1、SN/T2343-2009菜豆荚斑驳病毒检疫鉴定方法1范围本标准规定了菜豆荚斑驳病毒检疫鉴定的程序和方法。本标准适用于可能携带菜豆荚斑驳病毒的大豆、菜豆等种子、苗木等植物繁殖材料的检疫鉴定，也适用于介体昆虫中该病毒的检疫鉴定。2原理2.1分类地位菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus)属于豇豆花叶病毒科(Comoviridae)、豇豆花叶病毒属(Comovirus)的成员。可以分为亚组I和亚组两个亚组。相关资料参见附录A。英文缩写：BPMV2.2血清学特性BPMV具有很强的免疫原性，制备的多克隆抗体可以检测大豆叶片、种子、草本寄主植物和介体昆虫中的病毒。2.3分子生物学特性
2、BPMV是一种正链RNA病毒，其基因组由两条正链RNA-1(约3.6kb)和RNA-2(约6.0kb)组成，分别包裹在两个直径为28nm的等轴多面体粒体中。RNA-1编码5个复制所需的蛋白，RNA-2编码一个推导的细胞间运动蛋白和两个外壳蛋白。根据其基因组序列可以设计用于分子检测的特异性引物和探针，用来该病毒的特异性检测。BPMV所在的豇豆花叶病毒属的种划分标准是：a)大外壳蛋白(Coat protein,CP)的氨基酸序列同源性小于75%；b)聚合蛋白酶的氨基酸序列同源性小于75%；c)在可能的成分间没有假重组：d)抗原反应有差异。3主要仪器设备与试剂3.1主要仪器设备和用具微量研磨仪；酶标仪；洗板机：微量天平（感量：0.001g):PCR仪；电泳仪；水平电泳槽：凝胶成像仪；高速冷冻台式离心机；水浴槽；pH计；各种量程的可调移液器(1000uL、200L、20L、2uL):1
