1、GB/T36861-2018饲料添加剂阝-甘露聚糖酶活力的测定分光光度法1范围本标准规定了测定饲料添加剂B甘露聚糖薄活力的分光光度方法。本标准适用于饲料添加剂P甘露聚糖酶及其复合酶。本方法的定量限为10U/g。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版木本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1甘露聚糖酶活力单位mannanase activity unit在37、pH为5.5的条件下，每分钟从浓度为3mg/mL的甘露
2、聚糖溶液中释放1mol还原糖所需要的酶量为一个B甘露聚糖酶活力单位(U)。4原理B甘露聚糖酶能将甘露聚糖降解成寡糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴中与DNS试剂发生显色反应。反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中？甘露聚糖酶的活力成正比。通过分光光度计比色测定反应液的吸光度，计算出3甘露聚糖酶的活力。5试剂或材料除非另有说明，试剂均为分析纯。5.1水：符合GB/T6682中二级水的规定。5.2氢氧化纳溶液(200g/L):称取20.0g氢氧化钠，加水溶解，定容至100mL。5.3乙酸溶液(0.1mol/L):取冰乙酸0.60mL,加水稀释，定容至100mL。5
3、.4乙酸钠溶液(0.1mol/L):称取1.36g三水乙酸钠，加水溶解，定容至100mL。5.5乙酸-乙酸钠缓冲溶液(0.1mol/L,pH5.5):称取23.14g三水乙酸钠，加入1.70mL冰乙酸，再加水溶解，定容至2000mL。测定溶液的pH,如果pH偏离5.5，用乙酸溶液(5.3)或乙酸钠溶液(5.4)周节至5.5。5.63,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂：称取3,5-二硝基水杨酸（化学纯）3.15g,加水500mL,45水浴中搅拌5s。然后缓慢加入100mL氢氧化纳溶液(5,2)，不斯断搅拌，直到溶液清澈透明（在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不要超过48)。再逐步加入91.00g四水酒石酸钾钠、2.50g苯酚和2.50g无水亚
