1、DB65/T2065-20034.1.4超净工俗台（净化工作台）是一种局部层流装置接种时可保持洁净气流，能局部形成高净度的无菌环境。安置在无菌室的工作台上接种时使用。4.1.5常用接种工具接种刀、锄（扒）、铲、匙、镊、弹簧接种器，解部刀、手术刀、酒精灯、培养皿、广口瓶、菌种瓶架；袋栽接种器、打孔钻。4.1.6恒温培养室原种培养室内面积12m215m2，可培养1200瓶1500瓶，栽培种培养室内面积25m230m2,可培养3000瓶5000瓶菌种。培养室要求密闭保温、干燥、空气新鲜、光线暗、便于消毒、通风。室内设1排2排培养架。4.1.7菌种瓶（袋）、棉塞选无色或淡绿色500g750g的酒瓶供培
2、养麦粒菌种用。选厚度5丝米6丝米、12cm24cm聚丙烯筒膜做成菌种袋，用于培育棉壳菌种用。选二级未脱脂的棉花做菌种瓶的棉塞。4.2培养料的选择制作，装瓶（袋）灭菌。4.2.1麦粒原种贮存一年的精选小麦10kg,加水15kg,浸泡4h6h,.旺火煮15min,加糖0.5kg,再煮5min,熟而不烂皮不破时，捞出摊晾至无水气（含水量55%），加滑石粉120g,碳酸钙30g,拌匀。500g无色或浅绿色酒瓶装3/4瓶，塞上棉花瓶塞，在120、2kg/Cm2高压下消毒2h,灭菌后及时扣瓶，麦粒抖松，无菌室接种。4.2.2棉壳栽培种新鲜棉壳96%，石膏1.5%，尿素1%：过磷酸钙0.5%，石灰粉1%，提
3、前2d3d洒水拌匀预湿（百公斤棉壳需水120g160kg),.含水量55%。以后程序要求和麦粒原种相同。4.3菌种选择、原种、栽培种接种4.3.1菌种选择供接种用的母种或原种，应选自食用菌科研单位生产的有菌种标签，菌丝洁白、浓密粗壮、生长整齐，无色素。高纯度、高生活力的菌种。菌种内或棉塞上有霉菌孢子菌落及杂菌侵入所形成的拮抗线，湿斑；有明显的杂菌侵染或有怀疑的菌种；培养基开始干缩或瓶壁上有大量黄褐色分泌物的菌种；培养基内菌丝生长稀疏或大多是细线状菌索的菌种：气生菌丝多，形成很厚的菌被将管壁包满是老化菌种，或经多次无性繁殖的菌种，均不宜接种扩繁。4.3.2原种接种用酒精棉球擦拭斜面母种外壁，拔去
4、棉塞，在酒精灯火焰上方1cm1.5cm灼烧管口。接种锄（扒）灼烧，放在试管内侧冷却。切取2.5cm斜面菌种一块，通过酒精灯火焰上方，送入菌种瓶内，固定在接种穴上。每支斜面母种可接原种3瓶5瓶。接种后火焰灼烧瓶口、棉塞，棉塞塞上瓶口。从瓶外观察，若种块从接种穴上脱落或掉到穴内，应予调整或补接。4.3.3栽培种接种用酒精棉球擦拭原种瓶外壁，火焰烧去封口纸和瓶口外的棉花。拔去棉塞，火焰灼烧瓶白，固定在瓶架上。接种匙经火焰灼烧，在瓶内凉却，挖取原种，种块固定在接种穴内，表面另撒少许菌种碎屑。每瓶原种可接种40瓶80瓶，表面老化萎缩或已形成菌皮、子实体原基的部分弃去不用。火焰烧灼瓶口，棉塞塞上瓶口。4.4原种、栽培种的培养,菌种瓶进入培养室，最初竖放在菌种架上，当菌种向四周蔓延时，改为横卧叠放。横放的菌种瓶要经常转动，使瓶内水份均匀分布。开始每天检查一次，当菌丝复盖表面/并往下深入1cm2cm时，改为7d检查一次，去除有杂菌感染的菌瓶。3d5d后菌块未萌发的要单放，7d后仍未萌发的要及时补种。
