1、中华人民共和国国家标准饲料中蓖麻碱的测定高效液相色谱法GB/T23883-2009中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政箱码：100045网址电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本8801230116印张0.5字数7千字2009年8月第一版2009年8月第一次印刷书号：1550661-38471如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话：(010)68533533GB/T23883-20095.2离心机：转速大于3000r/min。5.3恒温水浴。5.4涡旋振荡器。5.5定量滤纸。5.6固相萃取小柱：亲水亲油平衡型聚
2、合物填料，30mg,1mL,或性能相当者。5.7固相萃取装置。5.8氮吹仪，5.9高效液相色谱仪：配有紫外检测器。6试样制备按照GB/T20195的规定制备试样，粉碎过孔径0,45mm目筛，充分混匀，装瓶，备用。7测定步骤7.1提取准确称取蓖麻粕试样0.5g(精确至0.0001g)或饲料试样5g(精确至0.001g)于50mL带螺口离心管中，加20mL甲醇，拧紧盖子，于75C水浴中提取4h(约每30min取出于涡旋振荡器上振荡30s)。取出于离心机上以3000r/min离心10min,将上层清液通过带有定量滤纸的50mL漏斗过滤于50mL容量瓶中，残渣再分别用20mL和10mL甲醇按上述方法提
3、取10min,离心，合并提取液，最后用无水甲醇定容至刻度。对于蓖麻柏试样，取上述提取液过0.45m滤膜，可直接上机测定，饲料试样提取液则需作进一步净化处理。7.2净化移取提取液(7.1)2.00mL于10mL试管中，于氮气吹干仪上吹干，加入2.00mL氨水溶液(4.3)，于涡旋振荡器上振荡308。将固相萃取柱(5.6)置于固相萃取装置上，依次用1.0mL甲醇和1.0mL水活化：加载1.00mL该试样溶液，控制流速不超过1.0mL/min:用1.0mL水淋洗小柱，抽干1min:最后用1.00mL30%的甲醇(4,4)洗脱，加压，完全收集洗脱液到进样瓶中。7.3测定7.3.1色谱条件色谱柱：C1s填料，长150mm,内径3.9mm,粒度5m,或相当者。流动相：乙腈十水=10十90。流速：l.0mL/min。进样体积：20L。检测波长：308nm。7.3.2定量方法使用蓖麻减标准工作液I(4.6.2),以峰面积对浓度的工作曲线，对蓖麻粕柏样品进行外标法定量：同样使用蓖麻碱标准工作液(4.6.3)，以峰面积对浓度的工作曲线，对饲料样品进行外标法定量。蓖麻碱标准品的色谱图参见附录A。8结果计算试样中蓖麻碱质量分数w(mg/kg)按式(1)计算：2
