1、高考生物,新高考专用,专题二十六细胞工程与胚胎工程,考点一植物细胞工程,1.(2023届辽宁六校期初,13)如图表示利用棉花叶肉细胞进行遗传改良的过程,据图分析错误的是()A.过程需用纤维素酶和果胶酶处理,以去除细胞壁B.过程紫外线照射使得愈伤组织细胞发生基因重组C.过程表示原生质体脱分化形成愈伤组织的过程D.过程中根、芽的形成是基因选择性表达的结果答案B,2.(2023届河北省级一联,13)甘草具有祛痰止咳等功效,由于人们对野生甘草破坏性地采挖,使其几乎灭绝。甘草繁殖率低,采用组织培养技术可以加快其繁殖速度。关于甘草组织培养过程的操作,叙述错误的是()A.外植体、接种器具和培养基均需进行灭菌
2、处理,以保证无菌操作B.外植体接种及愈伤组织诱导过程中均需要无菌操作C.在诱导外植体脱分化及再分化的过程中需要多次更换培养基D.组培苗长势弱小、适应性差,移栽前一般需要经过适应性处理答案A,3.(2023届河北唐山摸底,16)通过花药离体培养获得的个体可为新品种选育提供原材料,如图是水稻花药离体培养的操作流程,下列相关叙述,错误的是()A.图中X表示愈伤组织,Y理论上是单倍体幼苗B.操作过程中需要对水稻花药、培养基及操作工具进行灭菌处理C.过程和所用培养基中激素用量的比例不同D.水稻花药离体培养的过程体现了生殖细胞的全能性答案B,4.(2023届河北邢台开学考,12)在获得番茄马铃薯杂种植株的
3、过程中,为方便杂种细胞的筛选和鉴定,科学家们利用红色荧光蛋白和绿色荧光蛋白分别标记了番茄和马铃薯的原生质体上的蛋白质,其培育过程如图所示。下列相关叙述错误的是(),A.过程中应在等渗环境中进行,可使用蜗牛消化道提取液来降解两种植物的细胞壁B.在挑选融合后的原生质体时,应选择在荧光显微镜下能观察到细胞表面具有两种荧光颜色的C.过程和采用了植物组织培养技术,其原理是植物细胞的全能性D.若图中杂种细胞为四倍体,则用该植物体的花粉离体培养后获得的植株为二倍体答案D,5.(2023届重庆八中期初,8)利用山金柑愈伤组织细胞(2n)和早花柠檬叶肉细胞(2n)进行体细胞杂交可以得到高品质、抗逆性强的杂种植株
4、。如图是7组杂种植株核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是(),A.进行原生质体融合有多种手段,如电刺激、离心、聚乙二醇、病毒等诱导B.细胞融合依赖膜的流动性,获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染C.可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选D.杂种植株是四倍体,其核基因只来自早花柠檬,线粒体基因只来自山金柑答案C,考点二动物细胞工程,6.(2023届河北秦皇岛摸底,4)科研人员构建了靶向膜蛋白H的抗体药物偶联物。该抗体药物偶联物携带DNA抑制剂,可靶向诱导乳腺癌细胞凋亡,研究表明该抗体药物偶联物在乳腺癌治疗中疗效很好。下列相关叙述,正确的是()A.膜蛋白H基因可能仅在乳腺
5、癌细胞中表达B.膜蛋白H在内质网和高尔基体上合成C.乳腺癌细胞体外培养时表现出贴壁生长和接触抑制现象D.该抗体药物偶联物激活机体的体液免疫用以预防乳腺癌发生答案A,7.(2023届辽宁六校期初,19)单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用,如图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程,下列有关叙述正确的是(),A.提取脾B淋巴细胞有多种,是因为一种抗原可诱导产生多种B细胞B.诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法完全相同C.在具有杂交瘤细胞的培养板上滴加相应抗体,出现阳性反应的即为目标细胞D.筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养答案D,8.(202
6、3届河北邯郸摸底,13)如图是体细胞核移植的流程图,下列说法不正确的是()A.操作过程中需要将卵母细胞培养到M期,采用显微操作将卵母细胞去核B.利用体细胞核移植技术,可以加速家畜遗传改良进程,促进优良种畜繁育C.重新组合的细胞需用物理或化学方法激活,目的是使其完成细胞分裂和发育进程D.核移植时,提供细胞核和卵母细胞的动物都应为雌性答案D,9.2022 T8联考(2),16科学家通过导入少量基因,将人体高度分化的成熟体细胞重新编程为可发育成身体组织的非成熟细胞,这种细胞与人类胚胎干细胞极其相似,称为诱导多能干细胞(iPS细胞),iPS细胞能被诱导分化为肝细胞、神经细胞等人身上几乎所有的细胞类型,
7、被誉为再生医疗的王牌,下列相关说法不正确的是()A.iPS细胞能分化成不同种类细胞的实质是基因的选择性表达B.以上信息说明高度分化的成熟体细胞具有全能性C.利用iPS细胞的分化能力,有望成功治愈心脏类疾病D.iPS细胞有丝分裂后期的染色体数目和核DNA分子数目相同答案B,10.(2022吉林长春一模,42)我国首只克隆猫“大蒜”的培育过程如下。请回答:(1)图中的去核卵母细胞所处的时期为。(2)通过方法使两细胞融合,并激活重组细胞(重构胚),使其完成进程。(3)将囊胚植入代孕猫体内的过程叫,植入前需对代孕猫进行处理。囊胚能在代孕猫体内存活的生理学基础是。(4)该技术还可以应用在(答出1点)方面
8、。,答案(1)减数分裂中期(M期)(2)电融合分裂和发育(3)胚胎移植同期发情受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应(4)加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育;保护濒危物种;制备转基因克隆动物作为生物反应器等,考点三胚胎工程,11.(2023届云南玉溪一中开学考,25)胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。下列不属于胚胎工程技术包含的内容的是()胚胎移植细胞核移植胚胎分割体外受精动物细胞融合A.B.C.D.答案C,12.(2023届重庆八中月考,19)下列关于胚胎工程的叙述,正确的是()A.为使供体母牛超数排卵,可在饲料中添加适量的促性腺激素B.进行胚胎移
9、植前需要对供体和受体进行免疫检查以避免发生免疫排斥反应C.早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育D.胚胎分割时对原肠胚的内细胞团分割的次数越多,成功率越低答案C,13.(2023届河北唐县一中摸底,6)如图表示高等动物的个体发育过程,下列说法正确的是()A.图中过程表示胚胎发育,过程表示胚后发育B.受精卵卵裂的过程中,每个细胞的体积不断增大C.囊胚从透明带中伸展出来这一过程称为孵化D.原肠胚是进行胚胎移植的最好时期答案C,14.(2022河北正定中学月考,26)现代生物科技在农畜牧业等领域应用广泛,试管牛、克隆牛、含人乳铁蛋白转基因奶牛相继诞生,请回答相关问题:(1)试管牛培育
10、过程中,首先要用激素处理良种母牛,让其超数排卵,但只有发育到时期的卵子才具备与精子受精的能力。同时,在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行。(2)克隆牛培育过程中,体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,其原因是。(3)培育含人乳铁蛋白转基因奶牛过程中,所构建的基因表达载体必须包括:人乳铁蛋白基因、启动子、终止子、和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的。(4)培育试管牛、克隆牛和转基因牛三者共有的技术是、。,答案(1)外源促性腺M同期发情处理(2)体细胞分化程度高,不容易表现全能性(3)标记基因受精卵(4)早期胚胎培养胚胎移植,创新植物的“不对称体细胞杂交”,1.(2022
11、山东日照二模,1)芝麻油富含有助于大脑发育的DHA。研究人员期望通过不对称体细胞杂交技术(将用射线处理后染色质钝化破坏的供体原生质体,与未经辐射处理的受体原生质体融合),将芝麻的有益基因转入普通小麦,获得具有受体全套染色体组、仅少量供体染色体片段的改良小麦杂种。下列分析错误的是()A.用灭活病毒诱导芝麻和小麦的原生质体融合体现了细胞膜的流动性B.改良小麦杂种植株的形成需经过脱分化和再分化培养过程C.改良小麦杂种的染色体上可能整合了含有芝麻有益基因的染色体片段D.不对称体细胞杂交可能会打破供体不良与优良性状的基因连锁,去除不良性状答案A,2.(2023届山东烟台二模,20)(不定项)“不对称体细
12、胞杂交”法可以将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内,获得不对称杂种植株。大剂量的X射线能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等。下列叙述正确的是()A.获取亲本原生质体时,需在蔗糖浓度低于细胞液浓度的缓冲液中进行B.可用X射线照射、高Ca2+高pH处理等方式诱导两亲本原生质体的融合C.与转基因技术相比,该法可转移控制优良性状的多基因,甚至是未知基因D.不对称体细胞杂交法存在变异的不定向性,需对杂种植株进行大量筛选答案CD,A组,1.(2022北京,11,2分)将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中,接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(M
13、c)。据此分析,下列叙述错误的是()A.获得Mc的生物技术属于核移植B.Mc表皮中有两种基因型的细胞C.注射入的细胞会分化成Mc的多种组织D.将接受注射的囊胚均分为二,可发育成两只幼鼠答案A,2.(2022辽宁,14,2分)蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中,外植体切口处细胞被破坏,多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物,这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡,导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是()A.花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中B.适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变C.在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变D.宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体答
14、案D,3.(2022湖北,7,2分)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究,结果发现其培养的原代神经元生长缓慢,其原因不可能的是()A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封C.血清经过高温处理后加入培养基D.所使用的培养基呈弱酸性答案A,4.(2022浙江1月选考,7,2分)农作物秸秆的回收利用方式很多,其中之一是将秸秆碎化后作为食用菌的栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用,相当于植物组织培养中固体培养基的()A.琼脂+蔗糖B.蔗糖+激素C.激素+无机盐D.无机盐+琼脂答案A,5.(2022浙江6月选考,23,2分)下列关于菊花组织培养的叙述,正确的是()A.用自然生长的
15、茎进行组培(组织培养)须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒B.培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换C.组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富D.不带叶片的菊花幼茎切段可以通过器官发生的途径形成完整的菊花植株答案D,6.(2022江苏,4,2分)下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是()A.通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精B.哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质C.克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程D.将小鼠桑椹(葚)胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖答案C,7.(
16、2022江苏,14,2分)航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是()A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动答案B,8.(2022山东,15,2分)如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是()A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射
17、2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞答案D,9.(2022江苏,19,3分)(多选)如图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程,在人鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞、中人的4种酶活性,只有具有芳烃羟化酶活性,只有具有胸苷激酶活性,、都有磷酸甘油酸激酶活性,、均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有(),A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B.细胞、分别为人人、人鼠、鼠鼠融合细胞C.芳烃羟化酶基因位于2号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上D.胸苷激酶基因位于17号染色体上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上答案ACD,10.(2022
18、辽宁,24,10分)某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中,需要表达N蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。.N蛋白胞外段抗原制备,流程如图1图1(1)构建重组慢病毒质粒时,选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因,目的是。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞,质粒被包在脂质体(填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”)。,(2)质粒在包装细胞内组装出由组成的慢病毒,用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。.N蛋白胞外段单克隆抗体制备,流程如图2图2(3)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后,取小鼠脾组织用酶处理,制成细胞悬液,置于含有混合气
19、体的中培养,离心收集小鼠的B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞进行融合。,(4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到96孔板,进行培养。用技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生N蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株,经体外扩大培养,收集,提取单克隆抗体。(5)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合,形成,实现特异性治疗。答案(1)便于重组DNA分子的筛选双分子层中(2)衣壳、N蛋白胞外段基因的核酸片段(3)胰蛋白酶、胶原蛋白CO2培养箱(4)克隆化抗原抗体杂交细胞培养液(5)抗体药物偶联物(ADC),11.(2022海南,20,13分)以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4
20、个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs),诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs),然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中,最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代,实验流程如图。回答下列问题。,(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的,为了获得单细胞悬液,鸡胚组织剪碎后需用处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加等天然成分,以满足细胞对某些细胞因子的需求。(2)体外获取OSNL的方法有(答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白,需构建基因表达载体,载体中除含有目的基因
21、和标记基因外,还须有启动子和等。启动子是识别和结合的部位,有了它才能驱动。(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是。,(4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是。(5)该实验流程中用到的生物技术有(答出2点即可)。答案(1)胰蛋白酶、胶原蛋白酶血清(2)基因文库法、PCR技术、人工合成法(任答1种)终止子RNA聚合酶目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质(3)基因的选择性表达(4)诱导iPS细胞的技术是将已分化的细胞诱导为类似胚胎干细胞的一种细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)的技术;体细胞核移植技术是将动物一个细胞
22、的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术(5)基因工程、动物细胞培养,12.(2022全国甲,38,15分)某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊,为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代,该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题。(1)为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液,精液保存的方法是。在体外受精前要对精子进行获能处理,其原因是;精子体外获能可采用化学诱导法,诱导精子获能的药物是(答出1点即可)。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞,因为卵母细胞达到时才具备与精子受精的能力。(2)体外受精获得的受精卵发育
23、成囊胚需要在特定的培养液中进行,该培养液的成分除无机盐、激素、血清外,还含的营养成分有,(答出3点即可)等。将培养好的良种囊胚保存备用。(3)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作,以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是。答案(1)低温冷冻保存(-196 液氮中保存)精子不能直接与卵子受精,必须经获能处理后才能获得受精能力肝素、Ca2+载体M期(2)有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸(3)对非繁殖期受体母羊注射雌激素使其发情;取保存的囊胚,用分割针处理获得滋养层细胞,对其进行DNA分析和性别鉴定,获得状态良好的雄性囊胚;将筛选得到的胚胎移植入受体母羊子宫内,B组,1.(
24、2021辽宁,3,2分)下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述,错误的是()A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合B.用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体C.基因工程中常用噬菌体转化植物细胞D.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防答案C,2.(2021浙江1月选考,18,2分)如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是()A.步骤的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤到的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤培养过程中不会发生细胞转化(遗传物质发生改变)答案C,3.(2021福建,11,2分)科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种,技术流程
25、示意图如下。下列叙述正确的是()A.愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的B.获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状C.可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生D.用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体答案D,4.(2021辽宁,13,2分)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是()A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定B.过程需要提供95%空气和5%CO2的混合气体C.过程常使用显微操作去核法对受精卵进行处理D.过程将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植答案B,5.(2021山东,15,2分)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇,一个抗原决定簇只能
26、刺激机体产生一种抗体,由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内,可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗,也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是()A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况答案D,6.(2021浙江6月选考,20,2分)采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定点插入受精卵的Y染色体上,获得转基因雄性小鼠。该转基因
27、小鼠与野生型雌性小鼠交配,通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是()A.基因编辑处理的受精卵在体外培养时,不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液B.基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期,须将其植入同期发情小鼠的子宫,才可获得表达EGFP的小鼠C.分离能表达EGFP的胚胎干细胞,通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠D.通过观察早期胚胎的荧光,能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎答案B,7.(2020山东,14,2分)经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚,通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是()A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子B.体外受精
28、前要对小鼠的精子进行获能处理C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得答案C,8.(2020山东,13,2分)两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂,形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出,未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理,将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种,过程如图所示。下列说法错误的是(),A.过程需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞B.过程的目的是使中间偃麦草的染色体断裂C.过程中常用灭活的
29、病毒诱导原生质体融合D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段答案C,9.(2020海南,16,3分)将人细胞与小鼠细胞融合得到的人-鼠杂种细胞进行长期培养,杂种细胞随机丢失一部分人的染色体后,染色体数目会保持稳定。选取三种杂种细胞,对编码人的芳烃羟化酶(AHH)和磷酸甘油酸激酶(PGK)的基因进行染色体定位研究,结果如表(“+”表示有,“-”表示无)。,下列有关叙述错误的是()A.聚乙二醇可诱导人细胞与小鼠细胞融合B.培养杂种细胞时,通常需在培养液中添加一定量的抗生素C.编码AHH的基因在11号染色体上D.编码PGK的基因在X染色体上答案C,10.(2019江苏,20,2分)为探究矮
30、牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如图。下列叙述正确的是()A.过程获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中B.过程需提高生长素的比例以促进芽的分化C.过程需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性答案D,11.(2021重庆,26,15分)为了研究PDCD4基因对小鼠子宫内膜基质细胞凋亡的影响,进行了相关实验。(1)取小鼠子宫时,为避免细菌污染,手术器具应进行处理;子宫取出剪碎后,用处理一定时间,可获得分散的子宫内膜组织细胞,再分离获得基质细胞用于培养。(2)培养基中营养物质应有(填写两种);培养箱中CO2浓度为5%,其主要作用是。(3)在
31、含PDCD4基因的表达载体中,启动子的作用是。为了证明PDCD4基因对基质细胞凋亡的作用,以含PDCD4基因的表达载体和基质细胞的混合培养为实验组,还应设立两个对照组,分别为,。经检测,实验组中PDCD4表达水平和细胞凋亡率显著高于对照组,说明该基因对基质细胞凋亡具有(填“抑制”或“促进”)作用。答案(1)灭菌胰蛋白酶或胶原蛋白酶(2)无机盐、葡萄糖、氨基酸、微量元素、促生长因子、血清维持培养液的pH(3)RNA聚合酶的识别和结合位点,驱动转录出相应的mRNA基质细胞悬浮液、空载体和基质细胞的混合培养液促进,12.(2021湖南,22,15分)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现
32、设计实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。回答下列问题:(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是,这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的断开。,(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,需要定期更换培养液,目的是。(3)与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率更低,原因是。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞,在形态上表现为(答出两点即可),功能上具有。(4)鉴定转基因动物:以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选融合杂种细胞,制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路。,答案(1)限制酶(限制性内切核酸酶)磷酸二酯键(2)清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害(3)体细胞分化程度高,表现全能性十分困难细胞体积小,细胞核大,核仁明显发育的全能性(4)B提取此克隆动物的肝脏蛋白,作为抗原,与M蛋白的单克隆抗体进行抗原抗体杂交,若未出现杂交带,证明M基因已失活;若出现杂交带,证明M基因未失活,
