1、中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T0858-2000进出口花粉中色氨酸的测定方法Method for the determination of tryptophan代替ZBX83004一1988in pollen for import and export1范围本标准规定了用荧光分光光度计测定色氨酸含量的方法。本标准适用于进出口花粉中色氨酸含量的测定。2测定方法2.1方法提要花粉中蛋白质经高温真空碱法水解后，利用色氨酸的天然荧光，在激发波长280m,发射波长368nm处测定其荧光强度，用标准曲线法定量。2.2试剂除有特殊要求外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。2.2.10.005mol/
2、L氢氧化钠溶液：新鲜配制。2.2.2L-色氨酸标准品：纯度99%。2.2.30.100mg/mL色氨酸标准溶液：准确称取25.0mgL-色氨酸，置于250mL容量瓶中，加入0.005mol/L氢氧化钠溶液，溶解后稀释到刻度。2.2.4可溶性淀粉。2.2.5氢氧化钠溶液：5mol/L。2.2.6淀粉氢氧化钠溶液：称取0.5g可溶性淀粉，溶于100mL微热的5mol/L氢氧化钠溶液中，新鲜配制。2.2.74mol/L尿素溶液：调节pH值为11，新鲜配制。2.2.86mol/L盐酸。2.3设备与仪器2.3.1荧光分光光度计。2.3.2聚四氟乙烯试管：内径10mm,长60mm,壁厚1mm。2.3.3玻
3、璃水解管：17料玻璃试管，内径14mm,长150mm。2.3.4充氮、抽真空装置：真空泵或抽气管、高纯氮气。2.4样品制备取有代表性样品，用四分法取出5g左右，粉碎使其全部通过60目筛孔，密闭保存，作为试样。称取10mg试样，准确至0.1mg,置于聚四氟乙烯试管(2.3.2)内，加入1mL淀粉氢氧化钠溶液后放入玻璃水解管(2.3.3)中，抽真空、充氮气，重复三次，最后抽真空封口，移入(145士2)烘箱内加热4h,关闭烘箱，冷却后取出。打开玻璃水解管，取出聚四氟乙烯试管，用水将水解液定量转移到置于冰浴中并事先加有0.7L中华人民共和国国家出人境检验检疫局2000-06-22批准2000-11-01实施
