1、GB/T8312-2002按GB/T8302的规定。6.2试样制备按GB/T8303的规定。6.3测定步骤6.3.1试液制备称取1.0g(准确至0.0001g)磨碎茶样(6.2)，置于500mL烧瓶中，加4.5g氧化镁及300mL沸水，于沸水浴中加热，浸提20min(每隔5min摇动一次)，浸提完毕后立即趁热减压过滤，滤液移入500mL容量瓶中，冷却后，用水定容至划度，混匀。取一部分试液，通过0.45m滤膜过滤，待用。6.3.2色谱条件6.3.2.1检测波长：紫外检测器，波长280nm。6.3.2.2流动相：水：甲醇的体积分数为7：3。6.3.2.3流速：0.5mL/minl.5mL/min.
2、6.3.24柱温：40C。6.3.2.5进样量：10L20L。6.3.3测定准确吸取制备液(6.3.1)10L20L,注入高效液相色谱仪，并用咖啡碱标准液(5.3)制作标准曲线，进行色谱测定。7结果计算7.1计算方法比较试样和标准样的峰面积，按式(1)计算：9台咖啡碱(%)=，Xm1000X100（1）式中：C一测定液中咖啡碱含量，g:L一样品总体积，mL:L2一进样体积，L山一试样的质量，g:1一试样干物质含量，%。如果符合重复性(7.2)的要求，取两次测定的算术平均值作为结果，结果保留小数点后一位。7.2重复性同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.2g。第二法紫外分光光度法8原理茶叶中的咖啡碱易溶于水，除去干扰物质后，用特定波长测定其含量。9仪器和用具实验室常规仪器及下列各项：9.1紫外分光光度仪。9.2分析天平：感量0.001g。2
