1、GB/T24862-20106清洗与消毒6.1玻璃器皿清洗与消毒6.1.1浸泡所需的玻璃器皿在含有洗涤剂的清水中浸泡12h。6.1.2刷洗选软毛毛刷，反复洗刷后用清水冲洗3次，三蒸水冲洗3次后，60下烘干后备用。6.1.3酸浸酸浸时间为24h。6.1.4冲洗酸浸后先用自来水反复冲洗10次以上，最后用重蒸水浸洗3次5次，烘干包装。6.1.5消毒高压灭荫应以0.14MPa0.16MPa的压力下持续15min30min。6.1.6初次玻璃器皿使用初次使用玻璃器皿需要先经过浸泡和洗刷再置于5%稀盐酸溶液中浸泡12h以上，其余操作同6.1.3、6.1.4和6.1.5等步骤。6.2金属器皿清洗与消毒金属材
2、质的器具除了没有酸浸处理步骤外，其余步骤同6.1。6.3塑料与橡胶制品清洗与消毒塑料和橡胶材质的器具用清水浸泡和冲洗同玻璃器皿清洗，之后还需要用2%的NOH溶液浸泡12h,清水冲洗和烘干后用1%稀盐酸浸泡30mi,再用清水和三蒸水分别冲洗3次，高压灭菌和烘干后备用。高压灭菌以0.073MPa的压力下持续10min。7主要试剂与溶液配刺主要试剂与溶液配制参见附录A。除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂。实验用水符合GB/T6682一级用水的要求8体外培养细胞鉴定8.1细胞形态检测8.1,1光学显微镜检测在倒置相差显微镜下，直接观察和记录培养细胞的形态和生长状况。刚贴壁细胞边界清晰，核呈圆形，核浆
3、比米小，细胞排列整齐，无重叠生长。8.1.2 Giemsa染色检测将盖玻片置于细胞培养瓶中，在5%CO2培养箱中37培养，细胞形成单层后，取出盖玻片，用碱酸级冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)冲洗，放在载玻片上，自然干燥。固定液固定I0min,Gimsa染色2min,置于显微镜下观察。正常细胞的细胞核被染成紫红色或蓝紫色，细胞质被染成浅红色。8.2微生物检测8.2.1细菌和真菌检测取5L细胞悬液，置于8mL无抗生素培养基中，混匀，300g离心5min,重复2次。再用2mL无抗生素培养基重悬，取0.5mL接种到胰蛋白胨培养基中，置于37C培养箱以检测细菌：取0.5mL接种到麦芽汁培养基中，置于26培养箱以检测真菌。分别培养2周后，晃动悬液，置于显微镜下观察，无异物则细胞未受细菌和真菌污染。2
