1、中华人 民共和国国家标准 化学试剂分子吸收分光光度法通则 (紫外和可见光部分)UDC 5 4 8.璐:5 4-4 1G B 5 7 2 1-翎 日 Ch e mi c a l r e a g e n tG e n e r a l r u l e s f o r t h e mo l e c u l a r a b s o r p t i o n s p e c t r o p h o t o m e t r y(u l t r a v i o l e t a n d v i s i b l e)1 主题内容与适用范围 本标准规定了化学试剂分子吸收分光光度法(紫外和可见光部分)对仪器的要求和测定
2、方法。本标准适用于波长在2 0 0 一 8 5 0 n m 之间，无机化 学试荆 中杂 质含 量的测定及有机化 学试剂、指示剂和特效试剂的定性及定量分析。2 引用标准G BG B:;2化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备实验室用水规格8 术语及符号8.1 波长A(wa v e l e n g t h)在周期波传播方向上，相邻两波同相位点间的距离。单位为n m,3.2 吸收峰I a*(a b s o r p t i o n p e a k)吸收光谱中吸收最大的波长。单位渗n m,3.3 吸收光谱(a b s o r p t i o n s p e c t r u m)待测物浓度和吸收池 厚度不变时
3、，吸光度(或吸光度的任惫函数)对应波长(或波长的任意函数)的曲线。3.4 光谱带宽(s p e c t r a l b a n d wi d t h)用光谱强度的二分之一处的宽度表示。3.5 人射光通量 O o (i n c i d e n t f l u x)照射介质表面的光通量。单位为I mo8:B 透射光通量0-(t r a n s mi t t e d f i u x)穿过介质内部后射出 的光通量。单位为l m,8.7 透射比:(t r a n s mi t t a n c e)透射光通量和人射光通量之比。必，一 0.一”.”.”.”.“二“二“”“”“气1)中 华人民 共和国化学工业
4、 部1 5 5 5-0 5-2 0 批准I II 助 一 0 4一 0 1 实施G B 9 7 2 1-8 88.8 吸光度A(a b s o r b a n c e)透射比倒数的对数。，=l a g 干 。(2)8 二 参比光通最 0.(r d e r e n c e f l u x)单色光通过参比物质，并到达检测器的光通量。单位为I m.8.1 0 试样光通量0.(s a mp l e f lu x)单色光通过待测物质，并到达检测器的光通量。单位为 m,8.1 1 百分透射率:(p e r c e n t a g e t r a n s mi t t a n c e)试样光通量与参比光 通
5、量之比，用百分率表示。必。r (为)=-刁 r we es esx 1 0 0 。.o.，。.(3)勺碑r一8.1 2 厚度L (t h i c k n e s s)吸收池的两个平行且透光的内表平面之间的距离。单位为c m.3.1 3 光路长度 b(o p t i c a l p a t h l e n g t h)光通过吸收池内 溶液 的人射面和出射 面之间的 路程。3.1 4 物质的量浓度c (a mo u n t 一 o f 一 s u b s t a n c e c o n c e n t r a t i o n)溶 质 的 物 质 的量 和溶 液 体 积之比。单 位 为m o l/L
6、。3.1 5 摩 尔吸收系数a (mo l a r a b s o r p t i v i t y)厚度以厘米表示、浓度以摩 尔每升表示的吸收系 数。单位为L/c m mo l.4 方法原理 溶液中待测物分子中的价电子能够选择性地吸收紫外或可见光，从基态跃迁到激发态，形成紫外可见吸收光谱。根据紫外可见吸收光谱中的吸收峰和曦 尔吸收系数，进行定性分析。从光源辐射出的光，经过波长选择器成为单色光。当单色光通过待侧溶液时，被溶液中具有一定特 征吸 收的化 合 物吸 收，吸 收大 小与 溶液 中 待 测 物浓 度 的 关系 符 合朗 伯一 比 尔定 律:，=。澎=K ，c.”(4)式中:A 一吸光度，
7、必。人射光通量，必。r 透射光通量，K 吸收系数，b 光 路长度;c 溶液中待测物浓度。当 光 路长度 b 与吸 收系 数K 一 定 时，吸 光 度A 与 溶液 中 待测 物浓 度c 成 正比。利 用 此 定 律 可 进 行定量分析。5 试剂5.1 水 校正 仪器时配制溶液的 水应符 合G B 6 6 8 2 中二 级水的规格。选择G B 6 6 8 2 中二级水或三级水。肠.之 有机溶剂检验样品时所用的水，根据测定要求c 8 盯 2 1-a 根据产 品标准的要求 选择适宜的溶剂，并检查所用溶剂在测 定波长 附近是否符合 要 求，不得有干扰吸收峰。检定方法是 用1 c m石 英吸收池，以 空气
8、为 参比，在规定 波长下 测定有 机溶剂 的吸 光度。不同 波长下的吸光度见表 1。表 1波长范围，n m吸光度2 2 1.2 4 02 4 1-2 5 02 5 1-3 0 03 00 以上一 0.4 0.2肠 二 缓冲溶液 按产品标准规定配制，当 在紫外光区测定时，所用试剂 应无吸 收。5.4 标准样品溶液 按产 品标准中 规定，与待测 样品溶液 同时配制。5 仪器二1 仪器主要组成部分 分光光度计的主要部件包 括光 源、波长选择器、吸收池、检测器及侧，系统等。二1.1 光源 能 发射 所需 波长范 围 的 光 的器 件。可见 光 源常 用 钨 丝 灯(或 碘钨 灯)，波长 范围 约为3
9、2 0-2 5 0 0-1紫外光 源常用氢灯(或氛灯)，波长范围约为2 0 0.3 5 0 r m n o二1.2 波长选择器 能 从 光 源 辐 射 光 中 分 离 出 一 定 波 长 范 围 光 的 器 件。通 常 为 沁 光 片，搜 镜 或 光 姗 固 定 波 长 选 择 器常用滤光 片，连续变化波长选择器常用梭镜或光栅。二1.翻 吸收池 盛放待测 样品溶液 的容器。该容器应具有两 面互 相平 行、透光且有精确厚 度的平 面。按材 质可分为 玻璃和石英两种。玻璃吸收池用于可见光波长范围的测定，石英吸收池用十紫外光及可见光波长范围的测定。二1.4 检测器 能 把光 信号 转变为电 信号 的
10、器 件。通常 为光电 管或 光电 倍增管等.二1.5 测.系纯:.能放大电 信号并 将其转 变为用百分透射 率或吸光 度显示的器件。由 放大器 及指示器 等组成。仪器性能要求及测定方法1 光谱范围光谱 范 围 是 指仪 器 能 测最 M波 长范 围。萦外 光 潜范 围 是2 0一 3 8 0 n m，可 见光 谱 范 围 为3 8 0 8 5 0 n tn,5.2.之 测最范围 仪器的测量范围即百分透射率或吸光度的测定范围。二2.3 波长准确启百 分透射 率 为。-1 0 0%:吸 光 度为。一2。单色光的最大强度波长值与波长指示值之差，波长准确度:应 符 合 仪 器 规 定 的 数 值。可
11、选 择下 述 一 种 方 法 确 定G B 价 2 1-翻 二利用汞灯的较强光谱 线2 5 3.6 5,2 9 6.7 3,3 1 3.1 6,3 6 5.0 2,4 0 4.6 6,4 3 5.8 3.5 4 6.0 7 n m s b.利用氢灯光 谱线.6.1 3,6 5 6.2 8 m n(或扭灯光 谱线4 8 6.0 2,6 5 6.1 0 n m)，c.利用钦玻璃或锢钱玻玻的特征吸收峰，其吸收峰以各仪 器给定的波长 数值为准。若波长准确度大于规定的数值时，应按仪器说明书调整波长刻度至仪器规定的数值。二2.4 分辨率 是指仪器分开相邻的两条谱线的能力。分辨 率的确定可选择下述一种方法:
12、.用汞灯为光 源时，当仪器狭缝较小(约0.2 n m)时，汞 灯的三条谱线3 6 5.0 2 J 6 5.4 8,3 6 6.3 3 m n应能明显分清。b.用氢灯(或氛灯)为光源时，当仪器狭缝较小(约0.2 m n)时，测定氢灯波长 在 4 8 6.1 3,6 5 6.2 8 n m(或筑灯波长 在4 8 6.0 2,6 5 6.1 0 n m)的光谱带宽 应小于0.5 n m o二主 二 吸光度 的准确度 吸光度的仪器读数与标准溶液的标准值之差。二之 】粉外3 Y-R的m,测定方法分为紫外光区和可见光区两部分。用1 c m石英吸收池，以硫酸溶液(c定的波长处测定重铬酸钾溶液”的吸光度，H2
13、 SO4)=0.0 0 5 mo 1/L 为 参比溶液，在 表2 中规准吸光 度值见表2,测定相对 误差为士 1%。表 2波长，n m2 3 52 5 73 1 33 5 0吸 光 度0.7 4 80.8 6 50.2 9 20.6 4 0二2.5.2 可见光区的测定 用1 咖 吸收池，以硫酸溶液的吸光度，标准吸光度 值见表3。(1 1 0 0)为 参 比 溶 液，在 表3 中 规 定 的 波 长 处 测 定侧定相对误差为士1%e 表 3硫酸铜溶液”彼长，n m6 5 07 0 0巧0吸光 度0.2 2 40.5 2 70.8 1 7二2 二杂散光 竺 罗 爷 夸 竺 牢 砂波 长 处 所 接
14、 收 的 光 线 中 夹 杂 有 不 属 于 人 射 光 束 的 或 带 通 外 部 的 光 线。511CCJ p91A9tE.sfH 1 a n iEST s El*)7f 1L 4*,lf t c 4 宾 票?1tE 1 13(108/L)AC-U M P j lg o(508/L)M ff 3+i t$,ff 5 riff t$AM NT 1 0/n,钠 溶表 4波长，n m2 知3 8 0侧定溶液碘化钠溶液亚硝酸 钠溶液二2.7 吸收池的校准及配对 在定t工作中，尤 其是在 紫外光 波长测定时，需对吸 收池 作校准及配对工 作，以消 除吸 收池的 误差。G B 盯 2 1-1 日 校
15、准及 配 对 方法:在 测 定的 波长 下，于干 净 的吸 收池 中 注 人测 定用的 溶剂，以 其 中 一 个 吸 收池 为参比，测定其他吸收池的吸光度。若测定的吸收池吸光度为零，或两个被测吸收池的吸光度相等，则为配对吸收池。若不能配对，则选出吸光度最小的吸收他为参比，测定其他吸收池的吸光度，并求出校正值。测定 样 品时，将侍 测溶 液注 人 校准 过的 吸 收池 中，将测 定 的吸光 度 值减 去 该吸 收他 的 校 正 值，即为测定的真实值。二8 仪器试验室条件 仪器的设置条件应符合下述要求:二在仪器的附近不应有产生强磁场、电场及高频电磁场等的设备，b.在仪器附近不应有强振动或连续的振动
16、，c.室内无腐蚀性气体或灰尘，仪器不受阳光直射;d.室温在5 一3 5 之间，相对湿度在3 0 一 8 5%之间。7 洲定7.1 测定条件的选择7.1.1 光源 根据测定的波长选择光 源。测定波长2 0 0 一 3 5 0 n m 时用氢灯(或氛灯)，测定波长3 5 0 一 8 5 0 n m时用钨丝灯(或碘钨灯)。7.1.2 狭缝宽度 根 据待测物的类 别及检验要求，选择适宜的狭 缝宽 度。在保持人射光和透 射光狭 缝宽 度一致的 情况下，调节狭 缝宽度，使狭 缝透出的光谱 带宽 小于 样 品吸收带的带宽。狭 缝宽 度的选 择，应以 减少狭缝 宽度时待测物的吸光度不再增加为准。通常测定时选用狭缝宽度为1 丽.。7.1.3 测 定的 波长 在制定产品标准时，根 据待测 物吸 收峰的 位置 确定测 定的 波长，通常 是在吸光度 最大的 波长范围内 选 择。若最 大 吸 收 峰很 尖 锐 或 有其 他 吸 收 峰干 扰时，可 选 择 吸 收曲 线中 的 其 他 波 长。7.1.4 吸收池 根据测定的波长选择不同材质的吸收池。波长为2 0 0-3 5 0 n m 时用石英吸收池，波长为3 5
