1、ICs 13.100C52中华 人 民共 和 国 国家 职 业 卫 生 标 准GBz/T240。-2011化学品毒理学评价程序和试验方法第3部分:急性经皮毒性试验Pr o c e d u r e s a n d t e s t s Fo r t o x i c o IOg i c a l e v a Iu a t i o n s o F c h e m i c a l s Pa r t 3:Ac u t e d e m a I t o x i c i t y t e s t11-OB-19发布12-03-01实施中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部发 布GBz/T240.3-2011口根据
2、中华人民共和国职业病防治法 制定本部分。GBZ/T240Kl 化学品毒理学评价程序和试验方法 现分为以下四十四部分:第1部分:总则;第2部分:急性经 口毒性试验;第3部分:急性经皮毒性试验;第4部分:急性吸人毒性试验;第5部分:急性眼刺激性/腐蚀性试验;第6部分:急性皮肤刺激性/腐蚀性试验;第7部分:皮肤致敏试验;第8部分:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验;第9部分:体外哺乳动物细胞染色体畸变试验;第10部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验;第11部分:体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验;第12部分:体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验;第13部分:哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验;第14
3、部分:啮齿类动物显性致死试验;第15部分:亚急性经口毒性试验;第16部分:亚急性经皮毒性试验;第17部分:亚急性吸人毒性试验;第18部分:亚慢性经口毒性试验;第19部分:亚慢性经皮毒性试验;第20部分:亚慢性吸入毒性试验;第21部分:致畸试验;第22部分:两代繁殖毒性试验;第23部分:迟发性神经毒性试验;第24部分:慢性经 口毒性试验;第25部分:慢性经皮毒性试验;第26部分:慢性吸人毒性试验;第27部分:致癌试验;第28部分:慢性毒性/致癌性联合试验;第29部分:毒物代谢动力学试验;第30部分:皮肤变态反应试验-局部淋巴结法;第31部分:大肠杆菌回复突变试验;第32部分:酵母菌基因突变试验;
4、第33部分:果蝇伴性隐性致死试验;第34部分:枯草杆菌基因重组试验;第35部分:体外哺乳动物细胞程序外DNA合成(UDs)试验;第36部分:体内哺乳动物外周血细胞微核试验;亠刚GBz/T240.3-2011第37部分:体外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验;第38部分:体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色体交换试验;第39部分:精子畸形试验;第钔部分:繁殖/生长发育毒性筛选试验;第狃部分:亚急性毒性合并繁殖/发育毒性筛选试验;第42部分:一代繁殖试验;第43部分:神经毒性筛选组合试验;第狃部分:免疫毒性试验。本部分为GBZ/T240的第本部分由卫生部职业卫本部分由中华人民共本标准起草单位:本标准主要起草
5、毒控制所。病防治院、中国疾病预防控制中心职GBz/T240.3-2011化学品毒理学评价程序和试验方法第3部分:急性经皮毒性试验1 范围GBZ/T2幻的本部分规定了基本原则、试验方法、结果评价、评价报告和结果解释。本部分适用于评价2 规范性引用文件下列文件对文件。凡是不注日期 的版本适用于本GBz/TGBz/T23 术语和定GBZ/T24 试验目的确定受试样分级和确定亚急5 试验概述,并为急性经皮毒性在试验前,先去除实量组,每组涂布不同剂量的受试样品,而后观察实验动物死亡的动物做大体解剖,对试验结束时的存活动物也应做大体解效应。6 试验方法肤局部刺激或腐蚀作用所致的全身6.1 受试样品处理不溶
6、性或难溶固体或颗粒状受试样品应研磨,过150u m 孔径筛。用适量无毒无刺激性介质混匀,以保证受试样品与皮肤 良好的接触。常用的介质有水、植物油、凡士林、羊毛脂等。液体受试样品一般不必稀释,可直接用原液试验。性经皮毒性试验意排 除受试样 品引皮毒性作用。的被毛。将实验GBz/T240.3-20116.2 实验动物首选大鼠,也可选用豚 鼠或家兔。实验动物体重要求范围分别为:大鼠z OO g 300g,豚鼠350g 450g,家兔2000g 3000g。试验期间,为避免实验动物相互抓挠,应采用单笼喂养。试验前24h,在动物背部正中线两侧剪毛或剃毛,仔细检查皮肤,要求完整无损,以免改变皮肤的通透性。
7、去毛 面 积 不 应 少 于 实 验 动 物 体 表 面 积 的10%。各 类 动 物体 表 面 积 的数 值 和 计 算 方 法 见GBZ/T240.1的附录D。6.3 剂 工 和 分 组实验动物随机分为个 5个剂量组。若使用水、植物油、凡士林、羊毛脂以外的介质和溶剂,则需设介质对照组。豚鼠或大鼠每一剂量组(单性别)不少于5只;家兔每一荆量组(单性别)不少于4只。各剂量组间要有适当的组距,可按等比或等差设置剂量,以使各剂量组实验动物产生的毒性反应和死亡率呈现剂量:反应关系。一般情况下,如果剂量达到2000m g/k g 体重仍不出现实验动物死亡时,则不需要再进行更高剂量试验。6.4 试验步骤
8、选择适当方法固定好实验动物,将受试样品均匀涂布于实验动物的去毛区,并用油纸和两层纱布覆盖,再用无刺激性胶布或绷带加以固定,以保证受试样品和皮肤的密切接触,防止脱落和动物舔食受试样品。24h 后取下固定物和覆盖物,用温水或适当的溶剂洗去皮肤上残留的受试样品。6.5 观察期限及指标观察并记录染毒过程和观察期内的动物的中毒和死亡情况。观察期限一般为14d,观察指标见GBz/T240.1的附录A,LD50的计算见GBZ/T240.1的附录B。对死亡动物进行尸检。观察期结束后,处死存活动物并进行大体解剖,如有必要,进行病理组织学检查。7 试验结果评价按GBz/T240.1的附录B计算LD5,可按GBz/
9、T240.1的附录C相应的分级原则进行评价。8 鉴定报告除GBZ2压0.1规定的一般项 目外,评价报告还应包括以下内容:a)受试样品名称、配制方法、所用浓度;b)按剂量组列表说明每组动物数、性别状况、出现毒效应的动物数、死亡动物数;o 染毒时间、染毒持续时间、染毒后动物中毒的主要表现;o LD50计算方法;LD5值及其95%可信限(包括雌、雄试验动物各 自的LD5);f)病理组织学检查结果;g)结论。2GBz/T240。s-209 结果解释经皮LD5是评价化学物急性毒性的重要参效之一,也是急性毒性分级的依据。但LDs O仅表示受试样品经皮吸收引起实验动物死亡50%的剂量,并不能全面反映受试样品经皮吸收的所有急性毒性特征,因此,评价受试样品经皮急性毒挂既要考虑其对某一品系实验动物的经皮LD50值,又要考虑其中毒症状体征表现及反应出现的早晚和持续时间,并结合体重变化与病理学检查结果,经综合分析才能得出经皮急性毒性较为全面的评价。
