1、 ICS 65.020.30 B 44 备案号：45690-2015 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 22882015 鹿茸中磷脂含量的测定 分光光度法 Determination of phospholipid in cornu cervi pantotrichumSpectrophotometry 2015-04-07 发布 2015-05-01 实施吉林省质量技术监督局 发 布 本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准
2、仅供内部使用 不得翻印DB22/T 22882015 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省食品药品监督管理局提出 本标准由吉林省畜牧业管理局归口。本标准起草单位：吉林省药品检验所。本标准主要起草人：杨献玲、李秀芬、申玉华、彭振宇、杨继芳。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 22882015 1 鹿茸中磷脂含量的测定 分
3、光光度法 1 范围 本标准规定了鹿茸中磷脂含量的分光光度测定方法。本标准适用于梅花鹿和马鹿鹿茸中磷脂含量的测定。本标准最低检出限为：0.3 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试料经用无水乙醇提取，磷脂与硫氰铁铵反应生成溶于三氯甲烷的红色的配位化合物，在485 nm 波长处有最大吸收，通过测定该配位化合物的吸光度可测定磷脂的含量。4 试剂和材料 除非另有注明，本标准所用试剂均为分析纯
4、试剂，水为 符合GB/T 6682规定的三级水。4.1 三氯甲烷（CHCl3）。4.2 无水乙醇（CH3CH2OH）。4.3 三氯化铁（FeCl3）。4.4 硫氰酸铵（NH4SCN）。4.5 卵磷脂标准品：纯度大于 99.0%，CAS 8002-43-5。4.6 硫氰酸铁铵溶液：取三氯化铁（4.3）2.70 g、硫氰酸铵（4.4）2.30 g，置于 100 mL 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。4.7 卵磷脂标准储备液：准确称取卵磷脂标准品（4.5）约 75 mg（准确至 0.1 mg），置于 100 mL 容量瓶中，用三氯甲烷（4.1）溶解并定容至刻度，于 4 C 冰箱中保存。此标准储备
5、液溶液每 1 mL 含卵磷脂 750 g。4.8 卵磷脂标准工作液：准确量取卵磷脂标准储备液（4.7）10 mL，置于 100 mL 容量瓶中，用三氯甲烷（4.1）定容至刻度，于 4 C 冰箱中保存。此标准工作液每 1 mL 含卵磷脂 150 g。5 仪器 5.1 可见分光光度计。5.2 分析天平：感量0.0001 g、感量 0.001 g、感量0.01 g。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 22882015 2 5.3 超声波清洗器：功率：700 w、频率：40 kHz。5.4 旋转蒸发仪。5.5 漩
6、涡混合器。5.6 离心机：转速2000 rpm。5.7 粉碎机：功率：800 w、转速：26000 rpm。6 试样的制备 6.1 取样及粉碎 根据不同规格鹿茸，在不同部位（上段、中段、下段）均匀等重取样，鹿茸样品初步粉碎（通过一号标准筛），再用四分法缩减分取约25g样品，粉碎并过四号标准筛，筛上部分样品量0.5 g，将筛上和筛下部分充分混匀后装入磨口瓶中备用。茸片：用四分法缩减分取约25g样品，粉碎并过四号标准筛，筛上部分样品量0.5 g，将筛上和筛下部分充分混匀后装入磨口瓶中备用。茸粉：直接过四号筛，筛上部分样品量0.5 g，如果筛上部分样品0.5 g，继续粉碎，直到符合要求，将筛上和筛下
7、部分充分混匀后装入磨口瓶中备用。6.2 试样溶液的制备 准确称取试样（6.1）约1.5 g（精确至0.01 g），置于250 mL具塞锥形瓶中，加入乙醇50 mL，准确称定重量，超声处理1 h，放至室温，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，收集全部滤液，取滤液25 mL，低温减压浓缩至干，准确加入10.0 mL三氯甲烷（4.1）充分溶解残渣，摇匀，过滤，滤液即为试样溶液（于4 C冰箱中保存）。7 分析步骤 7.1 标准曲线 准确吸取标准工作溶液（4.8）0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL，分别置于10 mL具塞刻度试管中，加三氯甲烷（4.1）至
8、5.0 mL刻度，加硫氰酸铁铵溶液（4.6）2.0 mL，置漩涡混合器混匀1 min，离心（5.6）10 min，取下层溶液，在485 nm波长处测定吸光度，同时以零号管作为空白，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。7.2 试料的测定 准确吸取试样溶液（6.2）1.0 mL，置与10mL具塞刻度试管中，加三氯甲烷至5.0 mL刻度，参照（7.1）项下自“硫氰酸铁铵溶液（4.6）2.0 mL”起，依法操作，测定吸光度，根据标准曲线计算出试料溶液中的磷脂浓度。8 结果计算 8.1 试样中磷脂含量按公式进行计算。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不
9、得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 22882015 3 10001000=mVCX.(1)式中：X 试样中磷脂的含量（以卵磷脂计），单位为毫克每千克（mg/kg）；C 测定试样溶液中磷脂的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V 稀释倍数，单位为毫升（mL）；m 试样质量，单位为克（g）。8.2 以重复性条件下获得的两次独立测定结果用算术平均值表示，结果保留三位有效数字。9 精密度 9.1 重复性 在重复性条件下，获得的两次平行独立测定结果10.00 mg/kg时，相对偏差应不超过5%；获得的两次平行独立测定结果10.00 mg/kg时，相对偏差应不超过10%。9.2 再现性 在再现性条件下，获得的两次平行独立测定结果10.00 mg/kg时，相对偏差应不超过10%；获得的两次平行独立测定结果10.00 mg/kg时，相对偏差应不超过20%。_ 本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印
