1、DB33浙江省地方标准DB33/30122020食品安全地方标准干制铁皮石斛叶2020-06-11发布2020-09-11实施浙江省卫生健康委员会发布DB33/3012-2020附录A铁皮石斛叶中多糖的测定方法A.1原理铁皮石斛叶中可溶性多糖提取后采用苯酚-硫酸法测定。多糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在488nm波长下有最大吸收峰，用比色法测定多糖含量。A.2试剂A.2.15%苯酚水溶液：现配现用。A.2.2浓硫酸（比重1.84）。A.2.380%乙醇溶液。A.2.4无水葡萄糖对照品：在105下恒
2、温烘干至恒重。A.2.5葡萄糖标准溶液的制备：取无水葡萄糖对照品量，准确称量，加水制成每1mL含90g无水葡萄糖的溶液。A.3仪器A.3.1分光光度计A.3.2水浴锅A.3.3离心机A.3.4分析天平A.3.5样品筛A.4分析步骤A.4.1试样的制备将待测样品进行粉碎，粉碎后的样品过三号筛。准确称取0.3000g,加水200mL,加热回流2小时，放冷，转移至250mL容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一容量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，吸取续滤液2.0mL置15mL离心管中，加入无水乙醇10.0mL,摇匀，冷藏1小时，取出，离心（转速为每分钟4000转）20分钟，弃去上清液（必要时滤过），沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次8mL,离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解，转移至25mL容量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀。A.4.2标准曲线的绘制吸取葡萄糖标准溶液溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL,分别置10mL具塞试管中，各加水补至1.0mL,各浓度点对应的葡萄糖量分别为18g、36g、54g、72g、90g,后依次加入5%苯酚溶液1.0mL,摇匀，再加入浓硫酸5.0mL,摇匀。置沸水浴中加热20分钟，取出，3
