖：耐热：耐热100 C1h，数种，数种 沙门菌共有，产生沙门菌共有，产生IgM型抗体。型抗体。H抗原抗原/鞭毛抗原鞭毛抗原蛋白质蛋白质：不耐热：不耐热60 C30min灭灭 活，具特异性，产生活，具特异性，产生IgG型抗体。型抗体。Vi抗原抗原/毒力抗原：抗原性弱，毒力抗原：抗原性弱，Vi抗体可用于检测带抗体可用于检测带 菌者。菌者。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 一一致病物质致病物
11、质 1.侵袭力侵袭力 菌毛菌毛 型分泌系统型分泌系统 侵袭蛋白侵袭蛋白 Vi抗原抗原 2.内毒素：白细胞下降内毒素：白细胞下降 3.外毒素：肠毒素外毒素：肠毒素某些菌株产生某些菌株产生 沙门菌沙门菌 粪口途径粪口途径 肠壁、肠系膜淋巴结肠壁、肠系膜淋巴结 血血第第1W：第：第1次菌血症次菌血症 全身各脏器全身各脏器肝、脾、肾、胆囊等肝、脾、肾、胆囊等 血血 第第2W：第：第2次菌血症次菌血症 肠壁肠壁 再次侵入肠壁淋巴组织再次侵入肠壁淋巴组织 随粪便排出体外随粪便排出体外 肠壁坏死、溃疡、出血肠壁坏死、溃疡、出血第第23W：型超型超 敏反响敏反响 病情开始好转病情开始好转34W后后 二二所致疾
12、病所致疾病 1.肠热症肠热症 伤寒、副伤寒伤寒、副伤寒 并发症：肠出血、肠穿孔 2.食物中毒：最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门菌、食物中毒：最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。3.败血症败血症:鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门 菌感染。菌感染。4.无病症带菌者：无病症带菌者：15%。三三免疫性免疫性 胞内寄生菌，胞内寄生菌，细胞免疫，细胞免疫，一定程度免疫力。一定程度免疫力。三、微生物学检查三、微生物学检查 一一病原菌的别离与鉴定病原菌的别离与鉴定 1.标本采取：标本采取：2.步骤步骤：1W 血血
13、发病第发病第 2 W 粪便或尿粪便或尿 全程全程 骨髓骨髓 粪便、尿粪便、尿 SS培养基培养基 无色可疑菌落无色可疑菌落 血、骨髓血、骨髓 肉汤培养基肉汤培养基 双糖铁培养基双糖铁培养基 增菌增菌 生化反响生化反响 玻片凝集反响玻片凝集反响 二二血清学诊断：肥达试验血清学诊断：肥达试验Widal test 概念：用伤寒杆菌概念：用伤寒杆菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒杆菌杆菌H抗原与病人血清作试管凝集试验，检查患者血清抗原与病人血清作试管凝集试验，检查患者血清中有无相应抗体及其效价。中有无相应抗体及其效价。原理：试管凝集试验原理：试管凝集试验 诊断菌液诊断菌液 未知
14、抗体未知抗体 定性、定量定性、定量 实验方法：实验方法：1:20 1:80 1:320 1:1280 1:40 1:160 1:640 阴对阴对 伤寒伤寒O-Ag 伤寒伤寒H-Ag 甲副甲副H-Ag 乙副乙副H-Ag TO PB PA TH 正常抗体水平：正常抗体水平：当当 TO1:80 TH1:160 有诊断意义有诊断意义 PA、PB1:80 动态观察：动态观察：逐周复查，抗体效价逐次递增逐周复查，抗体效价逐次递增4倍有倍有 诊断价值。诊断价值。判定结果时要考虑因素：判定结果时要考虑因素：O H 抗体型：抗体型：IgM IgG 出现时间出现时间:早早 晚晚 消失时间消失时间:快快 慢慢 特异性特异性:弱弱 强强 O、H均高：伤寒、副伤寒可能性大均高：伤寒、副伤寒可能性大 O、H均低：伤寒、副伤寒可能性小均低：伤寒、副伤寒可能性小 H高、高、O不高：预防接种或非特异性回忆反响不高：预防接种或非特异性回忆反响 O高、高、H不高：感染早期或其它沙门菌引起的交叉反响不高：感染早期或其它沙门菌引起的交叉反响 O与与H抗体的诊断意义：抗体的诊断意义：Widal test 1.简述肠道杆菌的共同生物学特性。简述肠道杆菌的共同生物学特性。2.分析大肠杆菌的致病性。分析大肠杆菌的致病性。3.设计一个肠道杆菌别离培养和鉴定程序。设计一个肠道杆菌别离培养和鉴定程序。习题习题
